干扰素是治疗癌症的重要药物，它必须从血液中提取，每升人血中只能提取0.5μg，所以价格昂贵。美国加利福尼亚的某生物制品公司用如下方法(如图所示)生产干扰素。

从上述方式中可以看出该公司生产干扰素运用的方法是(    )。

A．个体间的杂交      B．基因工程

C．蛋白质工程       D．器官移植

基因工程技术也称DNA重组技术，其实施必须具备的4个必要条件是(    )。

A．工具酶、目的基因、载体、受体细胞

B．重组DNA、RNA聚合酶、限制性内切酶、DNA连接酶

C．模板DNA、信使RNA、质粒、受体细胞

D．目的基因、限制性内切酶、载体、受体细胞

在基因工程中，为将目的基因导入受体细胞常采用土壤农杆菌转化法，在土壤农杆菌中常含有一个Ti质粒。某科研小组欲将某抗虫基因导入某植物，下列分析错误的是(    )。

A．Ti质粒含有对宿主细胞生存具有决定性作用的基因，是基因工程中重要的载体

B．用Ca2＋处理细菌是重组Ti质粒导入土壤农杆菌中的重要方法

C．重组Ti质粒的土壤农杆菌成功感染植物细胞，可通过植物组织培养技术将该细胞培养成具有抗虫性状的植物

D．若能够在植物细胞中检测到抗虫基因，则说明将重组质粒成功地导入到了受体细胞

下表有关基因表达的选项中，不可能的是(    )。

一个双链DNA经一限制酶切割一次形成的黏性末端个数为(    )。

A．1          B．2          C．3          D．4

工程菌是指(    )。

A．用物理或化学方法，诱发菌类自身某些基因得到高效表达的菌类细胞株系

B．用遗传工程的方法，使同种不同株系的菌类杂交，得到的新细胞株系

C．用基因工程的方法，使外源基因得到高效率表达的菌类细胞株系

D．从自然界中选取能迅速增殖的菌类

下列关于限制酶的说法正确的是(    )。

A．限制酶广泛存在于各种生物中，微生物中很少分布

B．一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列

C．不同的限制酶切割DNA后都会形成黏性末端

D．限制酶的作用部位是特定核苷酸形成的氢键

下列关于基因工程的叙述，错误的是(    )。

A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物

B．限制性核酸内切酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶

C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性

D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达

肺细胞中的let7基因表达减弱，癌基因RAS表达增强，会引发肺癌。研究人员利用基因工程技术将let7基因导入肺癌细胞实现表达，发现肺癌细胞的增殖受到抑制。该基因工程技术基本流程如图1。

图1

图2

请回答有关问题。

(1)进行过程①时，需用________酶切开载体以插入let7基因。

(2)进行过程②时，需用______酶处理贴附在培养皿壁上的细胞，以利于传代培养。

(3)研究发现，let7基因能影响癌基因RAS的表达，其影响机理如图2。据图分析，可从细胞中提取______进行分子杂交，以直接检测let7基因是否转录。肺癌细胞增殖受到抑制，可能是由于细胞中______(RAS  mRNA/RAS蛋白)含量减少引起的。

科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。下图是转基因抗冻番茄的培育过程示意图。

(1)若图中Ⅱ是科学家构建的鱼抗冻蛋白基因的表达载体，则该基因表达载体的组成通常应包括____________________等。

(2)科学家常采用________法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用________技术检测目的基因是否插入番茄的基因组。

(3)多聚半乳糖醛酸酶(PG酶)可将成熟的番茄果实细胞壁中的多聚半乳糖醛酸降解为半乳糖醛酸，从而导致果实软化。抑制PG酶的活性可以延长番茄果实储藏期，请用文字描述采用蛋白质工程技术降低该酶活性的一般过程。

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