| 1. 难度：简单 | |
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下列所示的黏性末端是由几种限制性核酸内切酶作用产生的（ ）
A. 1种 B. 2种 C. 3种 D. 4种
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| 2. 难度：中等 | |
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下图是DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，下列选项中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是（ ）
A. ①②③④ B. ①③④② C. ①④②③ D. ①④③②
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| 3. 难度：简单 | |
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下列关于如图所示DNA分子片段的说法，正确的( ) A. 限制酶可作用于①部位，解旋酶作用于③部位 B. 限制酶可作用于③部位，解旋酶作用于①部位 C. 作用于①部位的限制酶同时也可以作用于④部位 D. 作用于①部位的限制酶与作用于⑤部位的限制酶的碱基识别顺序相反
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| 4. 难度：中等 | |
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下列关于基因工程工具的叙述,正确的是( ) A. 载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因 B. DNA连接酶可把目的基因与载体的粘性末端的碱基黏合，形成重组DNA C. Taq酶是用PCR仪对DNA分子扩增过程中常用的一种耐高温的DNA聚合酶 D. 限制性核酸内切酶将一个链状DNA分子片段切成两个片段需消耗两个水分子
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| 5. 难度：中等 | |
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下列一般不作为基因工程中的标记基因的是（ ） A. 四环素抗性基因 B. 绿色荧光蛋白基因 C. 产物具有颜色反应的基因 D. 贮藏蛋白的基因
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| 6. 难度：简单 | |
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基因工程技术也称为 DNA 重组技术，其实施必须具备的条件是 ( ) A. 目的基因、限制性内切酶、运载体、体细胞 B. 重组 DNA、RNA 聚合酶、内切酶、连接酶 C. 模板 DNA、信使 RNA、质粒、受体细胞 D. 工具酶、目的基因、运载体、受体细胞
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| 7. 难度：简单 | |
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从浩瀚的“基因海洋”中获得特定的目的基因的方法有( ) ①从基因文库中获取目的基因 ②PCR扩增技术扩增 ③人工合成基因 ④RNA复制 A. ①②④ B. ①②③④ C. ②③④ D. ①②③
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| 8. 难度：中等 | |
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下图表示基因工程中目的基因的获取示意图，不正确的是（ ） A. ③表示PCR技术，用来扩增目的基因 B. 若获取的目的基因相同，则图中基因组文库小于cDNA文库 C. 要从基因文库中得到所需的目的基因可以根据目的基因的相关信息 D. 若基因比较小，核苷酸序列又已知，可以通过化学方法直接人工合成获取
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| 9. 难度：简单 | |
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在基因表达载体的构建中，下列说法不正确的是（ ） ①一个基因表达载体的组成只包括目的基因、启动子、终止子 ②有了启动子才能驱动基因转录出mRNA ③终止子的作用是使转录在所需要的地方停止 ④所有基因表达载体的构建是完全相同的 ⑤必须在细胞内进行 A. ② ③⑤ B. ① ④ ⑤ C. ① ②⑤ D. ③ ④
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| 10. 难度：中等 | |
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科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶(Amy)基因a，通过农杆菌转化的方法，将a转入马铃薯中，经检测发现Amy在成熟块茎细胞中存在。这一过程涉及（ ） A. 目的基因进入受体细胞后，随着马铃薯的DNA分子的复制而复制并传给子代细胞 B. 基因a导入成功后，将抑制细胞原有的新陈代谢，开辟新的代谢途径 C. 目的基因不需要整合到马铃薯的DNA分子中 D. 目的基因来自细菌，可以不需要载体直接导入受体细胞
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| 11. 难度：中等 | |
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下列关于基因工程的叙述,正确的是（ ） A. 基因工程经常以抗菌素抗性基因为目的基因 B. 细菌质粒是基因工程常用的载体 C. 通常用一种限制酶处理含目的基因的DNA，用另一种限制酶处理载体DNA D. DNA连接酶的主要功能是将黏性末端碱基之间的氢键连接起来
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| 12. 难度：困难 | |
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科学家将抗冻蛋白基因导入烟草，筛选出抗冻蛋白基因成功整合到染色体上的烟草（假定抗冻蛋白基因都能正常表达）。某些烟草的体细胞含两个抗冻蛋白基因，这两个基因在染色体上的整合情况有图示的三种类型（黑点表示抗冻蛋白基因的整合位点）；让这些含两个抗冻蛋白基因的烟草自交，后代抗冻蛋白烟草和普通烟草（不含抗冻蛋白基因）的比值分别是（ ）
A. 1:0 3:1 15:1 B. 3:1 3:1 9:6:1 C. 1:0 1:1 9:6:1 D. 1:1 3:1 15:1
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| 13. 难度：中等 | |
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我国科学家运用基因工程技术，将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因导入棉花细胞并成功表达， 培育出了抗虫棉。下列叙述不正确的是 A. 抗虫基因的提取和运输都需要专用的工具和运载体 B. 重组DNA分子中增加一个碱基对，不一定导致毒蛋白的毒性丧失 C. 抗虫棉的抗虫基因可通过花粉传递到近缘作物，从而造成基因污染 D. 转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的
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| 14. 难度：中等 | |
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上海医学研究所成功培育出第一头携带人白蛋白基因的转基因牛。他们还研究出一种可大大提高基因表达水平的新方法，使转基因动物乳汁中的药物蛋白含量提高30多倍，以下与此有关的叙述正确的是( ) A. “转基因动物”是指体细胞中出现了新基因的动物 B. “提高基因的表达水平”是指设法使牛的乳腺细胞中含有更多的人白蛋白基因 C. 只在转基因牛乳汁中才能获取人白蛋白，是因为人白蛋白基因只在牛乳腺细胞中是纯合的 D. 转基因牛的肌肉细胞中也有人白蛋白基因，但不发生转录、翻译，故不能合成人白蛋白
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| 15. 难度：中等 | |
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下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是 A. 启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用 B. 表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原（起）点 C. 表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得 D. 借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来
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| 16. 难度：简单 | |
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基因治疗的目的就是把下列哪种分子或物质插入细胞来治疗遗传疾病（ ） A. 隐性等位基因 B. 显性等位基因 C. 生长激素 D. 正常等位基因
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| 17. 难度：简单 | |
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下图表示蛋白质工程的操作过程，相关说法不正确的是
A. a、b过程分别是转录、翻译 B. 蛋白质工程中对蛋白质分子结构的了解是非常关键的工作 C. 蛋白质工程是完全摆脱基因工程技术的一项全新的生物工程技术 D. 蛋白质工程中可能构建出一种全新的基因
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| 18. 难度：简单 | |
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下列对物质的改造不属于蛋白质工程范畴的是 （ ） A．胰岛素改造 B．抗体改造 C．酶的改造 D．性激素改造
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| 19. 难度：简单 | |
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下列关于蛋白质工程和基因工程的比较，不合理的是（ ） A. 基因工程原则上只能生产自然界已存在的蛋白质，而蛋白质工程可以对现有蛋白质进行改造，从而制造一种新的蛋白质 B. 蛋白质工程是在基因工程的基础上发展起来的，蛋白质工程最终还是要通过基因修饰或基因合成来完成 C. 当得到可以在-70 ℃条件下保存半年的干扰素后，在相关酶、氨基酸和适宜的温度、pH条件下，干扰素可以大量自我合成 D. 基因工程和蛋白质工程产生的变异都是可遗传的
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| 20. 难度：简单 | |
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蛋白质工程目前成功的是( ) A. 对胰岛素进行改造，生产速效型药品 B. 蛋白质工程应用于微电子方面 C. 体外耐保存的干扰素 D. 用蛋白质工程生产赖氨酸玉米
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| 21. 难度：中等 | |
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为实现目的基因与运载体结合，以便在大肠杆菌中大量表达相应的蛋白质，研究人员进行了如图所示操作．请分析回答下列问题：
（1）图表示用Bam H I切割含目的基因的_____________，质粒经相同限制酶处理后，经_____________ 酶的作用获得a，a称作_____________．将a与感受态大肠杆菌混合后，混合物应接种在含有________的培养基上．质粒中抗氨苄青霉素基因称为_____________ ，在筛选过程起作用．若要证明培养基是否符合实验要求，培养基上需接种_____________ 的感受态大肠杆菌，培养后不出现菌落则培养基合格。 （2）DNA分子中，一条链中的两个核苷酸通过_____________相连，已知碱性磷酸酶能除去核苷酸末端的5’磷酸，构建a的过程中用该酶处理质粒，但目的基因不用碱性磷酸酶处理，这样做的目的是__________________________． 如果要检测目的基因 是否成功表达，须提取培养后大肠杆菌的______________ ， 用相应_____________________检测。
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| 22. 难度：中等 | |
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下图是基因工程示意图，请据图回答：
（1）从基因文库中提取的目的基因通过PCR进行扩增时，需使用一种特殊的酶是__________________。 （2）进行过程①时，需用_____________酶切开载体以插入目的基因．载体应有RNA聚合酶识别和结合的部位，以驱动目的基因转录，该部位称为______________。 （3）构建基因表达载体的目的是使___________________________。 （4）若用重组质粒转入大肠杆菌，一般情况下，不能直接用未处理的大肠杆菌作为受体细胞，原因是_____________。 （5）在抗虫作物的培育过程中，将Bt毒蛋白基因导入作物受体细胞时，常用的方法是_____________。 （6）检测细菌的目的基因是否转录出mRNA时，需要用______________做探针，再与相应的物质杂交。
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| 23. 难度：中等 | |
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干扰素是动物体内合成的一种蛋白质，可以用于治疗病毒感染和癌症，但体外保存相当困难，如果将其分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸，就可在－70 ℃下保存半年，给广大患者带来福音。 (1)蛋白质的合成是受基因控制的，因此获得能够控制合成“可以保存的干扰素”的基因是生产的关键，依据蛋白质工程原理，设计实验流程，让动物生产“可以保存的干扰素”(请填写)。 预期蛋白质的功能――→设计_____________――→推测______________――→合成______________。 (2)基因工程和蛋白质工程相比较，基因工程在原则上只能生产____________的蛋白质，不一定符合人类生产和生活的需要。而蛋白质工程是以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过_____________或_______________，对现有蛋白质进行_____________，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活需要。 (3)蛋白质工程实施的难度很大，原因是蛋白质具有十分复杂的_____________结构。 (4)对天然蛋白质进行改造，应该直接对蛋白质分子进行操作，还是通过对基因的操作来实现？_____________________________ 。原因是_______________________________________。
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| 24. 难度：中等 | |
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下表列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有____个游离的磷酸基团。 (2)若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越____。 (3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是______________________________________ (4)与只使用EcoRⅠ相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ2种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止___________________________________。 (5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入____酶。
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