| 1. 难度：简单 | |
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下列有关基因工程的叙述中，不正确的是（ ） A. 基因工程可以定向改变生物的性状 B. 基因的“剪刀”识别特定的DNA序列并在特定的位点切割DNA分子 C. 基因的“针线”能缝合由同种限制酶切割产生的黏性末端 D. 基因的运载体质粒只能从原核生物的细胞里获得
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| 2. 难度：中等 | |
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基因工程的正确操作步骤是（ ） ①目的基因与运载体相结合 ②将目的基因导入受体细胞 ③目的基因的检测与鉴定 ④提取目的基因 A. ③④②① B. ②④①③ C. ④①②③ D. ③④①②
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| 3. 难度：中等 | |
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关于PCR技术的说法不正确的是（ ） A. PCR技术获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列 B. PCR过程中只需要两个引物分子 C. PCR的主要过程包括变性、退火、延伸，其中延伸阶段需要Taq酶 D. PCR过程中DNA合成方向是5'到3'
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| 4. 难度：中等 | |
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下列关于基因工程技术的说法，错误的是（ ） A. 天然的质粒、噬菌体和动植物病毒一般不可以直接用作运载体 B. PCR反应中两种引物的碱基间应互补以保证与模板链的正常结合 C. 载体质粒通常采用抗生素抗性基因作为标记基因 D. 目的基因必须位于重组质粒的启动子和终止子之间才能表达
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| 5. 难度：简单 | |
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下列哪项是将目的基因导入单子叶植物细胞的常用方法（ ） A. 基因枪法 B. 显微注射法 C. 农杆菌转化法 D. 感受态细胞法
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| 6. 难度：简单 | |
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基因治疗是人类疾病治疗的一种崭新手段，下列有关叙述中正确的是（ ） A. 相对体外基因治疗，体内基因治疗效果较为可靠 B. 基因治疗是把缺陷基因诱变成正常基因 C. 基因可以治愈所有的单基因遗传病 D. 基因治疗的靶细胞若是体细胞，则获得的性状不会遗传给下一代
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| 7. 难度：中等 | |
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中华鲟是地球上最古老的脊椎动物，被称为“活化石”．研究者试图通过蛋白质工程改造中华鲟体内的某些蛋白质，使其更加适应现在的水域环境．以下说法错误的是 A. 该工程可以定向改变蛋白质分子的结构 B. 改造蛋白质是通过改造基因结构而实现的 C. 改造后的中华鲟和现有中华鲟仍是同一物种 D. 改造后的中华鲟的后代不具有改造的蛋白质
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| 8. 难度：中等 | |
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以下不能说明细胞全能性的实验是（ ） A. 玉米花粉粒培育出植株 B. 转入贮存蛋白基因的向日葵细胞培育出植株 C. 烧伤病人的健康细胞培养出皮肤 D. 将番茄与马铃薯细胞融合并培育成植株
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| 9. 难度：中等 | |
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下图为植物组织培养过程，有关说法正确的是（ ）
A. ①→④过程培养基保持不变 B. ②试管细胞全能性最高 C. 愈伤组织的代谢类型是需氧自养型 D. ④试管中培育出的个体都是纯合子
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| 10. 难度：中等 | |
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下图为利用玉米的幼苗芽尖细胞（基因型为BbTt）进行实验的示意图。下列有关叙述错误的是
A. 实现过程①需要在无菌条件下进行 B. 植株C是单倍体，由配子发育而来 C. 植株A与B基因型相同的概率是1/4 D. 过程②③都有染色体复制和着丝点分裂的变化
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| 11. 难度：中等 | |
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“白菜—甘蓝”是用细胞工程的方法培育出来的蔬菜新品种，它具有生长期短、耐热性强和易于储藏等优点。如图是“白菜—甘蓝”的杂交过程示意图。以下说法正确的是（ ）
A. 除去细胞壁形成原生质体，可运用的酶是纤维素酶、淀粉酶和果胶酶 B. 通常可诱导上述原生质体相互融合的方法是PEG和灭活的病毒诱导 C. “白菜一甘蓝”杂种植株产生的变异属于染色体变异 D. 愈伤组织形成“白菜—甘蓝”植物体必须经过脱分化和再分化两个过程
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| 12. 难度：中等 | |
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在下列各育种方式中，与组织培养技术无关的是 A. 利用花药离体培养得到单倍体植株 B. 用秋水仙素处理二倍体幼苗，获得四倍体植株 C. 通过组织培养培育人工种子 D. 通过体细胞杂交培养“番茄—马铃薯”杂种植株
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| 13. 难度：中等 | |
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下列有关植物细胞工程应用的分析，不正确的是（ ） A. 愈伤组织细胞分裂旺盛，经诱变处理，有利于获得突变个体 B. 将胚状体包埋在一个能提供营养的胶质中，再包裹人工薄膜，可以获得“人工种子” C. 同一株绿色开花植物的细胞，经培养获得的愈伤组织基因型完全相同 D. 利用组织培养技术工业化生产人参皂甙，提高产量
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| 14. 难度：简单 | |
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一般来说，动物细胞体外培养需要满足以下条件（ ） ①无毒的环境 ②无菌的环境 ③使用合成培养基，但通常需加血浆、血清等天然成分 ④温度与动物的体温相近 ⑤因在二氧化碳培养箱中培养，故不需要O2 ⑥适宜的PH A. ①②③④⑤⑥ B. ①②③④ C. ①②④⑤⑥ D. ①②③④⑥
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| 15. 难度：困难 | |
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下列有关核移植的叙述中，正确的是 A. 卵母细胞最好选择减数第一次分裂中期的卵母细胞 B. 胚胎核移植难度明显高于体细胞核移植 C. 供体细胞应选择传代10代以内的细胞 D. 通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞动物进行了100%的复制
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| 16. 难度：中等 | |
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生物技术的发展速度很快，已灭绝生物的“复生”将不再是神话．如果世界上最后一只野驴刚死亡，以下较易成为“复生”野驴的方法是 （ ） A. 将野驴的体细胞取出，利用组织培养技术，经脱分化、再分化，培育成新个体 B. 将野驴的体细胞两两融合，再经组织培养培育成新个体 C. 将野驴的体细胞的细胞核移植到母家驴的去核卵母细胞中，再经胚胎移植孕育新个体 D. 将野驴的基因导入家驴的受精卵中，培育成新个体
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| 17. 难度：中等 | |
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我国科学家以雌性猕猴胎儿成纤维细胞为核供体，成功克隆出两只猕猴，成为全球首例细胞克隆灵长类动物。有关叙述错误的是（ ） A. 培育出的两只猕猴均为雌性 B. 培育出的两只猕猴的基因组几乎完全相同 C. 这项技术证明高度分化的动物体细胞具有全能性 D. 克隆称猴的成功为大量培育灵长类遗传病模型动物提供可能
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| 18. 难度：中等 | |
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植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理不相符的是 A. 纤维素酶、果胶酶处理和胰蛋白酶处理一一酶的专一性 B. 植物组织培养和动物细胞培养——细胞的全能性 C. 原生质体融合和动物细胞融合一一生物膜的流动性 D. 紫草细胞培养和动物细胞培养——细胞分裂
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| 19. 难度：中等 | |
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内细胞团出现的时期（ ） A. 原肠胚期 B. 卵裂期 C. 桑椹胚期 D. 囊胚期
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| 20. 难度：简单 | |
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下列有关透明带的叙述中，不正确的是（ ） A. 透明带破裂发生在囊胚期 B. 透明带是由卵丘细胞组成的 C. 透明带位于放射冠和卵细胞膜之间 D. 透明带可被顶体酶水解
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| 21. 难度：简单 | |
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基因文库构建是基因工程操作中不可缺少的环节，关于基因文库的说法错误的是（ ） A. 某种生物的基因组文库比cDNA文库容量大 B. cDNA文库中含有基因中的启动子，而基因组文库中没有 C. 真核生物基因组文库中含有内含子，而cDNA文库没有 D. cDNA文库中的基因一般均可在物种间交流，而基因组文库中的基因只有部分可以
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| 22. 难度：困难 | |
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下图甲、乙、丙分别是目的基因、质粒载体、重组DNA（重组质粒）的三个示意图，限制酶有BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ。要获得理想的可表达目的基因的重组DNA，最佳的限制酶组合方式是（ ）
A. 用EcoRⅠ切割目的基因和质粒载体 B. 用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和质粒载体 C. 用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体 D. 用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体
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| 23. 难度：中等 | |
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下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述,正确的是（ ）
A. Ti质粒与抗虫基因有互补的黏性末端,所以不用DNA连接酶可以直接拼接 B. ③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上 C. ④的染色体上若含抗虫基因,则⑤就表现出抗虫性状 D. ⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异
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| 24. 难度：中等 | |||||||||
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下表为几种限制酶识别的序列和切割的位点。如下图，已知某DNA在目的基因的两端1、2、3、4四处有BamHⅠ或EcoRⅠ或PstⅠ的酶切位点。现用PstⅠ和EcoRⅠ两种酶同时切割该DNA片段（假设所用的酶均可将识别位点完全切开），下列各种酶切位点情况中，可以防止酶切后单个含目的基因的DNA片段自身连接成环状的是（ ）
A. 1为EcoRⅠ，2为BamHⅠ，3为EcoRⅠ，4为PstⅠ B. 1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为EcoRⅠ，4为PstⅠ C. 1为BamHⅠ，2为EcoRⅠ，3为PstⅠ，4为EcoRⅠ D. 1为EcoRⅠ， 2为PstⅠ， 3为PstⅠ，4为BamHⅠ
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| 25. 难度：中等 | |
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为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C(如图)，拟将其与质粒(如图)重组，再借助农杆菌导入菊花中。下列操作与实验目的不符的是（ ）
A. 用限制性核酸内切酶EcoRⅠ和连接酶构建重组质粒 B. 用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞 C. 在培养基中添加卡那霉素，筛选被转化的菊花细胞 D. 用DNA分子杂交技术可以检测C基因是否导入到菊花细胞中
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| 26. 难度：中等 | |
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下表为常用的限制性核酸内切酶（限制酶）及其识别序列和切割位点，由此推断的以下说法中，正确的是（ ）
（注：Y＝C或T，R＝A或G） A. 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 B. 限制酶切割后一定形成黏性末端 C. 不同的限制酶切割DNA分子后可以形成相同的黏性末端 D. 限制酶的切割位点在识别序列内部
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| 27. 难度：中等 | |
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图甲、乙中的箭头表示三种限制性核酸内切酶的酶切位点，ampr表示氨苄青霉素抗性基因，neo表示新霉素抗性基因．下列叙述正确的是（ ）
A. 图甲中的质粒用BamHⅠ切割后，含有4个游离的磷酸基团 B. 在构建重组质粒时，可用PstⅠ和BamHⅠ切割质粒和外源DNA C. 导入目的基因的大肠杆菌可在含氨苄青霉素的培养基中生长 D. 用PstⅠ和HindⅢ酶切，可以保证重组DNA序列的唯一性
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| 28. 难度：简单 | |
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蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊作为乳腺生物反应器。下列有关乳腺生物反应器的说法，错误的是（ ） A. 将蜘蛛丝蛋白基因与乳腺蛋白基因的启动子等结合在一起构建成表达载体 B. 将含有丝蛋白基因的表达载体导入动物乳腺细胞中即可获得乳腺生物反应器 C. 与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器不受性别等限制，受体来源更广泛 D. 转基因动物产生的生殖细胞可能含有药用蛋白基因
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| 29. 难度：中等 | |
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紫草素是紫草细胞的代谢产物,可作为生产治疗烫伤药物的原料.研究人员欲用植物组织培养技术通过培养紫草细胞生产紫草素,下列相关操作不适合的是( ) A. 调节植物激素的种类和比例以保证愈伤组织再分化并得到完整的植株 B. 培养基中要加入植物激素保证已分化的植物细胞脱分化形成愈伤组织 C. 对作为外植体的紫草叶片进行消毒处理既保证细胞活性也可减轻污染 D. 在培养细胞的过程中要不断通入无菌空气以保证氧气的充足供应
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| 30. 难度：中等 | |
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为给工厂化繁殖脱毒甘薯苗提供技术支持，科研人员利用植物组织培养技术研究甘薯茎尖（外植体）大小对诱导分化苗和脱毒苗的影响，结果如下表，下列相关叙述错误的是（ ）
A. 不同培养阶段培养基中激素种类和比例应适时调整 B. 脱分化过程中应给予充足光照使其进行光合作用 C. 可利用病毒cDNA制作探针对甘薯苗进行病毒检测 D. 0.3～0.5mm 大小的茎尖有利于脱毒甘薯苗的培养
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| 31. 难度：中等 | |
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下列关于动物细胞培养和核移植技术的叙述，正确的是（ ） A. 将组织分散成许多单个细胞时，不一定用胰蛋白酶来处理 B. 动物细胞培养应在含5% CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是刺激细胞呼吸 C. 体细胞核移植的过程中可通过基因枪法去除卵母细胞中的核 D. 动物细胞培养过程中需要在培养液中添加一定量的抗生素以保证无毒环境
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| 32. 难度：困难 | |
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核苷酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径(如下图)。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶，制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞中缺乏转化酶。现用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”来筛选特定的杂交瘤细胞。关于筛选原理的叙述，正确的是（ ）
A. 免疫的B细胞及其互相融合细胞在HAT培养基上不能增殖的原因是全合成途径被A阻断 B. 骨髓瘤细胞及其互相融合细胞因无法进行上述两个途径而在HAT培养基上不能增殖 C. 杂交瘤细胞因为可以进行上述两个途径所以能在HAT培养基上大量增殖 D. HAT培养基上筛选出的所有杂交瘤细胞既能大量增殖又能产生高纯度的目标抗体
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| 33. 难度：中等 | |
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某研究者利用细胞工程制备抗A的单克隆抗体。先用抗原(A)分别免疫3只同种小白兔(X、Y和Z)，每只小白兔免疫5次，每次免疫一周后测定各小白兔血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数)，制备B淋巴细胞时，免疫小鼠的血清抗体效价需达到16 000以上，结果如图所示。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 将抗原A注入小白兔体内的目的是为了获得小鼠免疫产生的抗A抗体 B. 最适合用于制备B淋巴细胞的是第五次免疫后的Y小白兔 C. 骨髓瘤细胞与B淋巴细胞的融合可以使用灭活的病毒进行促融 D. 融合细胞需经两次筛选才可获得只分泌抗A抗体的杂交瘤细胞
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| 34. 难度：困难 | |
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下图是一种“生物导弹”的作用原理示意图，没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段时间后被机体清除。阿霉素是一种抗肿瘤药，可抑制DNA和RNA的合成，对正常细胞也有一定毒性。下列说法不正确的是
A. 单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的 B. 活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程 C. 在治疗中，应先注射非活化磷酸阿霉素再注射生物导弹 D. 单克隆抗体特异性强，能减轻阿霉素对正常细胞的伤害
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| 35. 难度：中等 | |
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现代生物科学技术中涉及的一些关系，不符合集合图所示关系的是（ ）
A. ①PCR ②DNA复制 ③克隆 B. ①质粒 ②载体 ③病毒 C. ①cDNA文库 ②部分基因文库 ③基因组文库 D. ①动物细胞核移植 ②动物细胞工程 ③细胞工程
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| 36. 难度：中等 | |
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作物脱毒、改善畜产品的品质、抗除草剂作物、可保存的干扰素、检测有毒物质依次是下列哪项生物技术的应用（ ） ①基因工程 ②细胞工程 ③蛋白质工程 A. ①②②③② B. ②①①③② C. ②①②③② D. ②①③③②
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| 37. 难度：中等 | |
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“筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列关于筛选的叙述错误的是（ ） A. 基因工程中通过标记基因筛选出的细胞不一定含重组质粒 B. 在小鼠胚胎细胞培养过程中，需要通过筛选才能获得具有无限分裂能力的细胞 C. 植物体细胞杂交过程中，原生质体融合后获得的细胞需要进行筛选 D. 单克隆抗体制备过程中，第二次筛选出的细胞既能无限增殖又能产特定抗体
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| 38. 难度：简单 | |
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下列有关哺乳动物精子和卵细胞发生的叙述，正确的是（ ） A. 一个卵泡中能形成两到三个成熟的卵子 B. 精细胞内的其他物质浓缩为球体，叫做原生质滴，原生质滴中存在中心体 C. 不同种动物的精子的形态相似，大小略有不同，体型越大的动物精子越大 D. 成熟卵子的形成部位包括卵巢和输卵管
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| 39. 难度：简单 | |
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关于体内受精的顺序，正确的是（ ） ①释放第二极体②第一次卵裂开始③顶体反应④穿越透明带⑤雌、雄原核的形成 A. ④①③②⑤ B. ③④①⑤② C. ④⑤①②③ D. ③①④⑤②
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| 40. 难度：中等 | |
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下列有关受精作用及胚胎发育的说法中，正确的是（ ） A. 防止多精入卵的两道屏障是顶体反应和透明带反应 B. 卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加 C. 桑椹胚从透明带中伸展出来的过程称为“孵化” D. 卵子是否受精的标志是卵细胞膜和透明带之间是否出现两个极体
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| 41. 难度：中等 | |
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如图为三种质粒和一个含目的基因的DNA片段，其中ApR为氨苄青霉素抗性基因，TcR为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，EcoR Ⅰ(0.7 kb)、Pvu Ⅰ(0.8 kb)等为限制酶切割位点，括号内的数据是该切点与复制原点的距离。已知1 kb＝1 000个碱基对，请回答下列问题：
(1)片段D为目的基因中的某一片段，则下列酶能形成或断裂图中②所示化学键的有_________(多选填字母)。 a、限制性核酸内切酶 b、DNA连接酶 c、Taq酶 d、解旋酶 e、DNA水解酶 (2)若想获得大量的目的基因，可采用________法进行扩增，含目的基因的DNA片段共经过______次循环后刚好能形成等长的目的基因片段，复制n次需要提供特异性引物对______对。 (3)图中作为目的基因运载体最理想的质粒是________(填“A”“B”或“C”)，请据图分析，其他两种质粒一般不能作为运载体的理由分别是________________________________ (4)用EcoR Ⅰ全酶切目的基因和质粒B形成的重组质粒，并进行电泳观察，可出现长度分别为1.1 kb和______kb的两个片段，或者长度分别为_________的两个片段(重组质粒上目的基因的插入位点与EcoR I的识别位点之间的碱基对忽略不计)。 (5)将分别用限制酶Pvu Ⅰ切开的质粒B溶液与目的基因溶液混合，加入DNA连接酶后，进行大肠杆菌受体细胞导入操作，则受体细胞的类型（对抗生素表现出抗性R或敏感性S，蓝白代表菌落颜色）包含________(多选填字母)。 A．ApR、蓝色 B．ApR、白色 C．ApS、蓝色 D．ApS、白色
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| 42. 难度：中等 | |
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为培育出含β－胡萝卜素的“黄金大米”，科研人员提出以下两套培育方案。请分析回答下列问题。
(1)甲方案中，β－胡萝卜素基因能在玉米和水稻体内出现相同表达结果的原因是__________。②过程中可用_____________技术检测水稻体细胞DNA上是否插入了β－胡萝卜素基因。 (2)乙方案中，在体细胞杂交前需要用_______法除去细胞壁获得原生质体，诱导其融合的化学试剂常用_________。杂交细胞形成的标志是_______________，与该过程密切相关的单层膜细胞器为____________。 (3)通过⑤获得“黄金大米”幼苗过程中，除了在培养基中添加营养物质外，还需要添加___。 (4)植物体细胞杂交在育种工作中具有广泛的应用价值，其突出的优点是可以___________。
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| 43. 难度：中等 | |
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资料显示，中国每年约有13万新增宫颈癌病例，占全球新发病例的三分之一，其中约有8万女性去世。宫颈癌也是中国15岁至44岁女性中的第二大高发癌症。人乳头状瘤病毒(HPV)与宫颈癌的发生密切相关，抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生，以下是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程，请据图回答下列问题：
(1)单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有_________________________。 (2)对于抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞应尽早进行克隆化，克隆化的方法最常用的是有限稀释法，即稀释细胞到3～10个/ mL，每孔加入细胞稀释液_____ mL，使每个孔内细胞一般不多于一个，达到单克隆培养的目的。 (3)由上述过程生产出的单克隆抗体一般不能直接用于人体，理由是____________________。 (4)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因(prG)，该基因能激发动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的制备单克隆抗体技术外，请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路。_______________________________________。 (5)利用蛋白质工程技术对抗HPV抗体进行改造以延长其体外保存的时间，其基本途径是从_________________出发，设计_________________，进一步推测应有的氨基酸序列，进而确定对应的脱氧核苷酸序列，据此获得相应基因。
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| 44. 难度：中等 | |
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下图表示哺乳动物精子和卵子相遇以及动物胚胎发育过程的几个阶段，请据图回答问题：
(1)精细胞变形为精子的过程中，细胞中的很多结构会消失，而细胞核和线粒体都保留下来，为什么？______________________________________________________________________ (2)精子与卵子相遇，________内的某些酶类释放出来，可直接溶解___________之间的物质，形成精子穿越_______的通道。___________________，标志着受精作用完成。 (3)A时期的细胞具有发育上的_________性，B时期开始出现____________，B时期的[1]将来发育成______________，[2]将来发育成_______________。
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