下列有关基因工程的叙述正确的是

A．将乙肝抗原导入酵母菌可以获得能生产乙肝疫苗的工程菌

B．基因工程的基本原理是让目的基因在宿主细胞中稳定存在和高效复制

C．用氯化钙处理植物细胞，可增加细胞壁的通透性

D．大肠杆菌质粒上具有控制质粒 DNA 转移的基因

图1为某种质粒简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ、Hind Ⅲ的酶切位点。下列有关叙述错误的是(     )

A. 在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRⅠ

B. 如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ酶切点有1个

C. 为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理

D. 一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团

下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是

A. ①②③④    B. ①②④③    C. ①④②③    D. ①④③②

下列关于基因工程的叙述，错误的是

A. cDNA文库中的基因可以进行物种间的基因交流

B. 转基因棉花是否具抗虫特性可通过检测棉花对某种害虫的抗性来确定

C. 外源DNA必须位于重组质粒的起始密码和终止密码之间才能进行表达

D. 抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递至近缘作物，从而造成基因污染

下列有关基因工程技术的叙述，正确的是

A. 重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、DNA连接酶

B. 所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列

C. 质粒是拟核或细胞核外中能够自主复制的很小的链状DNA分子

D. 只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达

下列物质或过程不影响磷酸二酯键数目变化的是

A. RNA聚合酶、逆转录酶、Taq酶    B. DNA聚合酶、DNA连接酶、限制酶

C. 遗传信息的翻译、PCR中DNA解链    D. cDNA文库的构建、染色体的结构变异

下列关于基因工程技术的叙述，正确的是

A. 切割质粒的限制酶能特异性识别的序列均由6个核苷酸组成

B. PCR反应中两种引物的碱基间互补配对以保证与模板链的正常结合

C. 载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因

D. 目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能进行复制

某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内，来表达这产生生长激素。己知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而

大肠杆菌不带有任何抗性基因，下列叙述错误的是

A. 大肠杆菌可能未导入质粒

B. 导入大肠杆菌的可能是重组质粒，也可能是质粒

C. 可用含靑霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒

D. 在含青霉素培养基中不能生长，但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌

有关基因工程的叙述正确的是

A. 限制酶只在获得目的基因时才用

B. 重组质粒的形成是在细胞内完成的

C. 质粒都可以作为运载体

D. DNA连接酶使黏性末端之间形成磷酸二酯键

图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：

（1）若图2中目的基因D是人的α-抗胰蛋白酶的基因，现在要培养乳汁中含α-抗胰蛋白酶的羊，科学家要将该基因通过___________（方法）注入羊的_______________中，发育完全的母羊有可能分泌含α-抗胰蛋白酶的乳汁。

（2）图2中的目的基因D需要同时使用MestI和PstI才能获得，而图1所示的质粒无限制酶MestI的酶切位点。所以在用该质粒和目的基因构建重组质粒时，需要对质粒进行改造，构建新的限制酶切位点。试帮助完成构建需要的限制酶切位点的过程（提供构建需要的所有条件）：首先用______酶处理质粒；然后用______处理质粒，使被切开的质量末端链接上相应的脱氧核苷酸；再用______ 处理质粒形成限制酶切位点，它可被______识别。（供选答案如下：①EcoRI ②MestI ③PstI ④DNA连接酶 ⑤DNA聚合酶）

（3）假设图1质粒上还有一个PstI的识别序列，现用EcoRI、PstI单独或联合切割同一质粒，得到的DNA长度片段如下表。请在下图中画出质粒上EcoRI和PstI的切割位点。（标出酶切位点之间的长度）

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