| 1. 难度：中等 | |
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某DNA分子中含有某限制酶的一个识别系统，用该限制酶切割该DNA分子，可能形成的 2个DNA片段是（ ）
A. ②④ B. ②③④ C. ①③④ D. ③④
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| 2. 难度：简单 | |
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下图是将人的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因。判断下列说法正确的是( )
A. 将重组质粒导入细菌B常用的方法是显微注射法 B. 将完成导入过程后的细菌涂布在含有氨苄青霉素的培养基上，能生长的只是导入了重组质粒的细菌 C. 将完成导入过程后的细菌涂布在含有四环素的培养基上，能生长的就是导入了质粒A的细菌 D. 目的基因成功表达的标志是受体细胞能在含有氨苄青霉素的培养基上生长
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| 3. 难度：中等 | |
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关于动物细胞培养的有关叙述，正确的是 A. 细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中 B. 动物细胞培养前和培养过程宁都要用胰蛋白酶处理 C. 动物细胞培养的目的只是获得大最的细胞分泌蛋白 D. 动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等
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| 4. 难度：中等 | |
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利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是 A. 用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B. 体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体 C. 将等量B淋巴细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞不一定为杂交瘤细胞 D. 利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法不一定能诊断出SARS病毒感染者
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| 5. 难度：中等 | |
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基因工程中，需使用特定的限制酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选。已知限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC—。根据图示判断下列操作正确的是( )
A. 目的基因和质粒均用限制酶Ⅱ切割 B. 目的基因和质粒均用限制酶Ⅰ切割 C. 质粒用限制酶Ⅱ切割，目的基因用限制酶Ⅰ切割 D. 质粒用限制酶Ⅰ切割，目的基因用限制酶Ⅱ切割
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| 6. 难度：中等 | |
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试管婴儿、试管苗和克隆羊这三者可以说是现代生物科技的杰出成果，下列对其生物学原理及技术的叙述，正确的是 （1）都属于无性生殖 （2）都不会发生基因重组 （3）都利用了细胞工程的技术 （4）都体现了己分化的细胞具有全能性 （5）试管婴儿的培育依赖体外受精技术、胚胎体外培养、胚胎移植等相关技术 A. （3）（4） B. （2）（3） C. （1）（3） D. （3）（5）
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| 7. 难度：中等 | |
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受精作用是卵子与精子相互识别、融合成受精卵的过程、能够阻止一个卵子与两个或多个精子结合的机制是 ①精子排出后在雌性动物生殖道内的获能 ②卵子排出后在输卵管内的进一步成熟 ③透明带反应 ④卵黄膜反应 A．①② B．②③ C．③④ D．①④
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| 8. 难度：中等 | |
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已知某种限制性内切酶在一线性DNA分子上有3个酶切位点,如下图中箭头所指,如果该线性DNA分子在3个酶切位点上都被该酶切断,则会产生a、b、c、d四种不同长度的DNA片段。现有多个上述线性DNA分子,若在每个DNA分子上至少有1个酶切位点被该酶切断,则从理论上讲,经该酶酶切后,这些线性DNA分子最多能产生长度不同的DNA片段种类数是 （ ）
A. 3 B. 4 C. 9 D. 12
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| 9. 难度：中等 | |
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下列哪项不属于体细胞核移植技术的应用 A. 保护濒危物种 B. 大量产生紫杉醇 C. 获得组织器官异体移植的供体 D. 加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育
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| 10. 难度：中等 | |
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已知一双链 DNA 分子，用限制酶Ⅰ切割得到长度为 120 kb（kb：千碱基对）片段；用限制酶Ⅱ切割得到40kb 和80kb 两个片段；同时用限制酶Ⅰ和限制酶Ⅱ切割时，得到 10 kb、80 kb 和 30 kb 3 个片段。据此分析该双链 DNA 分子结构及酶切位点情况为 A. C.
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| 11. 难度：中等 | |
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以下是几种不同限制性核酸内切酶切割DNA分子后形成的部分片段。下列的叙述中，错误的是
A. 以上DNA片段是由5种限制酶切割后产生的 B. 若要把相应片段连接起来，应选用DNA连接酶 C. 上述能进行连接的两个片段，其连接后形成的DNA分子是 D. 限制酶和DNA连接酶作用的部位都是碟酸二酯键
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| 12. 难度：简单 | |
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下列关于基因工程的叙述中，错误的是: A. 基因工程常用的运载体包括细菌的质粒、噬菌体、动植物病毒 B. 将目的基因导入大肠杆菌最常用的方法是用Ca2+处理细胞 C. 转基因羊在培育过程中还用到动物细胞培养技术和胚胎移植技术 D. 基因治疗是把有基因缺陷的细胞中的缺陷基因剔除后再导入健康的外源基因
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| 13. 难度：中等 | |
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如图为某种质粒简图，如图表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制 性核酸内切酶EcoRI、BamHI、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述错误的是
A. 如果用EcoRI对外源DNA和质粒进行酶切，将多个含有目的基因的DNA片段与多个质粒的酶切产物用DNA连接酶进行连接后，两两连接所形成的产物有三种 B. 如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRI酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoR I酶切点有1个 C. 为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时应使用BamHI和HindⅢ两种限制酶同时处理 D. —个图1所示的质粒分子经EcoRI切割后，含有2个游离的磷酸基团
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| 14. 难度：中等 | |
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采用基因工程技术将人凝血因子基因导入山羊受精卵，培育出了转基因羊。但人凝血因子只存在于该转基因羊的乳汁中，下列叙述正确的是 A. 如果人凝血因子基因的核苷酸序列己知，可用人工合成的方法获得该目的基因 B. 人凝血因子基因进入羊受精卵后，其传递和表达不再遵循中心法则 C. 人凝血因子基因存在于该羊的乳腺细胞，而不存在于其他体细胞中 D. 人凝血因子基因开始转录后，DNA聚合酶以DNA的一条链为模板合成
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| 15. 难度：困难 | |
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某研究所的研究人员将生长激素基因通过质粒介导进入大肠杆菌细胞内，来表达这产生生长激素。已知质粒中存在两个抗性基因：A是抗链霉素基因，B是抗青霉素基因，且目的基因要插入到基因B中，而 大肠杆菌不带有任何抗性基因，下列叙述错误的是 A. 大肠杆菌可能未导入质粒 B. 导入大肠杆菌的可能是重组质粒，也可能是质粒 C. 可用含靑霉素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒 D. 在含青霉素培养基中不能生长，但在含链霉素培养基中能生长的可能是符合生产要求的大肠杆菌
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| 16. 难度：中等 | |
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利用细菌大量生产人的胰岛素，下列叙述错误的是 A. 用适当的酶对运载体与人的胰岛素基因进行切割与黏合 B. 用适当的化学物质处理受体细菌表面，将重组DNA导入受体细菌 C. 通常通过检测目的基因产物来检测重组DNA是否已导入受体细菌 D. 重组DNA必须能在受体细菌内进行复制与转录，并合成人的胰岛素
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| 17. 难度：中等 | |
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下列关于基因工程中有关酶的叙述错误的是 A. 限制酶水解相邻核苷酸间的化学键打断DNA B. DNA连接酶可将末端碱基互补的两个DNA片段连接 C. DNA聚合酶能够从引物末端延伸DMA或RNA D. 逆转录酶以一条RNA为模板合成互补的DNA
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| 18. 难度：中等 | |
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美国学者已成功地利用人体皮肤细胞诱导出具备胚胎干细胞功能的干细胞，并利用皮肤干细胞治疗镰刀型细胞贫血症获得进展。下列叙述中正确的是 A. 人体皮肤细胞是高度分化的细胞，遗传物质发生改变 B. 皮肤干细胞用于治疗镰刀型细胞贫血症是其经诱导形成了造血干细胞 C. 从皮肤细胞诱导出具备胚胎干细胞功能的干细胞，是细胞再分化的过程 D. 与利用人体胚胎干细胞进行研究和疾病治疗相比，皮肤干细胞没有优势
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| 19. 难度：中等 | |
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图为人工种子，下列与其培育生产过程有关的叙述中不正确的是
A. 人工种子一般用离体的植物细胞通过组织培养技术获得 B. 胚状体是由未分化的、具有分裂能力的细胞构成 C. 同一批次的人工种子可以保证具有相同的基因型 D. 胚状体是由愈伤组织分化而成，离体细胞只有形成愈伤组织才能表现出全能性
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| 20. 难度：困难 | |
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科学家运用胚胎移植技术培育试管牛时，首先用激素促进良种母牛超数排卵，然后进行体外受精和培育，最后把胚胎送入母牛子宫内，孕育成小牛产出。下列分析错误的是 ( ) A. 供体与受体在胚胎移植前后的生理环境须保持一致 B. 在胚胎移植前可采用胚胎分割技术快速繁殖良种牛 C. 运用胚胎移植技术培育的试管牛属于动物克隆范畴 D. 须配制一系列不同成分的培养液以培养不同发育时期的胚胎
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| 21. 难度：简单 | |||||||||||||||||||||
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菊花的组织培养和月季的花药培养都是利用组织培养技术，关于两者的叙述下列说法中正确的选项有（）
A. ①②③④ B. ②③④ C. ①②④ D. ①②③④
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| 22. 难度：中等 | |
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下列技术依据DNA分子杂交原理的是 ①用DNA分子探针诊断疾病 ②B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的杂交 ③快速灵敏的检测饮用水中病毒的含量 ④目的基因与运载体结合形成重组DNA分子 A. ②③ B. ①③ C. ③④ D. ①④
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| 23. 难度：中等 | |
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2015年2月3日，英国议会下院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。
据图分析，下列叙述错误的是（ ） A、该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代 B、捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿 C、三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核 D、三亲婴儿的培育还需要早期环胎培养和胚胎移植等技术
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| 24. 难度：中等 | |
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下图表示抗人体胃癌细胞的单克隆抗体的制备过程，下列有关叙述错误的是
A. 图中甲可能是人体胃癌细胞的特异性抗原 B. 用特定的选择培养基对乙筛选，融合细胞均能生长，未融合细胞均不能生长 C. 丙、丁分别表示杂交瘤细胞和能分泌抗胃癌抗体的杂交瘤细胞 D. 丁的大规模培养可以在培养基中进行，也可以在小鼠腹腔内进行
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| 25. 难度：简单 | |
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下列有关基因工程诞生的说法，不正确的是（ ） A. 基因工程是在生物化学、分子生物学和微生物学等学科的基础上发展起来的 B. 工具酶和载体的发现使基因工程的实施成为可能 C. 遗传密码的破译为基因的分离和合成提供了理论依据 D. 基因工程必须在同物种间进行
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| 26. 难度：中等 | |
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在基因工程中,作为基因运输工具的运载体,下列特征除哪项外,都是运载体必须具备的条件（ ） A．能够在宿主细胞中复制,并稳定地保存 B．具有1～多个限制酶切点 C．必须是细菌的质粒或噬菌体 D．具有某些标记基因
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| 27. 难度：中等 | |
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酶是生命活动过程中的重要有机物，下列有关酶的叙述错误的是（） A. 胰蛋白酶是动物细胞工程中常用的工具酶 B. RNA聚合酶、DNA连接酶和解旋酶作用的化学键相同 C. 基因工程的工具酶是限制性核酸内切酶和DNA连接酶 D. PCR技术中使用耐高温的TaqDNA聚合酶扩增DNA片段
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| 28. 难度：中等 | |
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下列关于动物体细胞核移植技术和克隆动物的叙述，正确的是( ) A. 目前科学家可以用类似植物组织培养的方法获得完整的动物个体 B. 动物体细胞核移植技术可有选择地繁殖某一性别的家畜 C. 用于核移植的供体细胞一般都选用传代50代以内的细胞 D. 用体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行100%的复制
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| 29. 难度：中等 | |
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蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊作为乳腺生物反应器。下列有关乳腺生物反应器的说法，错误的是（ ） A. 将蜘蛛丝蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等结合在一起构建成表达载体 B. 可通过显微注射技术将表达载体导入羊的受精卵中 C. 可用丝蛋白基因探针与该羊口腔上皮细胞mRNA杂交，检测目的基因是否发挥作用 D. 上述培育转基因蜘蛛羊的过程涉及到基因工程、动物细胞培养、胚胎移植等技术
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| 30. 难度：简单 | |
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下列胚胎发育的阶段中，每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能的是( )。 A. 胎儿期 B. 原肠胚 C. 囊胚 D. 桑椹胚
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| 31. 难度：中等 | |
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下列关于植物组织培养和动物克隆的说法错误的是 A. 植物组培获得的试管苗，可能为杂合子，也可能为纯合子，可能为单倍体，也可能为二倍体 B. 同一株绿色开花植物不同部位的细胞经组培获得的愈伤组织基因型一定相同 C. 培育克隆动物的技术基础是动物的细胞培养及动物细胞核移植等 D. 为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素
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| 32. 难度：中等 | |
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家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养，可以提取干扰素用于制药。下列说法不正确的是( ) A. 家蚕细胞培养所需二氧化碳的主要作用是维持培养液的pH B. 来自cDNA文库的干扰素基因片段必须插入表达载体的启动子和终止子之间 C. 采用PCR技术扩增干扰素基因的实验中是以干扰素基因为模板 D. 进行转基因操作前，需用纤维素酶短时处理幼蚕组织，以便获得单个细胞
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| 33. 难度：中等 | |
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下列关于试管动物技术的叙述，正确的是 A. 该技术中首先要做的是体外受精和动物细胞培养 B. 试管动物技术培育动物过程全部在体外进行 C. 运用该技术繁育后代的过程属于无性生殖类型 D. 从输卵管中冲取的卵子直接与获能的精子在体外受精
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| 34. 难度：中等 | |
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下列有关植物体细胞杂交的叙述，不正确的是( ) A. 用酶解法去掉细胞壁，分离出有活力的原生质体 B. 诱导两种植物的原生质体融合，进而形成杂种细胞 C. 植物体细胞杂交的最终目的是获得细胞代谢产物 D. 植物体细胞杂交技术可以克服不同种间远缘杂交不亲和的障碍
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| 35. 难度：中等 | |
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关于受精过程的叙述错误的是 A. 获能后的精子与卵子相遇后，释放顶体酶穿过透明带进入放射冠 B. 透明带反应是阻止多精入卵的第一道屏障 C. 精子与卵细胞膜相互融合，精子入卵 D. 雄原核形成的同时，卵子完成减数第二次分裂
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| 36. 难度：中等 | |
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疟疾是经按蚊叮咬或输入带疟原虫者的血液而感染疟原虫所引起的传染病。研究发现，海参体液中含有一种能溶解人血的蛋白质X。按蚊体内含有这种蛋白质时，疟原虫会因缺乏某种营养物质而死亡。科学家据此培育抗疟原虫的按蚊。回答下列问题： (l)使用PCR技术体外扩增目的基因时，需要____种引物；该技术的原理是________________。 (2)编码蛋白质X基因与质粒构建表达载体时，所需的酶有__________；为了使转录在所需要的地方停下来，则需在表达载体上添加_________。为了便于筛选含有目的基因的细胞，需要在________________之间添加标记基因。 (3)为探究改造过的按蚊是否抗疟原虫，科学家让100只__________________分别吸食疟疾患者的血液，之后检测两组___________。
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| 37. 难度：中等 | |
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若要制备某种细菌的基因组文库，需首先将其基因组DNA片段分别导入到大肠杆菌细胞中，某科研小组设计的实验流程见下图：
回答下列问题： （1）为制备基因组文库，步骤①中的成分X应为该细菌所有的________________（填“mRNA”、“DNA”或“cDNA” ）。步骤②中的质粒含有氨苄青霉素抗性基因/选用该基因的作用是____________________。 （2）限制酶Sau3AI和BamHI的识别序列和切割位点为 （3）步骤⑤中应选用对氨苄青霉素____________（填“敏感”或“不敏感”）的大肠杆菌作为受体菌，转化前通常先用_____________处理受体菌，使其处于感受态。 （4）科研小组采用下表方案进行转化，并检测转化是否成功。
一段时间后从上述三组取样，分别涂布到含有氨苄青霉素的培养基进行培养，观察是否有菌落的生长。 ①三组实验菌落较多且相差不大，说明有杂菌污染或__________________________； ②若__________________________，说明转化成功且结果可信。
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| 38. 难度：中等 | |
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阅读如下材料： 材料甲：科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。 材料乙:T4溶菌酶在翁度较高时易失去活性，科学家对编码T4溶菌酶的基因进行改造，使其表达的T4溶菌酶的第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸，在该半觥氨酸与第97为的半胱氨酸之间形成了一个二硫键，提高了 T4溶菌酶的耐热性。 材料丙：兔甲和兔乙是同一物种的两个雌性个体，科学家将兔甲受精卵发育成的胚胎移植到兔乙的体内，成功产出兔甲的后代，证实了同一物种的胚胎在不同个体的体内发育。回答下列问题： （1）材料甲属于基因工程的范畴。在培育转基因植物时常用农杆菌转化法，农杆菌的作用是___________。 （2）材料乙属于___________工程范畴。该工程是指以分子生物学相关理论为基础，通过基因修饰或基因合成，对___________进行改造，或制造制造一种___________的技术。在该实例中，引起T4溶菌酶空间结构改变的原因是组成该酶肽链的___________序列发生了改变。 （3）材料丙属于胚胎工程的范畴。胚胎移植是指将获得的早期胚胎移植到___________种的、生理状况相同的另一个雌性动物体内，使之继续发育成新个体的技术。在资料丙的实例中， 兔甲称为___________体，兔乙称为___________体。
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| 39. 难度：中等 | |
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请回答： （1）植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。该技术可以保持品种的_________________，繁殖种苗的速度___________。离体的叶肉细胞在适宜条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部_____________________。 （2）把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作台上进行，其原因是避免___________的污染。 （3）微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗___________，而与___________配比适宜时可促进芽的增殖。若要抑制试管苗的生长，促使愈伤组织产生和生长，需要使用的生长调节剂是___________（脱落酸、2，4-D）。 （4）将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后，单株鲜重和光合作用强度的变化如图。 据图分析，随着培养基中蔗糖浓度的增加，光合作用强度的变化趋势是___________，单株鲜重的变化趋势是___________。据图判断，培养基中不含蔗糖时，试管苗光合作用产生的有机物的量___________（能、不能）满足自身最佳生长的需要。
（5）据图推测，若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力，应___________（降低，增加）培养基中蔗糖浓度，以便提高试管苗的能力。
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| 40. 难度：中等 | |
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某研究者用抗原（A）分别免疫3只同种小鼠（X、Y和Z），每只小鼠免疫5次，每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价（能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数），结果如下图所示。
若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞（染色体数目为40条），并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞（染色体数目为60条）按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。 回答下列问题： （1）制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上，则小鼠最少需要经过 次免疫后才能有符合要求的。达到要求的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是 小鼠，理由是 。 （2）细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交廇细胞外，可能还有 ，体系中出现多种类型细胞的原因是 。 （3）杂交瘤细胞中有 个细胞核，染色体数目最多是 条。 （4）未融合的B淋巴细胞经过多次传代培养后都不能存活，原因是 。
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| 41. 难度：中等 | |
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人的血清白蛋白（HAS）在临床上需求量很大，目前通常将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中，利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白，基本步骤如下： I.采集良种供体奶牛的卵母细胞和精子，通过体外受精，形成受精卵； II.将人血清白蛋白基因导入奶牛受精卵，形成重组细胞； Ⅲ.电脉冲刺激重组细胞，促使其形成早期胚胎； Ⅳ.将胚胎移植到受体母牛的子宫中，最终发育成转基因小牛。 请回答下列问题： （1）步骤I中，卵母细胞与精子结合过程中防止多精入卵的生理反应包括______。自然条件下，受精是在雌性动物的_______________内完成的。 （2）步骤II中，将人的血清白蛋白基因导入牛受精卵最为有效的方法是__________。导入基因前，需要将血清白蛋白基因与奶牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，这一步骤称为______________________________。 （3）步骤Ⅲ中，进行动物早期胚胎的体外培养时，培养液中除了含有各种无机盐和有机盐、维生素、氨基酸、核苷酸等营养成分外，还需要添加_______和动物血清。一般情况下，通常在合成培养基中加入一定量的抗生素，其目的是______________________________。 （4）步骤IV中，应选择性别为______________________________的奶牛胚胎进行移植。
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