| 1. 难度：简单 | |
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对基因表达载体构建的一些说法，不正确的是 A．需要限制酶和DNA连接酶参与 B．基因表达载体中一定含有启动子和内含子 C．通常用抗生素基因作为标记基因 D．基因表达载体的构建是基因工程的核心
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| 2. 难度：简单 | |
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一环状DNA分子，设其长度为1，已知某种限制性核酸内切酶在该分子上有3个酶切位点，如图中箭头A、B、C所指。如果该DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断，则会产生0.2、0.3、0.5三种不同长度的DNA片段。现有多个上述DNA分子，若在每个分子上至少有1个酶切位点被该酶切断，则从理论上讲，经该酶切后，这些DNA分子最多能产生长度不同的线状DNA的种类数是
A．4 B．6 C．7 D．8
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| 3. 难度：简单 | |
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下列关于植物体细胞杂交的叙述，错误的是 A．不同种植物原生质体融合的过程属于植物体细胞杂交过程 B．原生质体仍具有再生细胞壁，连续分裂并长成完整植株的能力 C．参与杂种细胞的细胞壁形成的细胞器主要是线粒体和核糖体 D． 植物体细胞杂交技术可克服不同种植物之间的不亲和障碍
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| 4. 难度：简单 | |
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在判断抗虫基因是否成功转入棉花基因组的方法中，不属于分子检测的是 A．通过观察害虫吃棉叶是否死亡 B．检测目的基因片段与DNA探针能否形成杂交带 C．检测目的基因转录形成的mRNA与DNA探针能否形成杂交带 D．检测目的基因表达产物蛋白质能否与特定抗体形成杂交带
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| 5. 难度：简单 | |
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下列有关克隆技术和胚胎工程的相关叙述，错误的是 A．植物组织培养基中生长素和细胞分裂素的不同配比会影响组织分化 B．动物细胞培养液中添加的抗生素需进行种类和数量的选择以抑制细菌生长 C．胚胎干细胞培养中需冲入氧气和二氧化碳，二氧化碳的主要作用是维持培养液的PH D．早期胚胎的培养液与动物细胞培养的培养液成分不同之处是不含有动物血清
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| 6. 难度：简单 | |
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下列有关生物工程中相关知识的叙述，正确的是 A．试管牛和克隆牛都属于无性生殖 B．蛋白质工程是直接对蛋白质分子进行改造 C．植物组织培养可用于抗虫棉的培育 D．生态工程能提高各营养级的能量传递效率
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| 7. 难度：简单 | |
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英国伦敦大学学院医院的医生利用基因诊断和胚胎筛选技术，使一对拥有乳腺癌家族病史的英国夫妇顺利孕育一名排除乳腺癌隐患的婴儿。下列有关叙述，不正确的是 A．这项技术属于“设计试管婴儿”，该技术的使用应受到限制 B．该项技术中涉及体外受精、早期胚胎培养、胚胎移植等技术 C．为保证胚胎移植成功，必须将受精卵在体外培养至原肠胚时期 D．在进行乳腺癌基因诊断时可运用DNA分子杂交技术
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| 8. 难度：简单 | |
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“三北防护林工程”建设中注意了考虑到树种的生态适应性问题，这体现了生态工程的原理是 A．系统学原理 B．协调与平衡原理 C．整体性原理 D．物种多样性原理
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| 9. 难度：简单 | |
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下列有关哺乳动物精子和卵细胞的发生以及受精作用的叙述，正确的是 A．采集到的精子和卵细胞相遇即可发生受精作用 B．排卵就是排出成熟卵细胞的过程 C．卵细胞形成时的分裂过程均在卵巢内完成 D．受精作用完成的标志是在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体
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| 10. 难度：简单 | |
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动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如右图所示，a、b、c表示现代工程技术，①、②、③表示其结果，请据图回答，下面说法正确的是
A．a是核移植技术，①反应了动物细胞也具有全能性 B．b是体外受精技术，②的设计产生有一定的伦理争议 C．c是胚胎分割技术，③中个体的基因型和表现型一定相同 D．①②③中的受体均需注射促性腺激素，以达到超数排卵和同期发情的目的
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| 11. 难度：简单 | |
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以H1N1病毒核衣壳蛋白为抗原，利用细胞工程制备单克隆抗体，下列有关叙述正确的是 A．用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清有单克隆抗体 B．体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对H1N1病毒的单克隆抗体 C．将等量效应B细胞与骨髓瘤细胞混合，经诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D．利用该单克隆抗体与H1N1病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可以诊断该病毒感染体
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| 12. 难度：简单 | |
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现代生物技术建立和发展是建立在生物学的基本原理之上的。以下叙述正确的是 A．花生与甘薯轮种能增产，基于物种多样性原理、物质循环再生原理 B．将天冬氨酸激酶的某些氨基酸替换可增强催化功能，基于蛋白质工程的原理 C．试管牛培育过程中同期发情处理，基于受体对移入子宫的外来胚胎免疫排斥的原理 D．抗除草剂基因导入线粒体基因组不会通过花粉传播给其他植物，基于生殖隔离的原理
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| 13. 难度：简单 | |
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下列有关果酒，果醋和腐乳制作的叙述，正确的是 A．参与果酒发酵和果醋发酵的微生物都含有线粒体 B．果酒制成后只需将装置转移至温度较高的环境中即可制作果醋 C．在腐乳制作过程中必须有能生产蛋白质的微生物参与 D．在腐乳装瓶时自下而上随层数的增加逐渐减少盐量
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| 14. 难度：简单 | |
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在腐乳制作的过程中，加盐腌制的目的不是为了 A．调味 B．调pH C．析出豆腐中的水分 D．抑制微生物的生长
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| 15. 难度：简单 | |
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以下甲、乙两图表示从细菌细胞中获取目的基因的两种方法，以下说法中错误的是
A．甲方法可建立该细菌的基因组文库 B．乙方法可建立该细菌的cDNA文库 C．甲方法要以脱氧核苷酸为原料 D．乙方法需要逆转录酶参与
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| 16. 难度：简单 | |
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下列有关生物技术在实践中应用的叙述，正确的是 A．酶制剂和固定化酶的优点都是易与产物分离 B．使用加酶洗衣粉的洗衣效果总是比普通的洗衣粉好 C．凝胶色谱法是根据不同蛋白质所带电荷的不同而分离蛋白质 D．固定化酵母细胞分解葡萄糖速度要比酵母细胞慢
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| 17. 难度：简单 | |
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下列有关制备固定化酵母细胞叙述，错误的是 A．在向溶化好的海藻酸钠溶液中加入的必须是已活化的酵母细胞 B．溶化好的海藻酸钠溶液必须冷却至室温，才能加入细胞 C．溶解海藻酸钠，最好采用小火，或者持续加热的方法 D．在固定化酵母过程中，要以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中
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| 18. 难度：简单 | ||||||||||||||||||||||||||
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在“DNA的粗提取和鉴定”实验中，甲、乙、丙、丁四个小组除下表中所列处理方法不同外，其他操作步骤均正确，但实验结果却不同。下列有关叙述不正确的是
A．实验材料选择错误的组别是丙 B．沸水浴后试管中溶液颜色变蓝的组别是甲、丁 C．甲组实验现象差的原因是25℃的酒精对DNA的凝集效果差 D．乙组实验不成功仅因为在鉴定时加入了双缩脲试剂
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| 19. 难度：简单 | |
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下列有关蛋白质提取和分离的说法，错误的是 A．透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性 B．采用透析法可使蛋白质与其他小分子化合物分离开来 C．离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离 D．蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷相同的电极方向移动
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| 20. 难度：简单 | |
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下列关于生物技术的叙述，正确的是 A．若发现加酶洗衣粉在15℃、25℃、35℃、45℃水温中，35℃洗涤效果最好，说明最适温度为35℃ B．果酒发酵后酒精的检测，用重铬酸钾在酸性条件下与酒精反应呈现蓝绿色 C．在DNA粗提取实验中，利用DNA在NaCl溶液中溶解度不同，随着NaCl溶液浓度增大，DNA溶解度也增大来达到分离的目的 D．在血红蛋白提取和分离实验中，对于红细胞的洗涤加生理盐水采用低速短时间离心达到去除杂蛋白的目的
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| 21. 难度：简单 | |
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基因工程是现代育种技术中非常重要的一种手段，通过该技术可让细菌生产人类的胰岛素。以下相关说法正确的是 A．人与细菌的DNA的结构基础相同 B．细菌与人类共用一套遗传密码 C．能高效表达人胰岛素基因的细菌是工程菌 D．基因工程育种可能存在生态安全问题
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| 22. 难度：简单 | |
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下列关于造成相关实验失败的原因分析中，正确的是 A．制作腐乳的卤汤时，料酒加的量较多，易造成豆腐腐败变质 B．制作果酒时，先除去葡萄的枝梗再进行冲洗，可能造成葡萄霉烂 C．制作果醋时，通氧不足或温度过低，可能造成发酵失败 D．用加酶洗衣粉洗涤污渍时，浸泡时间不足，会造成洗涤效果差
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| 23. 难度：简单 | |
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可以利用哺乳动物成熟的红细胞为实验材料进行的实验有 A．分离细胞膜 B．DNA的粗提取 C．分离并纯化血红蛋白 D．进行细胞培养
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| 24. 难度：简单 | |
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下列有关DNA聚合酶链式反应（PCR）的说法正确的是 A．需要引物 B．始终在高于70℃的条件下进行 C．需要加DNA连接酶 D．需要加热稳定性高的DNA聚合酶
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| 25. 难度：简单 | |
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以下关于血红蛋白提取和分离的过程及原理叙述，不正确的是 A．红细胞洗涤过程中要加入5倍体积的蒸馏水，重复洗涤三次 B．将血红蛋白溶液放在质量分数为O.9％的NaCl溶液透析12小时 C．凝胶装填在色谱柱内要均匀，不能有气泡存在 D．蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较大的移动速度慢
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| 26. 难度：简单 | ||||||||||||||||||||||||||
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（6分）为了解基因结构，通常选取一特定长度的线性DNA分子，先用一种限制酶切割，通过电泳技术将单酶水解片段分离，计算相对大小；然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解，分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。
（1）该实验设计主要体现了 原则。 （2）由实验可知，在这段已知序列上，A酶与B酶的识别序列分别为 个和 个。 （3）根据表中数据，请在答题纸图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。
（4）已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示，用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH Ⅰ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作，若干循环后“AGATCC//TCTAGG”和“GGATCT//CCTAGA”序列明显增多，该过程中DNA连接酶催化 键的形成。
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| 27. 难度：简单 | |
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（7分）下图表示利用基因工程培育抗虫棉过程，据图回答下列有关问题。
（1）若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—↓GATC—，限制酶Ⅱ识别序列和切点是—G↓GATCC—，那么在①过程中，应用限制酶 切割抗虫基因，用限制酶 切割质粒，否则将不能得到符合要求的重组质粒。 （2）将通过②过程得到的大肠杆菌涂布在含有 的培养基上，若能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒，反之则说明没有导入。 （3）要确定抗虫基因导入后，是否能稳定遗传并表达，需进行检测和检定工作，则在个体水平上的鉴定过程可简述为： 。经筛选分析，该植株细胞中含有一个携带抗虫基因的DNA片段，因此可以把它看作是杂合子。理论上，该转基因植株自交产生的F1代中，仍具有抗虫特性的植株占总数的 。 （4）⑤过程所用的现代生物技术称为 ，根细胞通过⑤过程，能形成棉植株的原因是根细胞具有 。
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| 28. 难度：简单 | |
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(7分)胚胎工程技术包含的内容很丰富，下图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是黄牛，请据图回答下列问题：
（1）应用1中获得的小牛，其遗传物质来源于 ，为一次获得多个细胞B，往往需要向供体2内注入的是 ，而不是性激素。 （2）将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是 。 （3）通过应用2获得小牛，涉及到胚胎工程的最后一道“工序”是 。 （4）应用3中的细胞D取自囊胚的 ，细胞C取自牛胎儿的 。 （5）应用4中获得二分胚①和②，移植到受体牛中得到两只小牛，两只小牛的性别是 。
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| 29. 难度：简单 | |
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（9分）下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：
（1）图甲和图乙所示的过程中，都必须用到的动物细胞工程技术手段是_________________。 （2）图甲中②过程常在 诱导下完成，单克隆抗体可以用于疾病的诊断治疗，其优点是__________________________。 （3）单克隆抗体能定向攻击癌细胞，主要是利用其____________的特点。 （4）图乙中克隆羊的性别由_______决定。b表示 过程。a和图甲的①-④哪一个过程原理相同？ 。 （5）图乙过程的技术具有多种用途，但是不能完成下列哪一用途 （ ） A．有选择地繁殖某一性别的家畜 B．繁殖家畜中的优良个体 C．用于保存物种 D．改变动物的核基因 （6）现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为哪个是最可能原因 （ ） A．卵细胞大，便于操作 B．卵细胞含有的营养物质多 C．卵细胞的细胞质可使体细胞胞核的全能性得到表达 D．重组细胞才具有全能性
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| 30. 难度：简单 | |
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（6分）下图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程；图2表示体外受精培育优质奶牛的过程；图3表示番茄马铃薯植物细胞融合和再生植株的过程，请据图回答：
（1）在图1中注射到小鼠体内的物质是 。融合后的细胞经过多次筛选才能获得理想的细胞，此类细胞的特点是 。 （2）图2中参与体外受精的精子需要经过成熟和 的过程，才能与卵细胞受精。若要获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对图2中囊胚中的 均等分割后进行胚胎移植。 （3）图3中过程①是植物细胞形成 的阶段。在形成再生植株的过程中与组织培养有相似之处的步骤是 。
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| 31. 难度：简单 | |
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（8分）日本下村修、美国沙尔菲和美籍华人钱永健因在研究绿色荧光蛋白（GFP）等方面的突出贡献，获得2008年度诺贝尔化学奖。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图．据图回答：
（1）绿色荧光蛋白基因在该实验中是作为________基因。图中通过过程①、②形成重组质粒，需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。限制性内切酶I的识别序列和切点是—G’GATCC—，请画出质粒被限制酶I切割所形成的黏性末端的过程：________________________ _________。 （2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多也最有效的方法是_______________ ___。 （3）如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是_______________________。 （4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是（用数字表示）：_______ ________ 。 ①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）④表达出蓝色荧光蛋白。 （5）在培养重组细胞时，培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和 ___等。 （6）以上培育过程中应用到的生物技术有_________________________________等（至少答出2项）。
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| 32. 难度：简单 | |
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（7分）某同学使用下列装置或操作进行有关实验，请据图回答问题：
（1）制作果酒时可选用图甲装置。排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连，这样做的原因是 。为研究发酵中酵母菌的生长状况，常要通过出料口 进行取样统计分析并测定pH值，判断取样先后顺序的主要依据是 。 （2）乙图中加入蒸馏水的目的是 ，此时玻璃棒使用要点是 ，以保证DNA分子结构的完整性。 （3）丙、丁用于提取和分离血红蛋白，应先对样品进行处理用图 装置进行透析；丁图中液体Ⅱ应为 ，底端试管中首先收集到的应是相对分子质量较 (大／小)的蛋白质。
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| 33. 难度：简单 | |
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（6分）固定化酶是从20世纪60年代迅速发展起来的一种技术。东北农业大学科研人员利用双重固定法，即采用戊二醛作交联剂（使酶相互连接），海藻酸钠作为包埋剂来固定小麦酯酶，研究固定化酶的性质，并对其最佳固定条件进行了探究。下图显示的是部分研究结果（注：酶活力为固定化酶催化化学反应的总效率，包括酶活性和酶的数量），分析回答：
（1）从对温度变化适应性和应用范围的角度分析，甲图所示结果可以得出的结论是____ 。 （2）乙图曲线表明浓度为________的海藻酸钠包埋效果最好，当海藻酸钠浓度较低时，酶活力较低原因是___________。 （3）固定化酶的活力随使用次数的增多而下降，由丁图可知，固定化酯酶一般可重复使用______次，酶活力明显下降。 （4）固定小麦酯酶不采用海藻酸钠直接包埋，同时用戊二醛作交联剂，这是因为__ __ ___。
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| 34. 难度：简单 | |
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（9分）CTAB法是一种从高等真核生物细胞中制备基因组DNA（总DNA）的技术。CTAB能跟核酸形成复合物，在高盐溶液(＞0.7mol/L的NaCl溶液)中可溶并且稳定存在，当降低溶液中盐的浓度(＜0.3mol/L的 NaCl溶液)，CTAB - 核酸的复合物就会因溶解度降低而沉淀，再用70% 酒精浸泡可洗脱掉CTAB；氯仿能使蛋白质发生变性而沉淀。提取和检测水稻基因组DNA的操作步骤如下： ①在50ml离心管中加入20mlCTAB抽提缓冲液（主要成分是1.4mol/L 的NaCl、2%的CTAB），于65℃水浴中预热； ②将20 g新鲜的水稻幼嫩叶片剪成小段后放于研钵中，用液氮速冻并研磨成粉末，加入上述离心管中，于65℃水浴中保温30min； ③取出离心管中，冷却至室温，加入20mL的氯仿，轻轻混匀20min； ④在室温下以 12000r/min的转速离心10-20 min； ⑤将上清液移入另一个离心管中，加入2/3体积的经冷却的异丙醇，用玻璃棒轻轻搅动，小心取出聚集于玻璃棒上的CTAB - 核酸的复合物沉淀； ⑥将沉淀移入另一个离心管中，加入70%乙醇洗涤，重复洗涤1-2次； ⑦吹干乙醇后，将DNA溶于适量的TE缓冲液中，在0.8%的琼脂糖凝胶上电泳分离并在 核酸紫外检测仪上观察。 请回答下列问题： （1）植物基因组DNA（总DNA）的提取通常采用机械研磨的方法，常温下研磨时， 植物细胞匀浆含有多种酶类对DNA的提取产生不利的影响。用液氮速冻，材料在研磨时易于破碎，同时还具有 的作用。 （2）实验步骤③ 、④的目的是 。 （3）实验步骤⑤中，玻璃棒上出现沉淀的主要原因是 。 （4）对DNA进行定性检测常用的试剂是 。琼脂糖凝胶电泳是利用待分离样品中各种分子带电性质的差异以及 、 ，使带电分子产生 而实现分离。DNA在260nm的紫外线波段有一强烈的吸收峰，利用核酸紫外检测仪可以进行 。
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