| 1. 难度：简单 | |
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基因工程技术也称为DNA重组技术，其实施必须具备的四个必要条件是 A. 目的基因限制性内切酶运载体体细胞 B. 重组DNA RNA聚合酶限制性内切酶连接酶 C. 工具酶目的基因运载体受体细胞 D. 模板DNA信使RNA质粒受体细胞
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| 2. 难度：中等 | |
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下图为DNA分子的某一片段，其中①②③分别表示某种酶的作用部位，则相应的酶依次是( )
A. DNA连接酶、限制酶、解旋酶 B. 限制酶、解旋酶、DNA连接酶 C. 解旋酶、限制酶、DNA连接酶 D. 限制酶、DNA连接酶、解旋酶
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| 3. 难度：中等 | |
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基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。根据图示判断下列操作正确的是( )
A. 目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 B. 目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割 C. 质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割 D. 质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割
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| 4. 难度：中等 | |
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基因工程中因受体细胞不同，目的基因导入的方法也不同，下列叙述不正确的是( ) A. 将目的基因导入棉花细胞内常用花粉管通道法 B. 将目的基因导入老鼠细胞内常用显微注射法 C. 将目的基因导入大肠杆菌内常用感受态细胞转化法 D. 将目的基因导入小麦细胞内常用农杆菌转化法
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| 5. 难度：中等 | |
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下列关于cDNA文库和基因组文库的说法中，不正确的是（ ） A．cDNA文库中只含有某种生物的部分基因，基因组文库中含有某种生物的全部基因 B．如果某种生物的cDNA文库中的某个基因与该生物的基因组文库中的某个基因控制的性状相同，则这两个基因的结构也完全相同 C．cDNA文库中的基因都没有启动子 D．一种生物的cDNA文库可以有许多种，但基因组文库只有一种
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| 6. 难度：简单 | |
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PCR技术扩增DNA,需要的条件是（ ） ①目的基因 ②引物 ③四种脱氧核苷酸 ④DNA聚合酶等 ⑤mRNA ⑥核糖体 A. ①②③④ B. ②③④⑤ C. ①③④⑤ D. ①②③⑥
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| 7. 难度：中等 | |
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对禽流感的确诊，先用PCR技术将标本基因大量扩增，然后利用基因探针，测知待测标本与探针核酸的碱基异同。下图P表示禽流感病毒探针基因在凝胶的电泳标记位置，M、N、Q、W是四份送检样品在测定后的电泳标记位置， 哪份标本最有可能确诊为禽流感
A. M B. N C. Q D. W
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| 8. 难度：中等 | |
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2013年3月在上海和安徽首次发现H7N9禽流感病例，现在我国多地出现禽流感疫情，为此某研究小组为了研制预防H7N9禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图。下列有关叙述错误的是( )
A. 步骤①所代表的过程是反转录 B. 步骤②需使用限制酶和DNA连接酶 C. 步骤③可用CaCl2处理大肠杆菌，使其从感受态恢复到常态 D. 检验Q蛋白的免疫反应特性，可用Q蛋白与患禽流感康复的鸡的血清进行抗原—抗体特异性反应实验
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| 9. 难度：中等 | |
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腺苷酸脱氨酶(ADA)基因缺陷症是一种免疫缺陷症，对患者采用的基因治疗方法是：取出患者的淋巴细胞，进行体外培养时转入正常ADA基因，再将这些淋巴细胞转入患者体内，使其免疫功能增强，能正常生活。下列有关叙述中不正确的是( ) A. 正常ADA基因替换了患者的缺陷基因 B. 正常ADA基因通过控制ADA的合成来影响免疫功能 C. 淋巴细胞需在体外扩增后再转入患者体内 D. 腺苷酸脱氨酶(ADA)基因缺陷症属于先天性免疫缺陷症
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| 10. 难度：中等 | |
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高等哺乳动物受精后不久，受精卵开始进行细胞分裂。经桑椹胚、囊胚、原肠胚和组织器官的分化，最后发育成一个完整的幼体，完成胚胎发育的全过程，有关叙述错误的是
A. 图是胚胎发育过程中囊胚期示意图，①②③依次称之为透明带、 滋养层、内细胞团 B. 高等哺乳动物早期胚胎发育经历的时期是受精卵→桑椹胚→囊胚期→原肠胚期 C. 高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于囊胚期，终止于生命结束 D. 进行胚胎分割时，只能选择桑椹胚期的胚胎进行
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| 11. 难度：中等 | |
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植物细胞表现出全能性的必要条件是（ ） A. 给予适宜的培养和外界条件 B. 导入其他植物细胞的基因 C. 脱离母体后给予适宜的培养和外界条件 D. 将成熟植物的细胞核移到去核的卵细胞中
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| 12. 难度：中等 | |
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下列叙述不正确的是 A. 胚胎发育的早期有一段时间是在透明带中进行的 B. 内细胞团将来发育成胎盘和胎膜 C. 哺乳动物早期胚胎在一定时间不与母体子宫建立组织上的联系 D. 早期胚胎发育到一定阶段才可取出向受体移植
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| 13. 难度：中等 | |
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用动物细胞工程技术制备单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是 ( ) A. 将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞 B. 用氯化钙作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合 C. 筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体 D. 该杂交瘤细胞株的增殖方式和产物分别是有丝分裂和单克隆抗体
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| 14. 难度：中等 | |
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下列有关受精的说法正确的是（ ） A. 在自然情况下，受精是在雌性动物的子宫内完成的 B. 卵子在减数第二次分裂的中期，才具备与精子受精的能力 C. 受精的实质是精子的头部进入卵子 D. 顶体反应是阻止多精子入卵的一道屏障[来
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| 15. 难度：简单 | |
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关于动物细胞培养的叙述错误的是( ) A. 用于培养的细胞最好取自健康动物体内的组织细胞 B. 将所取的组织先用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理其分散成单个细胞，再稀释制成细胞悬液培养 C. 在培养瓶中要定期用胰蛋白酶或胶原蛋白酶进行处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖 D. 传代培养的细胞在传至40—50代左右时，增殖会逐渐减慢，以至于完全停止，所培养的细胞全都衰老死亡
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| 16. 难度：压轴 | |
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下列关于动物细胞工程的叙述，正确的是 （ ） A．生物导弹是用癌细胞的单克隆抗体杀死癌细胞 B．动物细胞培养的基础是细胞具有全能性 C．细胞融合是利用了细胞膜的流动性 D．制备单克隆抗体的第二次筛选是选出杂交瘤细胞
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| 17. 难度：中等 | |
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下图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程。相关叙述正确的是
A. 用胃蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞 B. 生物反应器内应控制适宜的温度，并冲入纯氧保证细胞呼吸 C. 培养液中的支架提供了更多的细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长 D. “人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，但环境污染严重
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| 18. 难度：中等 | |
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胚胎干细胞功能特性不包括（ ） A. 具有发育的全能性 B. 体外培养可以分化成各种组织.器官 C. 冷冻保存可以进行遗传改造 D. 可以进行增殖
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| 19. 难度：中等 | |
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下列有关哺乳动物精子和卵细胞的发生以及受精作用的叙述，正确的是( ) A. 采集到的精子和卵细胞相遇即可发生受精作用 B. 排卵就是排出成熟卵细胞的过程 C. 卵细胞形成时的分裂过程均在卵巢内完成 D. 卵子受精的标志是在卵黄膜和透明带之间观察到两个极体
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| 20. 难度：中等 | |
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体外受精时采集小鼠卵子常用的方法是( ) A. 超数排卵处理法 B. 活体采卵法 C. 从早期胚胎中采集 D. 从屠宰后母畜卵巢中采集卵母细胞
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| 21. 难度：中等 | |
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若要制备某种细菌的基因组文库，需首先将其基因组DNA片段分别导人到大肠杆菌细胞中，某科研小组设计的实验流程见下图, 回答下列问题：
（1）为制备基因组文库，步骤①中的成分X应为该细菌所有的______（填“mRNA”、“DNA” 或“cDNA”）。步骤②中的质粒含有氨苄青霉素抗性基因，选用该基因的作用是________。 （2）限制酶Sau3A I识别序列和切割位点为 （3）步骤⑤中应选用对氨苄青霉素 ________________（填“敏感”或“不敏感”）的大肠杆菌作为受体菌，转化前通常先用 ____________________处理受体菌，使其处于感受态。 （4）科研小组采用下表方案进行转化，并检测转化是否成功。
一段时间后从上述三组取样，分别涂布到含有氨苄青霉素的培养基进行培养，观察是否有菌落的生长。若 _________________________________________，说明转化成功且结果可信。
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| 22. 难度：中等 | |
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天然大肠杆菌质粒一般含有lacZ基因而不含氨苄青霉素抗性基因；人工合成的大肠杆菌puc118质粒中含有lacZ基因外，还含有含氨苄青霉素抗性基因。若lacZ基因完整，便可表达出α-半乳糖苷酶，α-半乳糖苷酶能将培养基中含有的IPTG和X-gal水解成蓝色，形成蓝色菌落圈；若lacZ基因中插入了外源基因，带有puc118质粒的大肠杆菌便不能表达α-半乳糖苷酶，将形成白色菌落。此实验方法可以用于鉴别转基因实验是否获得成功。
（1）目的基因是_____________________________。 （2）过程③④需要________________________酶。 （3）图中的培养基中除含有大肠杆菌必需营养成分外，还应加入____________________等物质，用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。 （4）检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒。培养一段时间后出现三种类型：菌落处有蓝色、菌落处有白色、菌落不能生长。成功导入重组质粒的菌落圈的表现是______________。 有些菌落在该培养基中不能生长，原因是_____________________________________。
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| 23. 难度：中等 | |
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治疗性克隆对解决供体器官缺乏和器官移植后免疫排斥反应具有重要意义。流程如下：
（1）体细胞进行体外培养时，所需气体主要有O2和CO2，其中CO2的作用是_______________。 （2）在一定条件下，胚胎干细胞可以分化形成不同的组织器官。若将图中获得的组织器官移植给个体_______（填“A”或“B”），则不会发生免疫排斥反应。
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| 24. 难度：中等 | |
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Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图： (1)步骤①中所选的卵母细胞应处于________________________期。 (2)步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其________________分离出ES细胞，ES细胞在形态上表现为_____________________________的特点。 (3)步骤③中，需要构建含有Rag2基因的__________________。可以根据Rag2基因的核苷酸序列设计合成_____________，利用_______________技术扩增Rag2基因片段。用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在目的基因所在DNA片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有_________________酶的酶切位点。
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| 25. 难度：中等 | |
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埃博拉病毒（EBO）呈纤维状，EBO衣壳外有包膜，包膜上有5种蛋白棘突（VP系列蛋白和GP蛋白），其中GP蛋白最为关键，能被宿主细胞强烈识别。请回答下列问题： （1）基因疫苗指的是DNA疫苗，要获得编码GP蛋白抗原的基因疫苗，首先要提取出病人的mRNA，并将mRNA___________形成DNA。 （2）以GP蛋白作为疫苗比基因疫苗更安全，其原因是GP蛋白自身没有感染力，但保留有______________。为了从牛分泌的乳汁中生产GP蛋白，必须将GP蛋白基因与_______________等调控组件重组在一起，才能驱动转录过程。通过_______方法，导入牛的___________这种通过分泌乳汁来生产所需要的药品的转基因动物称为乳腺生物反应器。 （3）为了提高胚胎的利用率，可采用胚胎分割技术。进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的囊胚或_____进行操作。在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将_________。转基因牛是否分泌含GP蛋白的乳汁，可以通过_____________技术从分子水平进行检测。 （4）科研人员利用经EBO免疫后小鼠的_______与鼠的癌细胞进行融合成杂交瘤细胞，培养后可以获得纯净的单一品种抗体，其特点是___________，可以用此抗体与药物制成“生物导弹”，抗击EBO。
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