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科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如...

科研人员利用胚胎干细胞ES细胞对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图:

1步骤①的技术名称是            

2将基因导入ES细胞而不是导入到上皮细胞是因为ES细胞具有              

3步骤③中,需要构建含有干扰素基因的                。由于DNA复制时,子链只能由5向3方向延伸,故构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时,可以从下图A、B、C、D四种单链DNA片段中选取作为引物。对干扰素基因片段和质粒进行酶切时,可选用限制酶的组合为                            

4将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察,选择发          色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否表达,可以采用               的方法。

 

(1)核移植 (2)发育的全能性 (3)基因表达载体 B和C HindⅢ和PstⅠ EcoRⅠ和Pst Ⅰ (4)绿 抗原一抗体杂交 【解析】(1)核移植是将体细胞核移植到去核的卵母细胞中,所以实验前要去除卵母细胞的细胞核. (2)将基因导入ES细胞而不是导入到上皮细胞是因为ES细胞具有全能性. (3)步骤③是将目的基因导入ES细胞,该过程之前需要构建基因表达载体;DNA复制只能从5’到3’,因此构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时,可以从图2中A、B、C、D四种单链DNA片段中选取B和C作为引物.由图可知,SamⅠ酶的识别序列和切割位点位于目的基因上,用该酶切割会破坏目的基因,因此对干扰素基因片段和质粒进行酶切时,可选用限制酶HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ. (4)用限制酶HindⅢ和PstⅠ或EcoRⅠ和PstⅠ切割时会破坏红色荧光蛋白基因,但不会破坏绿色荧光蛋白基因,因此将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察,选择发绿色荧光的细胞进行体外诱导.为检测干扰素基因是否表达,可以采用抗原-抗体杂交法 【考点定位】基因工程的原理及技术;胚胎干细胞的研究与应用 【名师点睛】目的基因的检测和表达: 1、首先要检测 转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因,方法是采用 DNA分子杂交技术. 2、其次还要检测 目的基因是否转录出了mRNA,方法是采用用标记的目的基因作探针与 mRNA杂交. 3、最后检测 目的基因是否翻译成蛋白质,方法是从转基因生物中提取 蛋白质,用相应的 抗体进行抗原-抗体杂交. 4、有时还需进行 个体生物学水平的鉴定.如 转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。  
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考点分析:
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研究酶的化学性质和作用机理,有助于了解生命活动的规律并指导生产和生活实践。请冋答下列问题:

1甲、乙两种酶用同一种蛋白酶处理,酶活性与处理时间的关系如图1所示。甲酶的化学本质最可能是       

2在实际生产中,同定化细胞技术实质上固定的是          。制备固定化酵母细胞时,常用的方法是上图2中[   ]         填数字序号及名称

3在生活实践中,酶制剂在洗衣粉中被广泛应用。某研究性学习小组为探究某品牌洗衣粉中酶催化作用的最适温度,设计了如下装置进行实验,并将结果用曲线图A、B表示如图3

①使用该加酶洗衣粉的最适宜温度为           

②在0℃和75℃时,酶的催化效率基本都为零。但当温度再度恢复到45℃时,后者酶的催化能力已不能恢复,这是因为                     

4在现代生物工程中,可用酶在体外处理“蛋白质一DNA复合体”以获得包裹在蛋白质中的DNA片段信息,过程如图4所示。

①a、b过程中,酶作叫的部位依次是              

②若将获得的DNA片段用PCR技术进行扩增,与细胞内的DNA复制过程相比,利用PCR技术扩增DNA 时所需酶的不同之处是                     

 

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某学校生物小组在一块较为封闭的低洼地里发现了一些野生植株,这些植株的花色有红色和白色两种,茎秆有绿茎和紫茎两种。同学们分两组对该植物的花色、茎色进行遗传方式的探究。请根据实验结果进行分析。

1从第一组花色遗传的结果来看,花色隐性性状为          

2若任取B组的一株亲本红花植株使其自交,其子一代表现型的情况是               

3由B组可以判定,该种群中显性纯合子与杂合子的比例约为           

4从第二组茎色遗传的结果来看,隐性性状为        ,判断依据的是        组。

5如果F组正常生长繁殖的话,其子一代表现型的情况是             

6A、B两组杂交后代没有出现3 : 1成1 : 1的分离比,试解释:             

 

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下图是某一生物个体的细胞分裂示意图和染色体、染色单体、DNA分子数目关系图。请回答以下问题:

1若图I中的2和6表示两个Y染色体,则此图可以表示的细胞是  

A体细胞           B初级卵母细胞    

C初级精母细胞       D次级精母细胞

2该生物体细胞中染色体数最多有       条。假设该生物的一个初级精母细胞中的一条染色体上的DNA分子用15N进行标记,正常情况下,在该细胞分裂形成的精子细胞中,含15N的精子所占比例为          

3图II中有       个染色单体,如果①上某位点有基因B,则基因b正常情况下应存在于        上。

4图II细胞中染色体、染色单体、DNA数量关系可用图III中的            表示。

 

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在动物细胞培养过程中,通过一系列技术方法,就能测得一个细胞周期以及周期中各个时期所需 的时间。下图一表示一个细胞周期,其中分裂间期包含G1、S、G2三个阶段其中G1期主要合成RNA与 DNA复制相关的酶,G2期主要合成另一些RNA和分裂期相关的酶,设G1期细胞核中的DNA含量为2c图二表示动物细胞培养过程。

请据图作答:

1用图一中字母的先后顺序表示一个完整的细胞周期           

2制作动物细胞悬浮液,应先剪碎绗织,再用                使细胞分开。在图二的细胞培养中培养条件正常,在何种情况下细胞就会停止分裂增殖?              

3相对正常的细胞培养,若用DNA合成抑制剂处理所培养的细胞,DNA含量为         c的细胞比例会增加;若用秋水仙素处理,则DNA含量为         c的细胞比例会增加。

 

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影响绿色植物光合作用的因素是多方面的,下图2为图1实验装置的结果。请据图回答有关问题:

1如果将图1整个装置放在暗处,图中红色液滴移动方向是             ,此时测出的数据对应于图2中的         点;如将其放在适宜的光照下红色液滴移动方向移动方向为               此时移动的刻度数是否即为伊尔藻实际的光合速率?               试解释其原因                 

2图1装置中烧杯A的作用是                 ,为了使实验更有说服力,应对烧杯A图1装置如何改进               

3图2中P点以前限制光合速率的主要因素是               Q点以后限制光合速率的主要因素是                 

 

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