下图表示人体细胞中几种主要元素占细胞鲜重的百分比，其中表示氧元素的是 A．甲 B...

细胞是生命活动的基本单位。下列关于细胞结构的叙述，错误的是

A．细菌有核糖体，无叶绿体

B．蓝藻无细胞核，也无叶绿体

C．水绵有细胞核，无叶绿体

D．酵母菌有细胞核，无叶绿体

内皮素(ET)是一种含21个氨基酸的多肽，具有强烈的血管收缩和促进平滑肌细胞增殖等作用，其功能异常与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系。ET主要通过与靶细胞膜上的ET受体结合而发挥生物学效应。ETA是ET的主要受体，科研人员试图通过构建表达载体，实现ETA基因在细胞中高效表达，为后期ETA的体外研究以及拮抗剂的筛选、活性评价等奠定基础。其过程如下图所示，图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的识别序列为          ，限制酶XhoⅠ的识别序列为          。请分析回答：

（1）完成过程①需要加入缓冲液、原料、     和引物等，过程①的最后阶段要将反应体系的温度升高到95℃，其目的是     。

（2）过程③和⑤中，限制酶XhoⅠ切割DNA，使     键断开，形成的黏性末端是     ；用两种限制酶切割，获得不同的黏性末端，其主要目的是     。

（3）构建的重组表达载体，目的基因上游的启动子的作用是     ，除图示结构外，完整的基因表达载体还应具有     等结构（至少写出两个结构）。

（4）过程⑥中，要用CaCl2预先处理大肠杆菌，使其成为处于容易吸收外界DNA的     的细胞。

（5）利用SNAP基因与ETA基因结合构成融合基因，目的是     。

图1和图2分别表示两种获取胚胎干细胞的途径。图1表示的是科学家把4个与胚胎发育相关的特异性基因导入成年小鼠细胞，培养出了诱导多潜能干细胞，称为iPS细胞，类似于胚胎干细胞样细胞，再将iPS细胞转入小鼠乙体内培养，结果如图所示。图2表示研究人员利用小鼠（2N=40) 获取单倍体胚胎干细胞的一种方法，哺乳动物单倍体胚胎干细胞技术是遗传学研究的新手段。请分析并回答下列问题：

（1）图1过程中，通常选择传代培养    代以内的成纤维细胞导入特异性基因；成纤维细胞转变为iPS细胞，类似于植物组织培养中的    过程。

（2）克隆培养iPS细胞时，需要加入一定量的    ，以防止杂菌污染。早期研究发现在 iPS 细胞诱导培养的过程中会出现大量不具备干细胞功能的细胞，若用维生素C处理，能显著提高iPS细胞的诱导成功率，推测其原因是    。

（3）研究人员将iPS细胞团注射入缺乏T细胞的小鼠体内，细胞团能继续生长。由此可推测图1中iPS细胞团逐渐退化的原因是    。

（4）图2中，研究人员需要对实验小鼠丙注射促性腺激素使其    ，从而获得更多的卵母细胞，再利用SrC12溶液处理、激活卵母细胞，并在体外培养至［④］    期，再利用流式细胞仪筛选出单倍体细胞。

（5）研究发现，单倍体胚胎干细胞也能分化，形成不同功能的细胞、组织和器官，该技术培育的单倍体动物可成为研究     （填“显性”或“隐性”）基因功能的理想细胞模型。

为了从动物组织中提取纯净的DNA，首先要快速、有效地消化裂解动物组织细胞。消化裂解动物组织常用的方法有蛋白酶（如蛋白酶K）水解、表面活性剂处理、变性剂处理等。某科研人员拟使用加酶洗衣粉消化裂解猪肌肉样本，并提取猪的DNA。实验步骤如下：

①取500mg剪碎的猪肌肉组织于离心管中，加40mg加酶洗衣粉和1.5mL超纯水混合，在一定温度条件下水浴消化24h；

②加入苯酚、氯仿、异丙醇(25:24:1)混合液使蛋白质变性，抽提蛋白质；

③加0.2mg/mL的RNA水解酶于37℃水浴1h；

④加醋酸钠和无水乙醇，高速离心15min；

⑤用70%乙醇洗涤沉淀两次，风干，得到高纯度的DNA。

请回答有关问题：

（1）加酶洗衣粉可以消化裂解动物组织细胞的原理是    。 

（2）步骤③的目的是    ，步骤④中使用无水乙醇的目的是     。

（3）将提取到的DNA用2mol/L的NaCl溶液溶解后，与    试剂共热，冷却后可观察到溶液呈蓝色。

（4）实验中发现，实验前将新鲜的猪肌肉组织置于液氮冷藏，与室温下放置相同时间的等量猪肌肉组织相比，提取到的DNA含量较多，最可能的原因是    。

（5）如果要将加酶洗衣粉法提取DNA与蛋白酶K法提取DNA的效果进行对比，请简要说明实验设计思路    （2分）

酵母菌作为一种常见的微生物，在传统和现代生物技术中得到了广泛的应用。请回答下列问题：

（1）酵母菌广泛分布在自然界中，科研人员为了分离、筛选蓝莓果酒专用酵母来改善蓝霉果酒的品质，进行了如下实验：

①  取不同品种的成熟蓝莓制果浆，置于适宜温度的恒温培养箱中自然发酵，直至产生大量气泡和明显酒味。取不同品种成熟蓝莓的原因是    。

②将蓝莓发酵液用    进行梯度稀释后，进行涂布平板操作（每个梯度3个平板），恒温培养2d，根据酵母菌菌落特征挑取单菌落。

③将挑取的单菌落扩大培养后，通过    法分离纯化，然后保存菌种。

④检测筛选菌株的发酵性能，根据实验结果推知，    （品种）对乙醇和酸的耐受性最强，是较理想的酿酒菌种。

（注：+数量表示菌落数量的多少，-表示没有菌落生长）

（2）下图是固定化酵母发酵与游离酵母制作蓝莓果酒发酵的对比结果，从图中可以看出，两者发酵速率相近，但发酵前期游离发酵比固定发酵产生的酒精量多，主要原因是    ；后期游离酵母发酵速度减慢，除了底物浓度降低外，还可能是因为    。相较于固定化酶技术，固定化酵母细胞常用的方法是    ，固定化酵母发酵的主要优点是    。