专题4.2 血红蛋白的提取和分离-学易试卷君之课时同步君2018-2019学年高二生物人教版（选修1）

一、单选题

1. 难度：中等

在蛋白质的提取和分离中，对于样品的处理过程的分析正确的是

A. 洗涤时离心速度过高、时间过长，白细胞等会沉淀，达不到分离的效果

B. 洗涤红细胞的目的是除去血浆中的葡萄糖、无机盐

C. 洗涤过程中用0.1%的生理盐水

D. 透析的目的是去除样品中相对分子质量较大的杂质

2. 难度：中等

蛋白质的分离与纯化技术是蛋白质研究的重要技术。下列有关叙述不正确的是( )

A. 根据蛋白质分子不能透过半透膜的特性，可将样品中各种不同的蛋白质分离

B. 根据蛋白质所带电荷性质的差异及分子大小等，可通过电泳分离蛋白质

C. 根据蛋白质相对分子质量的大小，可通过凝胶色谱法分离蛋白质

D. 根据蛋白质的分子大小、密度不同，可通过离心沉降法分离蛋白质

3. 难度：中等

下列有关凝胶色谱法的叙述，不正确的是

A. 凝胶色谱法的原理是不同大小的分子所经的路径不同而得以分离

B. 目前经常使用的凝胶有交联葡聚糖、聚丙烯酰胺和琼脂糖等

C. 大分子物质后被洗脱出来，小分子物质先被洗脱出来

D. 血红蛋白的颜色可用于凝胶色谱法分离过程的监测

4. 难度：简单

下列操作正确的是（    ）

A. 分离红细胞时采用低速长时间离心

B. 红细胞释放出血红蛋白只需要加入蒸馏水就可

C. 分离血红蛋白溶液是低速短时间离心

D. 透析时要用20mmol/L的磷酸缓冲液，透析12h

5. 难度：中等

细胞破碎后，各种蛋白质就会释放出来，再根据蛋白质的不同特性进行提取。下列关于蛋白质抽提的措施中，不正确的是(　　)

A. 酸性蛋白质可用稀碱性溶液抽提

B. 水溶性蛋白质可用透析液(中性缓冲液)抽提

C. 脂溶性蛋白质可用有机溶剂抽提

D. 碱性蛋白质可用强酸性溶液抽提

6. 难度：中等

关于凝胶色谱柱的装填，下列叙述错误的是

A. 交联葡聚糖凝胶（G-75）“G”表示凝胶的交联程度，膨胀程度及分离范围，75表示凝胶得水值

B. 凝胶用自来水充分溶胀后，配成凝胶悬浮液

C. 用300 mL的物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液充分洗涤凝胶12 h

D. 色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现有气泡，必须重装

7. 难度：简单

将处理破裂后的红细胞混合液以2000r/min的速度离心10min后，离心管中的溶液分为四层，从上到下的顺序依次是

A. 血红蛋白、甲苯层、脂质物质层、红细胞破碎物沉淀层

B. 甲苯层、红细胞破碎物沉淀层、血红蛋白、脂质物质层

C. 脂质物质层、血红蛋白、甲苯层、红细胞破碎物沉淀层

D. 甲苯层、脂质物质层、血红蛋白、红细胞破碎物沉淀层

8. 难度：中等

关于电泳的说法不正确的是(　　)

A. 电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程

B. 带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动

C. 蛋白质在醋酸纤维薄膜上的移动速度取决于它所带净电荷的多少

D. 电泳后需经染色、漂洗和脱色，才可长期保存

9. 难度：中等

红细胞中含有大量血红蛋白，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验来提取和分离血红蛋白．下列对血红蛋白提取和分离的叙述，错误的是（ 　　）

A. 血红蛋白提取和分离一般按照“样品处理→粗分离→纯化→纯度鉴定”的顺序进行

B. 纯化过程中要用生理盐水充分溶胀凝胶来配制凝胶悬浮液

C. 样品处理过程中用蒸馏水的目的是使红细胞吸水涨破释放出血红蛋白

D. 可经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定

10. 难度：中等

下列有关蛋白质提取和分离的说法，错误的是

A. 透析法分离蛋白质的原理是利用蛋白质不能通过半透膜的特性

B. 采用透析法使蛋白质与其他小分子化合物分离开来

C. 离心沉降法通过控制离心速率使分子大小、密度不同的蛋白质分离

D. 蛋白质在电场中可以向与其自身所带电荷电性相同的电极方向移动

11. 难度：中等

下列关于蛋白质的纯化方法的叙述，错误的是

A. 纯化主要是根据蛋白质以及蛋白质与其他物质之间的理化性质的差异进行的

B. 透析法可去除小分子化合物杂质，原理是不同分子所携带净电荷不同

C. 通过控制离心速率，可使分子大小、密度不同的蛋白质沉降分层，从而分离不同的蛋白质

D. 不同的物质在同一电场中的移动速度不同，因此可用电泳法分离蛋白质

12. 难度：简单

以下对DNA和血红蛋白的提取与分离（鉴定）实验的分析错误的是

A. 都要用猪血细胞来做实验材料

B. 在DNA的粗提取中可利用DNA在不同浓度盐溶液中的溶解度不同而析出

C. 在实验中都要进行除杂处理以便得到较纯净的DNA或血红蛋白

D. 将析出的DNA溶解在2 mol/L的NaCl溶液中，加入二苯胺试剂沸水浴后呈现蓝色

二、非选择题

13. 难度：困难

某生物兴趣小组在“蛋白质的提取和分离”实验中，准备从猪的血液中初步提取血红蛋白，设计的“血红蛋白提取、分离流程图”如下：

实验准备(配制缓冲液血细胞悬液)样品处理(洗涤、破碎、离心等)蛋白质粗分离(透析)纯化、纯度鉴定(凝胶色谱法、电泳等)

请回答下列有关问题：

(1)样品处理中红细胞的洗涤要用________反复冲洗、离心。向红细胞悬液中加入一定量的低浓度pH＝7.0的缓冲液并充分搅拌，可以破碎红细胞，破碎细胞的原理是________。

(2)血红蛋白粗分离阶段，透析的目的是________，若要尽快达到理想的透析效果，可以________(写出一种方法)。

(3)电泳利用了待分离样品中各种分子的_________________________等的差异，而产生不同迁移速度，实现各种分子的分离。

(4)一同学通过血红蛋白醋酸纤维薄膜电泳，观察到正常人和镰刀型细胞贫血症患者的血红蛋白电泳结果如图所示。由图可知携带者有________种血红蛋白，从分子遗传学的角度作出的解释是_____________________________________。

14. 难度：中等

红细胞含有大量的血红蛋白，红细胞的机能主要是由血红蛋白完成的，血红蛋白的主要功能是携带O₂或CO₂，我们可以选用猪、牛、羊或其他脊椎动物的血液进行实验，来提取和分离血红蛋白，请回答下列有关问题：

（1）血红蛋白提取和分离的过程可分为四步：________、________、________和________。

（2）实验前取新鲜的血液，要切记在采血容器中预先加入柠檬酸钠，取血回来，马上进行离心，收集、血红蛋白溶液。

①加入柠檬酸钠的目的是________________。

②以上所述的过程即是样品处理，它包括________、________收集血红蛋白溶液。

（3）洗涤红细胞的目的是________________________。

（4）你如何知道红细胞已洗涤干净？_______________________________________。

（5）分离红细胞时的离心速度及离心时间分别是_______________________________________。

（6）若离心速度过高和时间过长结果会怎样？_______________________________________。

（7）将收集的血红蛋白溶液放在透析袋中进行透析，即样品的粗分离。

①透析的目的是______________________。

②透析的原理是______________________。

（8）然后通过凝胶色谱法将样品进一步纯化，最后经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳进行纯度鉴定。样品纯化的目的是_______________________________________。

15. 难度：中等

血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分,负责血液中O₂或CO₂的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题。

（1）将实验流程补充完整:A为_____,B为____。凝胶色谱法是根据_______来分离蛋白质的有效方法。

（2）洗涤红细胞的目的是去除____,洗涤次数过少,无法除去____;离心速度过高和时间过长会使____一同沉淀,达不到分离的效果。洗涤干净的标志是____。释放血红蛋白的过程中起作用的是____。

（3）在洗脱过程中加入物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液（pH为7.0）的目的是_______。如果红色区带____,说明色谱柱制作成功。