| 1. 难度：简单 | |
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下列关于制备固体培养基时倒平板的叙述，正确的是（ ） A.倒好的培养基和培养皿要进行灭菌处理 B.应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 C.为防止微生物污染，要在酒精灯火焰旁进行操作 D.倒好培养基的培养皿，要立即将平板倒过来放置
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| 2. 难度：简单 | |
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以下操作用到接种环的是（ ） A.平板划线操作 B.系列稀释操作 C.涂布平板操作 D.倒平板操作
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| 3. 难度：中等 | |
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下列操作需要在火焰旁进行的一组是( ) ①土壤取样 ②称取土壤 ③稀释土壤溶液 ④涂布平板 ⑤微生物的培养 A. ①②③④⑤ B. ②③④⑤ C. ③④⑤ D. ②③④
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| 4. 难度：简单 | |
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用果胶酶处理果泥时，为了使果胶酶能够充分地催化反应，应采取的措施是（ ） A.加大苹果泥用量 B.加大果胶酶用量 C.提高反应温度到 100℃ D.用玻璃棒进行搅拌
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| 5. 难度：简单 | |
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下列关于果胶酶的叙述中，正确的是（ ） ①具有分泌功能的细胞都能产生 ②凡是活细胞都能产生果胶酶 ③果胶酶和果胶甲酯酶都可将果胶水解④黑曲霉、苹果青霉能产生果胶酶⑤加果胶酶的洗衣粉可除去衣服上的果汁、果酱等污垢⑥纤维素酶和果胶酶可用于去除植物细胞壁（ ） A.①②⑤⑥ B.②③④⑥ C.③④⑤⑥ D.①③④⑤
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| 6. 难度：简单 | |
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酶的固定化常用的方式不包括（ ） A.吸附 B.包埋 C.交联 D.将酶加工成固体
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| 7. 难度：简单 | |
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如图为某同学进行的澄清苹果汁生产实验，下列相关叙述正确的是（ ）
A.实验中所用的固定化果胶酶可由某些物质吸附，吸附后的酶可永久使用 B.为防止杂菌污染，图示装置制作完毕后需瞬间高温灭菌 C.通过控制阀调节苹果汁流出的速率，保证反应充分进行 D.固定化果胶酶不可重复使用，每次生产前需重新装填反应柱
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| 8. 难度：简单 | |
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在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，需要下列的条件是 ( ) ①消毒灭菌 ②一定浓度的植物激素 ③适宜的温度 ④充足的光照 ⑤充足的养料 A.①③④⑤ B.②③⑤ C.①②③ D.①②③⑤
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| 9. 难度：简单 | |
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下列关于果醋的制作，错误的是 A.果醋的制作需用醋酸菌，醋酸菌是一种好氧菌，所以在制作过程中需通氧气 B.醋酸菌是一种嗜温菌，温度要求较高，一般在50 ℃左右 C.醋酸菌能将果酒变成果醋 D.当氧气、糖源充足时，醋酸菌可将葡萄中的糖分解成醋酸
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| 10. 难度：简单 | |
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市场上果汁饮料、果酒、果醋越来越受到人们的青睐。下列有关说法正确的是（ ）
A.①和②过程都必须维持厌氧环境 B.①和②过程都靠细菌发酵来完成 C.生产苹果汁一般会添加枯草杆菌的果胶酶以提高果汁的出汁率和澄清度 D.为便于工业化使用，常使用固定化的果胶酶进行果汁澄清处理
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| 11. 难度：中等 | |
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某人利用乳酸菌制作泡菜因操作不当泡菜腐烂。下列原因中正确的是 ①罐口密闭缺氧，抑制了乳酸菌的生长繁殖 ②罐口封闭不严，氧气抑制了乳酸菌的生长繁殖 ③罐口封闭不严，氧气抑制了其他腐生菌的生长和繁殖 ④罐口封闭不严，促进了需氧腐生菌的生长和繁殖 A. ①③ B. ②④ C. ②③ D. ①④
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| 12. 难度：简单 | |
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测定泡菜中亚硝酸盐含量的操作中，用不到的试剂是（ ） A.对氨基苯磺酸溶液 B.N-1-萘基乙二胺溶液 C.氯化铵缓冲液 D.本尼迪特试剂
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| 13. 难度：简单 | |
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下列关于泡菜发酵过程的叙述，正确的是 A.发酵时间越长，亚硝酸盐的含量越高 B.发酵过程中只有乳酸菌的发酵作用 C.发酵过程中乳酸菌可以分解蛋白质和果胶 D.发酵过程中要经常补充水槽中的水
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| 14. 难度：简单 | |
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科学工作者把胡萝卜的韧皮部细胞分离出来，将单个细胞放入培养基中培养，获得了许多完整植株，这些植株的特点是( ) A. 彼此性状相似 B. 单倍体 C. 变异频率高 D. 都是纯合子
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| 15. 难度：简单 | |
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菊花茎的切段在发芽培养基培养的过程中，有关描述错误的是（ ） A.茎的切段不能带有叶片 B.要始终保持在无菌环境中培养 C.培养基中苄基腺嘌呤对萘乙酸的比例要较高 D.茎的切段经过脱分化和再分化可形成丛状苗
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| 16. 难度：简单 | |
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下列图形依次表示包埋法、吸附法、交联法、包埋法的一组是（ ）
A.①②③④ B.④③②① C.③①②④ D.④②③①
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| 17. 难度：简单 | |
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在实验过程中需对实验器具进行严格的消毒和灭菌，对以下器具的消毒需用到酒精的是（ ） A.接种环 B.培养皿 C.玻璃刮刀 D.G6 玻璃砂漏斗
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| 18. 难度：简单 | |
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在分离、纯化大肠杆菌实验中，划线接种（甲）、培养结果（乙）如下图。叙述错误的是
A.接种前应对培养基进行髙压蒸汽灭菌 B.连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落 C.接种过程中至少需要对接种环灼烧5次 D.甲中a区域为划线的起始位置
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| 19. 难度：简单 | |
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下列关于影响植物组织培养的因素的叙述错误的是（ ） A.幼嫩组织较成熟组织易培养成功 B.给离体幼茎消毒需要用到 5%次氯酸钠溶液 C.接种花药后一段时间内不需要光照，但幼小植株形成后需要光照 D.生长素与细胞分裂素含量之比较高时，有利于芽的分化
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| 20. 难度：简单 | |
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用带盖瓶子制作果酒时，每隔一段时间（一般为 12 小时左右）要对瓶盖进行一次操作。下列关于操作及其作用的正确组合是（ ） A.拧松，进入空气 B.打开，进入空气 C.拧松，放出 CO2 D.打开，放出 CO2
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| 21. 难度：中等 | |
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《人类基因治疗》报道，在美国佛罗里达大学基因治疗中心接受基因治疗的三名遗传性失明患者都重新获得了一定的视力，并且没有严重的副作用。基因治疗是指( ) A. 把健康外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的 B. 对有缺陷的细胞进行修复，从而使其恢复正常，达到治疗疾病的目的 C. 运用人工诱变方法，使有基因缺陷的细胞发生基因突变，从而恢复正常 D. 运用基因工程技术，把有缺陷的基因切除，达到治疗疾病的目的
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| 22. 难度：简单 | |
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下列关于 DNA 连接酶的作用叙述正确的是（ ） A.DNA 连接酶的基本组成单位是脱氧核苷酸 B.将单个脱氧核苷酸加到 DNA 片段的骨架上连接起来，重新形成磷酸二酯键 C.连接 DNA 链上碱基之间的氢键 D.将断开的两个 DNA 片段的骨架连接起来，重新形成磷酸二酯键
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| 23. 难度：简单 | |
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高粱的基因组中存在序列已知的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因（Ppc基因），利用基因工程技术将此基因转入水稻体内，使水稻能在高光强、高温和低CO2浓度的条件下，对 CO2的利用能力大大提高，从而提高水稻的光合效率。下列说法错误的是（ ） A.此技术得以成功的原因之一是遗传信息在不同生物体内传递和表达方式相同 B.获取Ppc基因的方法是先建立基因文库，再用限制性核酸内切酶从文库中切取 C.此技术若与单倍体育种技术相结合，可以快速获得纯合子，缩短育种周期 D.可通过测定转基因植株与对照植株同化二氧化碳的速率来判断转基因是否成功
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| 24. 难度：简单 | |
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下列关于基因工程技术应用的叙述中，错误的是（ ） A.基因工程技术可定向改良农作物的某些品质 B.利用细菌代谢旺盛的特点生产基因工程药物 C.运用基因工程技术让牛合成并分泌人类抗体 D.噬菌体作为载体可以将重组 DNA 导入动物细胞获得转基因动物
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| 25. 难度：简单 | |
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下列关于基因工程操作工具-载体的叙述中，错误的是（ ） A.质粒作为常见的载体，不仅存在于细菌中，某些病毒也具有 B.作为基因工程的载体，标记基因不可或缺 C.目的基因插入载体时，有特定的插入位点 D.构建重组 DNA 分子时需 DNA 连接酶和限制性核酸内切酶等
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| 26. 难度：简单 | |
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基因工程是在 DNA 分子水平上进行设计操作的，在基因操作的基本步骤中，不进行碱基互补配对的是（ ） A.目的基因与载体的结合 B.将目的基因导入受体细胞 C.目的基因的表达 D.目的基因的人工合成
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| 27. 难度：简单 | |
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下面是 5 种限制酶所识别的 DNA 分子序列和剪切位点图（↓表示剪切点、切出的断面为粘性末端或平末端）： 限制酶 1：——↓GATC—— 限制酶 2：——CATG↓——； 限制酶 3：——G↓GATCC—— 限制酶 4：——CCC↓GGG—— 限制酶 5：——AG↓CT—— 通过对上述内容的分析，下列有关说法错误的是（ ） A.不同的限制酶可以切出相同的粘性末端 B.限制酶 1 可以识别并剪切限制酶 3 所识别的 DNA 序列 C.限制酶 3、4 识别的序列都是由 6 个脱氧核苷酸组成 D.DNA 连接酶可拼接由限制酶 4 和 5 切出的 DNA 片段，也可拼接由限制酶 1 和 2 切出的 DNA 片段
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| 28. 难度：中等 | |
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土壤农杆菌含有一个大型的Ti质粒，在侵染植物细胞的过程中，其中的T-DNA片段转入植物的基因组。若想用基因工程手段获取抗旱植株，以下分析不合理的是 A.若用Ti质粒作为抗旱基因的载体，目的基因的插入位置应该在T-DNA片段内，且要保证复制起始点和用于转移T-DNA的基因片段不被破坏 B.将重组Ti质粒导入土壤农杆菌中时，可以用钙离子处理细菌 C.用含有重组Ti质粒的土壤农杆菌感染植物细胞后，可通过植物组织培养技术得到具有抗旱基因的植物 D.若能在植物细胞中检测到抗旱基因，则说明该基因工程项目获得成功
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| 29. 难度：简单 | |
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下图表示一项重要生物技术的关键步骤，X 是获得外源基因并能够表达的细胞。下列有关说法正确的是（ ）
A.该细菌的性状被定向改造，形成能合成胰岛素的细胞 B.质粒一般具有多个标记基因和多个限制酶切点 C.若要获得未知序列的胰岛素原基因，可到基因库中寻找 D.要获得相同的粘性未端，必须用相同的限制性核酸内切酶剪切
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| 30. 难度：中等 | |
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下列属于组织培养的是（ ） A.花粉培养成单倍体植株 B.芽发育成枝条 C.根尖分生区发育成成熟区 D.受精卵发育成植株
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| 31. 难度：中等 | |
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在生物体内，细胞不表现出全能性，这是因为 （ ） A. 细胞丧失了全能性 B. 基因选择性表达 C. 不同的细胞内基因不完全相同 D. 在个体发育的不同时期，细胞内的基因发生了变化
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| 32. 难度：简单 | |
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如图为植物组织培养过程，有关说法不正确的是( )
A.②试管中细胞全能性最高 B.④试管中培育出的个体都是纯合体 C.①→②的过程不需要光照 D.①→④的细胞分裂都是有丝分裂
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| 33. 难度：简单 | |
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下列有关细胞全能性的叙述中，不正确的是( ) A.受精卵在自然条件下能使后代细胞形成完整个体，因此全能性最高 B.生物体内，细胞由于分化全能性不能表达 C.卵细胞与受精卵一样，细胞未分化全能性很高 D.植物细胞离体培养，在一定营养条件下能表现出全能性
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| 34. 难度：简单 | |
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对于植物细胞工程的操作过程，下列表示方法错误的是（ ） A. B. C. D.
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| 35. 难度：中等 | |
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某组织培养实验室的愈伤组织被真菌严重污染，为查找污染原因设计了4个实验，实验条件除图示外其他均相同。下列各图表示实验结果，据图可得出的初步结论是( )
A.污染主要是培养基灭菌时间短造成的 B.污染主要来源于组织培养所用的离体组织 C.调节培养基pH能解决污染问题 D.调节培养温度能解决污染问题
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| 36. 难度：中等 | |
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回答下列有关分离土壤中以尿素为氮源的微生物的实验： （1）取 1 g 土样后用_______________逐步稀释，得到不同浓度的稀释液，取样时尽量只取 _________________ 。 （2）尿素溶液用______________________ （填工具）进行灭菌，下列关于该灭菌操作的叙述错误的是（______） A．固定化酶的灭菌可使用该法 B．该工具灭菌后需用盐酸抽滤后直接干燥保存 C．其他培养基成分应用高压蒸汽灭菌法灭菌 D．菌液稀释、接种等均应在酒精灯火焰旁操作 （3）在合适的稀释倍数下，培养基中的红色透明圈直径大小不一，说明不同菌落的微生物可能是同一种菌的不同 ______________ ，这种用于筛选高表达量微生物的方法称为____________。 （4）若在 10-5 浓度下培养皿的平均菌落数为 13，则该 1g 土样中含分解尿素微生物的数量约为__________个。
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| 37. 难度：困难 | |
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回答与泡菜腌制和亚硝酸盐测定有关的问题。 （1）制作泡菜时，为缩短发酵周期，腌制前可加入乳酸菌。取少量酸奶，用无菌蒸馏水稀释后，再用____________蘸取少量的稀释液，在MRS乳酸菌专用培养基的平板上划线，以获得乳酸菌单菌落。下图所示的划线分离操作，正确的是_____________。
（2）泡菜腌制过程中，会产生有机酸、醇类和亚硝酸盐，其中醇类是由___________进行厌氧呼吸产生。亚硝酸盐对人体有害，为测定泡菜中亚硝酸盐含量，从泡菜中提取亚硝酸盐，与____________发生重氮化反应，再与N-l-萘基乙二胺偶联，形成紫红色产物。然后用光程为1cm的___________，在550nm光波下测定光密度值，与由已知浓度梯度亚硝酸钠制作的__________比对，计算样品中亚硝酸盐的含量。 （3）已知乳酸菌中的亚硝酸还原酶能降解亚硝酸盐。在一定的腌制时间内，随着腌制时间的延长，泡菜中亚硝酸盐含量逐渐降低，是由于在厌氧和___________环境下亚硝酸盐被亚硝酸还原酶降解。
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| 38. 难度：中等 | |
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回答下列有关问题： （1）酶是生物体中生化反应的催化剂，在工业生产和食品加工中的应用日益广泛。为提高酶的利用率以及提高产品的纯度，一般需要对酶进行固定化处理，即将酶用物理或化学方法固定在_____的介质上，具 体方法有吸附法、共价偶联法、_____法和___________法。 （2）如图为装有固定化酶 a 的实验装置。其中 b 是反应柱，c 是催化底物。
①若装置中的固定化酶为 a-淀粉酶，则通常是利用______________法进行固定，介质一般为石英砂。利用该装置进行淀粉水解实验时，在漏斗中加入反应液后的操作是_________以保证反应充分。对流出的液体 用________检测，若呈现______________ 色反应，说明淀粉被水解成糊精。 ②若 a 是固定化酵母，要想得到较多的乙醇，加入反应液后的操作是_____________。
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| 39. 难度：中等 | |
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（一）图（a）中的三个 DNA 片段上依次表示出了 EcoRI、BamHI 和 Sau3AI 三种限制性内切酶的识别序列与切割位点，图（b）为某种表达载体的示意图（载体上的 EcoRI、Sau3AI 的切点是唯一的）
根据基因工程的有关知识，回答下列问题： （1）经 BamHI 酶切后得到的目的基因可以与上述表达载体被 _______________酶切后的产物连接。 （2）若某人利用图（b）所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组质粒，如图（c）所示。这三种重组质粒中，不能在宿主细胞中表达目的基因产物的有_______________。不能表达的原因是___________。
（3） DNA 连接酶是将两个 DNA 片段连接起来的酶，它作用对象是 ________键。 （二）丝素蛋白是家蚕的一种分泌性复合蛋白，由丝素蛋白重链（FibH）、丝素蛋白轻链（Fibl）和 P25 糖蛋白组成。将 Fibl 基因导入大肠杆菌（不含质粒 A）并实现表达的过程如图所示。
①构建重组质粒时要用到的工具酶是________________。 ②接种在含氨苄青霉素培养基上的大肠杆菌，有的不能形成菌落，原因是____________。 ③影印接种就是用丝绒做成与平板大小相近的印章，然后把长有菌落的母平板倒置在丝绒印章上，轻 轻印一下，再把此印章在新的培养基平板上轻轻印一下。经培养后，比较新平板上长出的菌落与母平板上的菌落位置，推测可能导入了重组质粒的菌落是 ____________（用字母表示）。 ④目的基因成功表达的标志是_______________。
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