| 1. 难度：中等 | |
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下列关于现代生物科技相关知识的叙述，正确的是（ ） A.单倍体育种不属于生物工程范畴 B.动物细胞融合技术与植物体细胞杂交原理和意义都相同 C.人工受精后的一定时间内收集供体原肠胚用于胚胎分割 D.基因工程的出现使人类有可能按照自己的意愿定向改造生物
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| 2. 难度：中等 | |
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在基因工程的步骤中，不进行碱基互补配对的是（ ） A. 制备重组DNA分子 B. 分子杂交技术 C. 人工合成目的基因 D. 目的基因导入受体细胞
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| 3. 难度：中等 | |
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作为基因工程的运输工具的运载体，必须具备的条件及理由是（ ） A.能够在宿主细胞中稳定保存并大量复制，以便提供大量的目的基因 B.具有多个限制酶切位点，以便于目的基因的表达 C.具有某些标记基因，以使目的基因能够准确定位与其结合 D.必须同时具备启动子、终止子、标记基因等，以使目的基因在宿主细胞中准确表达
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| 4. 难度：中等 | |
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从高粱的基因组中分离出磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因（Ppc基因），利用转基因技术将其转入水稻体内可以提高水稻的光合效率，下列叙述不正确的是（ ） A.此技术的关键是基因表达载体的构建 B.Ppc基因即使成功导入到水稻细胞中也未必能正常表达 C.此技术可用抗原—抗体杂交检测基因是否正常转录 D.此技术是否成功必须测定转基因植株与非转基因植株的光合速率并进行对照
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| 5. 难度：中等 | |
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下列有关哺乳动物精子和卵细胞的发生以及受精作用的叙述，正确的是（ ） A.精子的尾是由精细胞中的线粒体形成的 B.排卵就是排出成熟卵细胞的过程 C.精子、卵细胞的相互识别保证了同种精卵结合 D.第一次卵裂产生的子细胞失去了细胞全能性
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| 6. 难度：中等 | |
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在基因工程、细胞工程和胚胎工程中所用的物质、仪器和其发挥的作用正确的是 A. 肝素——诱导精子与卵细胞受精 B. DNA合成仪——对目的基因进行PCR扩增 C. CO2培养箱——动物细胞培养 D. 聚乙二醇——诱导细胞分化
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| 7. 难度：简单 | |
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下图表示利用棉花叶肉细胞原生质体培养进行遗传改良的过程，据图分析不正确的是（ ）
A.该培养过程可以体现棉花叶肉细胞的全能性 B.②过程能定向诱导原生质体产生优良性状的突变 C.③过程中叶肉细胞失去了其特有的结构和功能 D.④过程需用适宜浓度的生长素和细胞分裂素处理
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| 8. 难度：中等 | |
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下列说法正确的是（ ） A.毛霉属于细菌，是单细胞生物，没有由核膜包围的细胞核 B.制备MS固体培养基时，在使用提前配制的母液时，可直接用移液管从母液中提取 C.菌种的长期保存一般采用甘油管藏 D.腌制泡菜的全过程乳酸菌的含量不变，活性不同
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| 9. 难度：中等 | |
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在应用农杆菌侵染植物叶片获得转基因植株的常规实验步骤中，不需要的是（ ） A. 用携带目的基因的农杆菌侵染植物细胞 B. 用选择培养基筛选导入目的基因的细胞 C. 用聚乙二醇诱导转基因细胞的原生质体融合 D. 用适当比例的生长素和细胞分裂素诱导愈伤组织生芽
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| 10. 难度：中等 | |
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下列有关细胞工程的叙述，正确的是（ ） A.PEG是促细胞融合剂，可直接诱导植物细胞融合 B.从理论上讲，基因工程和细胞工程都可以定向改造生物的遗传性状和克服远缘杂交不亲和的障碍 C.植物组织培养和动物细胞培养技术的原理是相同的 D.用愈伤组织制备人工种子时要防止细胞破裂
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| 11. 难度：中等 | |
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下列现代生物科技相关知识的叙述，正确的是（ ） A.基因工程与蛋白质工程都能制造出新的蛋白质 B.用花粉离体培养获得的抗病植株，其细胞仍具有全能性 C.同一株绿色开花植物不同部位的细胞经组织培养获得的愈伤组织基因相同 D.使用免疫抑制剂以避免代孕牛对植入胚胎的排斥反应
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| 12. 难度：中等 | |
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下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述错误的是（ ） A.移植胚胎的遗传特性在孕有育过程中不受受体的影响 B.胚胎干细胞具有体积大、细胞核小、核仁明显等特点 C.体外受精时采集的精子需放入培养液中培养，以达到获能状态 D.囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异不是复制水平上的差异，而是转录水平上的差异引起的
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| 13. 难度：中等 | |
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克隆动物与培养试管动物的过程共有的操作环节是 A.体外受精 B.体内受精 C.细胞核移植 D.胚胎移植
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| 14. 难度：中等 | |
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通过胚胎移植技术，可以实现良种牛的快速繁殖。下列叙述正确的是（ ） A.受精和胚胎的早期培养都需要在体外进行 B.对供体母牛和受体母牛都要进行激素处理 C.对冲卵获得的原肠胚检查合格后方可移植 D.胚胎分割移植实现同卵多胎的成功率较高
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| 15. 难度：中等 | |
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下列关于单克隆抗体的叙述，不正确的是（ ） A.其化学本质是蛋白质 B.治疗癌症所用的“生物导弹”中的“瞄准装置”是单克隆抗体 C.利用单克隆抗体制成诊断盒，可用于疾病的诊断 D.单克隆抗体只能在体内生产，不能在体外生产
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| 16. 难度：中等 | |
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科学家在河南华溪蟹中找到了金属硫蛋白基因，并以农杆菌的质粒为载体，采用转基因方法培育出了硫吸收能力极强的转基因烟草。下列有关该烟草培育的说法错误的是（ ） A.需用特定的限制性核酸内切酶切割烟草的核酸 B.转基因烟草与原烟草之间一般不会出现生殖隔离 C.通过农杆菌转入重组质粒的植物细胞是单个烟草细胞或原生质体 D.金属硫蛋白基因的两端与作为载体的质粒至少存在着一段核苷酸序列相同的片段
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| 17. 难度：中等 | |
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下列关于生物工程技术的叙述中，正确的是（ ） A.转基因羊和克隆羊多利的培育克服了远缘杂交不亲合的障碍 B.胚胎移植时需使用胰蛋白酶使早期胚胎处于游离状态，为胚胎的收集提供可能 C.利用花药离体培养得到单倍体植株，从紫草的愈伤组织中提取紫草素，利用细胞工程培育“番茄、马铃薯”杂种植株，都利用了植物组织培养技术 D.利用胚胎移植技术培养成的个体均属于有性生殖的范畴
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| 18. 难度：中等 | |
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下列关于转基因技术的应用，正确的是（ ） A.限制性核酸内切酶只在获得目的基因时使用 B.科学家设法将目的基因整合到受体细胞的叶绿体基因组中，这是因为叶绿体基因组不会进入生殖细胞中 C.RNA聚合酶对于抗虫基因在棉花细胞中的表达不可缺少 D.转基因棉花是否具有抗虫特性是通过检测棉花对抗生素抗性来确定的
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| 19. 难度：简单 | |
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下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，不正确的是（ ） A.卵裂期胚胎中细胞数目不断增加，而有机物总量却有所减少 B.囊胚期的细胞出现了细胞分化，但遗传物质未发生改变 C.桑椹胚的各细胞结构功能基本相同 D.通过假阴道法、电刺激法等方法对精子进行获能处理
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| 20. 难度：简单 | |
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某种微生物合成的蛋白酶与人体消化液中的蛋白酶的结构功能相似，只是热稳定性较差，进入人体后容易失效。现要将此酶开发成一种片剂，临床治疗食物的消化，最佳方案是（ ） A.对此酶中的少数氨基酸替换，以改善其功能 B.将此酶与人蛋白酶进行拼接，形成新的蛋白酶 C.重新设计与创造一种全新的蛋白酶 D.减少此酶在片剂中的含量
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| 21. 难度：简单 | |
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下列有关生物工程的叙述正确的是 A.应用基因诊断技术，可检测受体细胞中的目的基因是否表达 B.筛选产生抗体的杂交瘤细胞需要使用特定的选择培养基 C.茎尖细胞具有很强的分裂能为，离体培养时不需要脱分化即可培养成完整植株 D.将牛的体细胞核移植到去核卵细胞中，获得克隆牛是一种培育新物种的方式
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| 22. 难度：简单 | |
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所谓的“设计试管婴儿”比一般所说的试管婴儿要多一步骤，是哪一步 A. 基因检测 B. 体外受精 C. 胚胎移植 D. 细胞核移植
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| 23. 难度：中等 | |
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关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是 A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同 B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 C.烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖 D.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒
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| 24. 难度：中等 | |
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下列有关微生物培养的叙述，错误的是（ ） A.稀释涂布平板法能获得单菌落，可以用于计数活菌数目 B.在对微生物进行培养前，需要对接种工具和培养物进行灭菌 C.将接种后的平板培养基倒置，放入恒温培养箱中培养 D.分离能分解尿素的细菌，要以尿素作为培养基中唯一的氮源
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| 25. 难度：简单 | |
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下列不是细菌接种过程中的无菌操作的是 A.灼烧接种环 B.高压灭菌 C.于超净工作台操作 D.靠近火焰
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| 26. 难度：中等 | |
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下列有关生物技术实践的叙述，不正确的是（ ） A.利用刚果红培养基上是否形成透明圈来筛选纤维素分解菌 B.在DNA粗提取与鉴定实验中，向溶解DNA的烧杯中加蒸馏水的目的是漂洗DNA C.腐乳制作过程中，料酒的用量过多，后期成熟时间将延长 D.提取植物细胞DNA时需在研钵中加入洗涤剂和食盐
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| 27. 难度：中等 | |
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如图所示为动物细胞培养过程中，动物细胞增殖情况的变化曲线（图中B、D两点表示经处理或筛选后继续培养），相关说法不正确的是
A.OA段的培养称为原代培养，C点细胞大约增殖60代指该细胞已传代培养60代 B.AB段可能发生了接触抑制现象，需要用胰蛋白酶等处理 C.CD段细胞增殖缓慢，以至于完全停止，此时部分细胞的核型可能会发生改变 D.制备单克隆抗体时，可选取图中D点的细胞与B淋巴细胞融合形成杂交细胞
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| 28. 难度：中等 | |
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牛雄性胚胎中存在特异性H-Y抗原，可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是（ ） A.H-Y单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌 B.应选用原肠胚做雌雄鉴别 C.在制备乳腺生物反应器时需将目的基因导入到乳腺细胞中 D.用H-Y抗原免疫母牛可获得相应抗体
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| 29. 难度：中等 | |
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下列关于小鼠体外受精及胚胎发育的叙述，错误的是（ ） A.精子在获能液中于37℃、5% CO2条件下培养的目的是使精子获能 B.小鼠在特定光控周期条件下饲养，注射相关激素有促进超数排卵的作用行 C.分割的胚胎细胞有相同的遗传物质，因此发育成的个体没有形态学差异 D.高等哺乳动物胚胎发育中的细胞分化开始于囊胚期，终止于生命结束
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| 30. 难度：中等 | |
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下面为番茄植物组织培养过程的流程图解，以下相关叙述不正确的是（ ） 植物叶片 A.脱分化发生在b步骤，形成愈伤组织，在此过程中植物激素发挥了重要作用 B.人工种子的胚乳中含有胚状体发育所需要的营养物质，还可以添加农药和植物激素 C.人工种子中的胚状体与正常种子中的胚都是新个体的幼体，都只具有一个亲本的遗传物质 D.经该过程产生的人工种子属于无性繁殖
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| 31. 难度：中等 | |
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用XhoI和SalI两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是（ ）
A.如图中两种酶识别的核苷酸序列不同 B.如图中酶切产物可用于构建重组DNA C.泳道①中是用SalI处理得到的酶切产物 D.图中被酶切的DNA片段是单链DNA
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| 32. 难度：中等 | |
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关于基因工程的应用，下列说法不正确的是（ ） A.基因治疗的主要原理是引入健康基因并使之表达 B.将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组中，使获得的转基因牛分泌的乳汁中乳糖的含量大大降低 C.将生长素基因注入小鼠的受精卵中，可得到体型巨大的“超级小鼠” D.利用基因工程技术，得到的乳腺生物反应器可以解决很多重要的药品的生产问题
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| 33. 难度：中等 | |
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实验人员利用矮牵牛（二倍体，2n=14）的红色花瓣细胞（液泡呈红色）与枸杞（四倍体，4n=48）叶肉细胞，制备了相应的原生质体，并诱导其融合，经筛选、培养获得杂种植株。下列有关叙述错误的是 A. 获得该杂种植株克服了远缘杂交不亲和的障碍 B. 可利用电激、离心等方法诱导原生质体融合 C. 可利用光学显微镜观察，筛选出杂种原生质体 D. 若原生质体均为两两融合，则融合后的细胞中染色体数目均为62条
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| 34. 难度：中等 | |
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PCR技术是一种DNA的扩增技术。在一定条件下，加入模板DNA、DNA聚合酶、dATP、dCTP、dGTP、dTTP可以实现DNA的扩增。下列说法正确的是（ ） A.dCTP水解脱去两个磷酸基后是组成RNA的基本单位之一 B.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键 C.PCR过程中只需要两个引物分子 D.PCR扩增反应体系中的缓冲液相当于细胞中的细胞质基质
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| 35. 难度：中等 | |
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如图表示改造哺乳动物遗传特性的三种途径。相关叙述错误的是（ ）
A.获得动物1的受体细胞通常是受精卵 B.动物2体内各体细胞的基因种类相同 C.获得动物3的遗传物质一般来自于两个亲本 D.上述动物的获得均需运用胚胎移植
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| 36. 难度：中等 | |
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我国科学家屠呦呦因在青蒿素研究中的特殊贡献荣获2015年诺贝尔生理学或医学奖。青蒿素是青蒿植株的次级代谢产物，其化学本质是一种萜类化合物，其生物合成途径如图1所示。正常青蒿植株的青蒿素产量很低，难以满足临床需求，科学家为了提高青蒿素产量，将棉花中的FPP合成酶基因导入了青蒿植株并让其成功表达，获得了高产青蒿植株，过程如图2所示。请据图回答问题：
（1）研究人员从棉花基因文库中获取FPP合成酶基因后，可以采用PCR技术对该目的基因进行大量扩增，该技术除了需要提供模板、原料、Taq酶外，还需要根据______________设计引物。 （2）图2中①上启动子的作用是____________________________。 （3）①需要与______________处理的农杆菌混合于培养基中完成转化，在制备此培养基时，需先挑取上述单菌落在培养液中培养并接种于固体培养基上，并使其均匀分布在含有_________的培养基上培养一段时间后，挑选出部分菌株。若②不能在以上培养基上生存，说明______________。 （4）用农杆菌感染青蒿植株，是因为农杆菌中的______________可转移至青蒿植株细胞，并整合到其染色体DNA上，整合成功的分子学基础______________。 （5）据图分析，除了通过提高FPP的含量来提高青蒿素的产量外，还可以通过哪些途径来提高青蒿素的产量? ____________________________。
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| 37. 难度：中等 | |||||||
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Graves病（GD）可导致甲状腺功能亢进。研究发现，GD患者甲状腺细胞表面表达大量细胞间粘附分子I（ICAM-1），导致甲状腺肿大。科研人员通过制备单克隆抗体，对治疗GD进行了尝试。 （1）用ICAM-1作为抗原间隔多次免疫若干只小鼠，几周后取这些免疫小鼠的血清，分别加入多孔培养板的不同孔中，多孔培养板中需加入______________以检测这些小鼠产生的抗体。依据反应结果，选出_______________反应最强的培养孔所对应的小鼠M． （2）实验所用骨髓瘤细胞需置于______________的气体环境中进行培养，融合前将部分培养细胞置于选择培养基中培养，一段时间后培养基中_______________填（“有”或“无”）骨髓瘤细胞生长，说明培养基符合实验要求。 （3）从小鼠M的脾脏中取相应细胞制备成细胞悬液，与实验用骨髓瘤细胞进行融合，用选择培养基筛选得到具有______________能力的细胞。将获得的上述细胞在多孔培养板上培养、检测，筛选出符合要求的杂交瘤细胞，植入小鼠腹腔中进行克隆培养，一段时间后从小鼠腹水中提取实验用抗体，其与常规的血清抗体相比，优越性体现在______________。 （4）若进一步比较实验用抗体和131I对GD模型小鼠的治疗作用，可将若干GD模型小鼠等分为三组，请补充下表中的实验设计__________。
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| 38. 难度：中等 | |
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二倍体哺乳动物体细胞不易进行基因操作和筛选，而生殖细胞已高度分化，不能在体外扩增培养。我国科学家建立了小鼠哺乳动物单倍体胚胎干细胞群，为基因操作找到了新的动物模型。过程如图所示，请据图回答：
（1）图中③过程通常采用的技术是_______________________________。 （2）单倍体胚胎干细胞取自囊胚的_____，在单倍体胚胎干细胞体外培养液中加入__________，就可以诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化，用于组织器官移植。 （3）在①过程中，科学家采用两种策略来获得小鼠的单倍体胚胎，一是将受精后获得的合子胚胎的雌原核去除，另一种方法是对去核的卵母细胞进行__________操作。 （4）④过程采用的技术手段是___________，由此可见，单倍体胚胎干细胞能够代替精子，使卵细胞成功“受精”。 （5）进行⑥过程时，需选择发育到__________阶段的胚胎进行移植，在移植前需要对受体动物进行同期发情处理，此过程依据的生理学基础是____________________。
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| 39. 难度：中等 | |
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将醋酸菌突变体中与耐酸有关的ALDH基因导入优良醋酸菌中，选育出高发酵速率、耐酸的醋酸菌，用于果醋生产。请分析回答下列问题： （1）对含有ALDH基因的DNA与质粒切割后，通过__________酶连接形成重组质粒。 （2）下图表示温度、乙醇浓度对该醋酸菌产酸量的影响。
①据图分析，研究不同酒精浓度下的最高产酸量时，最好把温度控制为__________℃。 ②酒精发酵后通过出料口检测酒精浓度，将发酵液中酒精浓度调节到_________左右才接种醋酸菌，较高的酒精浓度会使产酸量下降，不适宜接种，原因是_________。 ③在果酒酿造过程中如果果汁灭菌不严格含有醋酸菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌_________（填“能”或“不能”）将果汁中的糖发酵为醋酸，理由是_________。 （3）为获得耐酸的醋酸菌，可用稀释涂布平板法接种于__________的培养基进行筛选。此方法也可用来统计样品中活菌的数目，统计结果往往比实际数值_________（填“偏低”或“偏高”）。
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