| 1. 难度：简单 | |
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下列有关人体内环境和稳态调节的叙述，正确的是（ ） A.内环境稳态遭到破坏必将引起细胞代谢紊乱 B.免疫系统的作用与机体维持内环境稳态无关 C.食物过咸时,垂体合成的抗利尿激素会增加 D.大量出汗后只补充水，血浆渗透压会升高
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| 2. 难度：简单 | |
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下列关于胰岛素和胰高血糖素的叙述，正确的是（ ） A.胰岛素由胰岛A 细胞分泌，胰高血糖素由胰岛B 细胞分泌 B.胰岛素能促进组织细胞加速摄取，利用和储存葡萄糖，从而使血糖水平降低 C.胰高血糖素能促进肝糖原和肌糖原分解，从而使血糖水平升高 D.大量口服胰岛素，可使血糖快速降低而使机体表现出休克症状
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| 3. 难度：简单 | |
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小明为了证明肾上腺素和胰高血糖素均有升高血糖浓度的作用，选取若干只生理状态相同的健康小白鼠（血糖浓度均为 0．9g/L）平均分为三组，编号A、B、C，分别同时注射少量且等量的肾上腺素，胰高血糖素和生理盐水，实验结果如图所示，据图分析正确的是（ ）
A.仅进行A、B 组实验即可证明肾上腺素和胰高血糖素存在升高血糖的作用 B.肾上腺素和胰高血糖素在调节血糖浓度过程中具有协同作用 C.实验过程中，肾上腺素升高血糖效果比胰高血糖素明显 D.血糖浓度的相对稳定由肾上腺素和胰高血糖共同维持
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| 4. 难度：简单 | |
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如图表示人体缩手反射的相关结构(虚线内表示脊髓的部分结构)，有关说法错误的是
A.要检测反射弧是否完整和正常，可在⑤处给予适宜的电刺激 B.若抑制某神经元的呼吸作用，将会影响神经兴奋的传递 C.兴奋在神经元之间传递时，都存在化学信号与电信号的转换 D.在②处给予适宜的电刺激，大脑皮层会产生痛觉
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| 5. 难度：中等 | |
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下列关于神经调节和体液调节的说法，错误的是 A. 神经调节迅速准确，体液调节较为缓慢 B. 人体能通过反射对一个病原体做出反应 C. 人体产生的激素不可以直接消灭病原体 D. 神经调节和体液调节的结构基础不相同
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| 6. 难度：中等 | |
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下图为某反射弧的部分结构示意图，d 处为组织液，若刺激神经元甲，则在神经元丙上可检测到动作电位且肌肉收缩。据图判断下列叙述正确的是（ ）
A.图示结构中可见 2 个突触和 3 个突触小体 B.给予b 处适宜刺激，电表指针只发生一次偏转 C.刺激c 处，可验证兴奋在神经纤维上的传导方向 D.兴奋由 d→e，发生“电信号→化学信号→电信号”的转化
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| 7. 难度：中等 | |
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下图所示为甲状腺激素的调节示意图，其中 TRH 表示促甲状腺激素释放激素、TSH 表示促甲状腺激素、T3和 T4表示甲状腺激素，下列相关叙述错误的是（ ）
A.垂体释放TSH方面，TRH与 T3和T4之间具有拮抗关系 B.甲状腺激素的分泌过程既存在分级调节也有反馈调节 C.在反馈调节的作用下，图中各种激素的含量保持相对稳定 D.不同激素的靶细胞存在差异的根本原因是各种靶细胞内的基因不同
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| 8. 难度：中等 | |
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下列关于人体及动物生命活动调节的叙述，正确的是 A. 跳水运动员作出复杂的动作，只是通过神经调节完成的 B. 神经系统的某些细胞也能分泌激素 C. 激素只能运输到特定的靶细胞、靶器官 D. 人体自身的组织和细胞不可能成为抗原
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| 9. 难度：中等 | |
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在植物生长旺季，一枝条上有顶芽a和侧芽b（如图1所示）。已知芽对不同浓度生长素的不同反应如图2所示，则图3中表示a、b两芽生长素浓度变化的曲线是
A.②① B.③① C.②③ D.③④
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| 10. 难度：简单 | |
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下列关于种群和群落的叙述，错误的是（ ） A.种群是生物进化的基本单位，也是群落的组成单位 B.性别比例在一定程度上会影响种群的出生率和死亡率 C.影响群落中动物垂直结构的主要因素是食物和栖息场所 D.即使无人为的破坏，有些群落也不可能演替到森林阶段
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| 11. 难度：中等 | |
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如图表示将绵羊引入某个岛屿后的数量变化情况， 对此叙述正确的是（ ）
A.绵羊种群数量增长到一定程度，就保持恒定不变 B.绵羊数量达到K/2 时（即第 30 年时），绵羊的出生率最大，增长速率也最大 C.50 年后该绵羊种群数量在K 值附近波动是由出生率和死亡率变动所致 D.绵羊数量达到K值时，种群的年龄组成为衰退型
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| 12. 难度：困难 | |
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图为一食物网。若要使丙体重增加x，已知其食用的动物性食物(乙)所占比例为a，则至少需要的生产者（甲)的量为y，那么x与y的关系可表示为
A.y=90ax+10x B.y=25ax+5x C.y= 20ax+5x D.y=10ax+10x
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| 13. 难度：中等 | |
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有关生态学的基本原理在实际生产中应用的叙述错误的是 （ ） A．捕鱼时尽量捕食成熟的鱼，有利于鱼类资源的持续利用 B．用性引诱剂诱捕害虫，能影响害虫的性别比例从而降低出生率 C．稻田里的水稻呈高低错落分布，使群落呈垂直结构，提高了光能利用率 D．农田除草能调整能量流动的方向，使能量更多流向对人类有益的部分
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| 14. 难度：简单 | |
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果酒是以新鲜水果的果汁为原料，经全部或部分发酵配制而成的。在果酒的基础上继续发酵可得到果醋。下列有关果酒和果醋制作的叙述中，正确的是（ ） A.果酒和果醋的制作都是由酵母菌完成的 B.在果酒制作过程中要定期拧松瓶盖排放CO2 C.传统的葡萄酒制作一定需要人工接种菌种 D.葡萄汁装入发酵瓶中，要将瓶装满
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| 15. 难度：中等 | |
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如图表示果酒和果醋制作过程中的物质变化过程，下列叙述正确的是
A.过程①和②都只能发生在缺氧条件下 B.过程①和③都只发生在酵母细胞的线粒体中 C.过程③和④都需要氧气的参与 D.过程①~④所需的最适温度基本相同
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| 16. 难度：简单 | |
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用酵母菌酿制葡萄酒时一般酒中所含的酒精成分不超过14％，其原因是（ ） A．是加水过多造成的 B．原料中用于发酵的糖太少 C．一定浓度的酒精影响酵母菌的存活 D．发酵过程产热多，高温使酵母菌死亡
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| 17. 难度：中等 | |
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下列关于泡菜制作的叙述，错误的是（ ） A.泡菜制作过程中，乳酸发酵的过程即乳酸菌进行无氧呼吸的过程 B.发酵过程中乳酸菌可将葡萄糖分解成乳酸 C.腌制过程中乳酸菌含量会逐渐增多并达到最高峰，然后下降 D.制作泡菜的过程中亚硝酸盐的含量变化规律是先减小后增加
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| 18. 难度：中等 | |
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下列关于“腐乳的制作”实验，叙述正确的是 A. 控制发酵温度的主要目的是腐乳调味 B. 腐乳制作后期加入香辛料和料酒有防腐作用 C. 毛霉的主要作用是分解脂肪和淀粉 D. 成品腐乳表面的粘性物质主要由细菌产生
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| 19. 难度：中等 | |
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总状毛霉和米根霉是常见的霉菌。研究人员将总状毛霉和米根霉的孢子悬液分别接种到两组豆腐切块上，完成前期发酵后，分别测定两组霉菌产生的蛋白酶的活力，结果如下图。据图分析，下列有关叙述正确的是
A.总状毛霉与米根霉都能利用蛋白酶将分解产生的肽和氨基酸分泌到细胞外 B.总状毛霉与米根霉接种量与蛋白酶活力呈正相关 C.相同适宜条件下接种等量的两种菌，总状毛霉使豆腐块中的蛋白质减少更多 D.接种量为5CFU/mL时发酵制作的腐乳品质最好
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| 20. 难度：简单 | |
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下列有关实验的操作中，错误的是（ ） ①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢 ②接种操作要在酒精灯火焰附近进行 ③植物组织培养过程中，接种的外植体要进行消毒 ④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌 ⑤培养基要进行高压蒸气灭菌 ⑥加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌 ⑦接种环应采用火焰灼烧的方式灭菌 A.①③ B.②④ C.⑤⑦ D.④⑥
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| 21. 难度：简单 | |
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下列有关微生物培养的叙述正确的是 A.通常使用液体培养基分离获得细菌单菌落 B.若培养基需要调节pH，应该在灭菌后进行 C.用显微镜直接计数固体培养基中微生物数量 D.倒置平板可防止培养基被滴落的冷凝水污染
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| 22. 难度：简单 | |
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下列有关倒平板的操作叙述，错误的是（ ） A.不能将培养基溅到培养皿壁上 B.将打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰 C.将培养皿打开，培养皿盖放在桌子上 D.感觉锥形瓶的温度刚刚不烫手时倒平板
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| 23. 难度：简单 | |
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下面是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1、2、3、4、5。下列叙述正确的是（ ）
A.在五个区域中划线前后都要对接种环和培养基进行灭菌 B.划线操作时完全打开皿盖，划完立即盖上 C.接种时不能划破培养基，否则难以达到分离单菌落的目的 D.第1区和第5区的划线最终要连接起来，以便比较前后的菌落数
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| 24. 难度：中等 | |
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图中甲是稀释涂布平板法中的部分操作，乙是平板划线法操作结果。下列叙述中，错误的是（ ）
A.甲图中的涂布前要将涂布器灼烧，冷却后才能取菌液 B.稀释涂布平板法可用于微生物数量测定 C.乙中培养皿中所得的菌落都符合要求 D.乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端
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| 25. 难度：中等 | |
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细菌需要从外界吸收营养物质并通过代谢来维持正常的生长和繁殖。下列与此有关的说法正确的是（ ） A.乳酸菌与硝化细菌所利用的碳源物质是相同的 B.无机氮源不可能作为细菌的能源物质 C.琼脂是细菌生长和繁殖中不可缺少的一种物质 D.以纤维素为唯一碳源的培养基上长出的不都是能分解纤维素的微生物
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| 26. 难度：中等 | |
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下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，正确的是（ ） A.只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素 B.筛选分解尿素的细菌时，应以尿素作为培养基中唯一的营养物质 C.统计菌落数应注意选择菌落数在 30-100 的平板进行计数 D.以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂，若指示剂变蓝，则表明筛选到了分解尿素的细菌
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| 27. 难度：中等 | |
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加工橘子罐头，采用酸碱处理脱去中果皮(橘络)，会产生严重污染。目前使用酶解法去除橘络，可减少污染。下列生长在特定环境中的4类微生物，不能大量产生所用酶的有( ) A. 生长在麦麸上的黑曲霉 B. 生长在酸奶中的乳酸菌 C. 生长在棉籽壳上的平菇 D. 生长在木屑上的木霉
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| 28. 难度：简单 | |
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有人设计实验探究加酶洗衣粉是否能提高去污力并优于普通洗衣粉。实验分成两组，一组衣物用加酶洗衣粉洗涤，另一组衣物用普通洗衣粉洗涤。该实验设计缺少 A. 用加酶洗衣粉洗涤和适量普通洗衣粉洗涤的对照 B. 既不用加酶洗衣粉洗涤也不用普通洗衣粉洗涤的对照 C. 用普通洗衣粉洗涤和少量加酶洗衣粉洗涤的对照 D. 用少量普通洗衣粉洗涤和大量加酶洗衣粉洗涤的对照
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| 29. 难度：简单 | |
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下列关于加酶洗衣粉的叙述，正确的是（ ） A.洗衣粉中添加的酶通常是由微生物发酵生产而来 B.洗衣粉中的蛋白酶通常会将添加的其他酶迅速分解 C.在50℃热水中用加酶洗衣粉洗衣时，其中的酶会迅速失活 D.加酶洗衣粉受潮后重新晾干保存，不会影响其中酶的活性
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| 30. 难度：中等 | |
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下列有关固定化酶和细胞的叙述中，正确的是（ ） A.固定化酶适合采用包埋法，因为酶分子较小 B.用固定化细胞进行酒精发酵时，不受温度的影响 C.采用包埋法固定化细胞相当于固定了一系列酶 D.生产高果糖浆时所固定的葡萄糖异构酶可以无休止重复利用下去
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| 31. 难度：中等 | |
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如图 1 表示制备固定化酵母细胞的有关操作，图 2 是利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图，下列叙述错误的是（ ）
A.注射器出口应与液面保持适宜距离以保证凝胶珠成为球状 B.包埋酵母细胞的凝胶住为白色透明状，并具有一定的弹性 C.图 1 中制备的凝胶珠用蒸馏水洗涤后再转移到图 2 装置中 D.图 2 发酵过程中搅拌的目的是使培养液与酵母细胞充分接触
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| 32. 难度：中等 | |
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下图表示限制酶切割某DNA的过程，从图中可知，该限制酶能识别的碱基序列及切点是（ ）
A. CTTAAG，切点在C和T之间 B. CTTAAG，切点在G和A之间 C. GAATTC，切点在G和A之间 D. CTTAAC，切点在C和T之间
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| 33. 难度：简单 | |
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限制酶可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸序列．如图为四种限制酶BamHⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ及BglⅡ的辨识序列及每一种限制酶的特定切割部位．其中切割出来的DNA片段末端可以互补结合的两种限制酶是（ ）
A.BamHⅠ和EcoRⅠ B.BamHⅠ和HindⅢ C.BamHⅠ和BglⅡ D.EcoRⅠ和HindⅢ
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| 34. 难度：简单 | |
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如图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是( )
A.①②③④ B.①②④③ C.①④②③ D.①④③②
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| 35. 难度：简单 | |
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质粒是细菌中的有机分子，下列对其描述，正确的是 A. 质粒完全水解后最多可产生4种化合物 B. 质粒能够自主复制 C. 质粒中含有两个游离的磷酸基团 D. 质粒是基因工程的工具酶
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| 36. 难度：中等 | |
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用限制酶EcoRⅤ单独切割某普通质粒，可产生14kb(1kb即1000个碱基对)的长链，而同时用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ联合切割该质粒，可得到三种长度的DNA片段，见下图(其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一个黏性末端)。
若用MboⅠ限制酶单独切割该普通质粒，则产生的DNA片段的长度为( ) A. 2.5和5.5 B. 2.5和6 C. 5.5和8 D. 6和8
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| 37. 难度：中等 | |
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用XhoI和SalI两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是（ ）
A.如图中两种酶识别的核苷酸序列不同 B.如图中酶切产物可用于构建重组DNA C.泳道①中是用SalI处理得到的酶切产物 D.图中被酶切的DNA片段是单链DNA
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| 38. 难度：中等 | |
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如图是利用基因工程技术培育转基因植物生产可食用疫苗的部分过程示意图，其中 PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。下列说法错误的是（ ）
A.图示过程是基因工程的核心步骤 B.表达载体构建时需要用到限制酶 SmaⅠ C.抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞筛选出来 D.除图示组成外，表达载体中还应该含有启动子和终止子等结构
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| 39. 难度：中等 | |
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下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是（ ） A.表达载体应含有目的基因、启动子、终止子和标记基因等结构 B.表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原点 C.启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用 D.表达载体中的胰岛素基因可以通过人肝细胞mRNA反转录获得
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| 40. 难度：中等 | |
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下图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是
A.②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与 B.③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上 C.④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状 D.⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异
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| 41. 难度：中等 | |
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利用基因工程技术生产羧酸酯酶(CarE)制剂的流程如下图所示，下列叙述正确的是（ ）
A. 过程①需使用原料是四种核糖核苷酸 B. 过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因 C. 过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备 D. 过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞
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| 42. 难度：简单 | |
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基因疫苗由病毒核酸的一段无毒序列制成，由编码能引起保护性免疫反应的病原体抗 原的基因片段和载体构建而成。以下叙述错误的是（ ） A.表达载体被导入细胞，与宿主染色体整合后才能稳定遗传 B.接种基因疫苗后若感染此病原微生物，则体内记忆细胞会产生大量抗体 C.基因疫苗引起免疫反应前必须经过转录和翻译的过程 D.将疫苗基因转移到植物细胞中，可以生产可食用的疫苗
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| 43. 难度：简单 | |
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2018年1月30日，加拿大食品检验局批准了第三种耐褐变转基因苹果品种上市。研究人员通过RNA沉默技术，特异性降低苹果细胞内多酚氧化酶基因的表达水平，使苹果被切开后即使长时间暴露在空气中也不会被氧化褐变。如图是此过程原理示意图，下列有关的叙述错误的是
A. 细胞内多酚氧化酶基因的表达包括图示中的①②过程 B. 将目的基因成功导入苹果细胞中需限制酶、DNA连接酶和RNA聚合酶 C. “RNA沉默”的含义是mRNA不能翻译产生多酚氧化酶 D. 目的基因的表达序列与多酚氧化酶基因的表达序列互补，且要同时在同一细胞内表达
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| 44. 难度：中等 | |||||||||||||
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在DNA粗提取与鉴定实验中，将获得的含有DNA的粘稠物分别按下表处理3次，则DNA主要集中在标号( )
A.①③⑤ B.②③⑤ C.①④⑥ D.②④⑥
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| 45. 难度：中等 | ||||||||||||||||
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下表有关“DNA粗提取和鉴定”的相关操作中所选取的试剂，错误的是
A.A B.B C.C D.D
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| 46. 难度：中等 | |
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下列关于制作果酒、果醋和腐乳的叙述，合理的是（ ） A.在果酒发酵后期拧开瓶盖的间隔时间可延长 B.条件适宜时醋酸菌可将葡萄汁中的糖分解成醋酸 C.果酒发酵过程中发酵液密度会逐渐减小 D.将长满毛霉的豆腐装瓶腌制时，底层和近瓶口处需加大用盐量
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| 47. 难度：中等 | |
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下列关于酶制剂和固定化酵母细胞的叙述，错误的是（ ） A.从酶的固定方式看，吸附法比交联法对酶活性影响大 B.可用海藻酸钠包埋消化酶制成多酶片用于缓解消化不良症状 C.将海藻酸钠凝胶珠用无菌水冲洗，主要目的是防止杂菌污染 D.探究不同加酶洗衣粉洗涤效果实验中，水温和浸泡时间都属于无关变量
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| 48. 难度：中等 | |
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下列关于基因工程技术的叙述,错误的是 A.切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6 个核苷酸序列 B.PCR 反应中温度的周期性改变是为了 DNA 聚合酶催化不同的反应 C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因 D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达
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| 49. 难度：中等 | |
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2019 年 12 月以来，新型冠状病毒导致的肺炎在世界范围爆发。人感染了冠状病毒后常见体征有呼吸道症状、发热、咳嗽、气促和呼吸困难等。在较严重病例中，感染可导致肺炎、严重急性呼吸综合征、肾衰竭，甚至死亡。目前对于新型冠状病毒所致疾病没有特异治疗方法。经科学工作者研究，发现了数种快速检验新冠肺病原体的方法，以正确诊断。下列与新型冠状病毒的研究、诊断有关的说法中正确的是（ ） A.镜检法：在光学显微镜下直接观察病人的痰液或血液，以发现病原体 B.PCR 技术：体外基因复制技术，可在几十分钟内把病原体的基因扩增到数百万倍 C.抗原－抗体法：用特殊制备的病原体蛋白质与病人血清中的相关抗体特异性结合， 确认病人是否感染过病原体 D.DNA 探针技术：用放射性同位素、荧光因子等标记的 DNA 分子做探针，利用 DNA分子杂交原理来检测病原体
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| 50. 难度：简单 | |
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下列有关实验操作流程的叙述中，正确的是（ ） A.腐乳制作：豆腐长毛霉-加盐腌制-加卤汤装瓶-密封腌制 B.血球计数板的使用：盖盖玻片-滴培养液-等待沉降-镜检计数-刷洗 C.果酒果醋制作：挑选葡萄-冲洗-榨汁-果醋发酵-果醋-酒精发酵-果酒 D.基因工程：获取目的基因-构建表达载体-导入受体细胞-目的基因的检测与鉴定
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| 51. 难度：中等 | |
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图1为某同学设计的用于制作果酒和果醋的发酵装置。图2为某研究小组的同学在对杨梅酒和杨梅醋的生产工艺进行考察后，绘制出的基本工艺流程图。请据图回答：
（1）图示发酵过程中所需的酵母菌可以从自然界中分离出来，要得到较纯菌种，应配制____培养基(按培养基的功能分)，常采用____法对培养基进行灭菌。然后用平板划线法或稀释涂布平板法进行接种。 （2）用图1装置制作果酒过程中，要关闭____（“充气”或“排气”）管上的夹子。 （3）用图1装置制作果酒过程中，因某一步骤操作失误导致发酵瓶瓶塞被冲开，该操作失误是____。对该装置进行的改进是____。 （4）图2中甲罐顶上的排气管被设计成了弯曲状的管，其目的是____。发酵一定时间后，观察到发酵罐内液面不再有____产生，说明发酵基本完毕。 （5）在制备杨梅醋过程中，乙罐内先填充经灭菌处理的木材刨花，然后加入含____菌的培养液，使该菌附着在刨花上，再让甲罐中发酵完毕的杨梅酒流入乙罐进行杨梅醋发酵。
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| 52. 难度：中等 | |||||||||||||||||
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多氯联苯是一种对人体有很大危害的有机物质，污染土壤后，很难清除。研究发现，部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用。为消除这种污染，科研人员计划从被污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株。请回答问题： （1）筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品溶解稀释，接种到以_____为唯一碳源的培养基上。
（2）对初步提取到的菌株要进行_____培养，一般接种操作方法有两种，其中之一是下图所示的_____法。
（3）将酵母菌溶液分别稀释 10 倍、100 倍、1000 倍。每个浓度都接种三个平板，每个平板均用_________接入 0．1mL 稀释菌液，该接种方法是_____。培养时，需将培养皿_____培养，以防冷凝水造成污染。经适当培养后，平板上的菌落如上表所示：据此可得出，每升菌液中酵母菌活菌数为_____个。 （4）若要长期保存提纯得到的菌种，可以采用_____的方法。
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| 53. 难度：中等 | ||||||||||||||||||||||||||
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某科研小组采用 80℃水浴熔化海藻酸钠，固定黑曲霉孢子（含β-葡萄糖苷酶），并进行相关催化实验，请分析回答问题。 （1）此实验过程中采用 80℃水浴代替_____加热法熔化海藻酸钠，其优点是能准确控制温度，融化过程不会出现焦糊且融化时间短。熔化的海藻酸钠加入黑曲霉孢子悬浮液前一定要进行_____处理，海藻酸钠的最终质量分数需控制在 3%，原因是______________。 （2）实验过程中，初形成的凝胶珠放在_____溶液中静置 30min，目的是形成稳定的网状凝胶结构。 （3）β-葡萄糖苷酶能催化大豆苷水解为大豆苷元，pH 和温度对游离孢子和固定化凝胶珠中 β-葡萄糖苷酶活性影响的结果如图所示，由图可知：研究 pH 和温度对葡萄糖苷酶活性影响时，温度和 pH 应分别控制为_____、_________；与游离孢子相比，固定化凝胶珠中 β-葡萄糖苷酶的 pH 适宜范围会_________，热稳定性会 __________。
转化率=豆苷含量- 反应后大豆苷含量/反应前大豆苷含量×100
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| 54. 难度：困难 | |
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为研究肝癌致病机理，科研工作者利用下图所示的差异杂交法和基因工程获取相关癌基因以作进一步研究。请据图回答问题：
（1）图1中，A过程需要用__________酶，D过程需要回收__________（填“未杂交”或“杂交分子”）的含32P的cDNA单链，继而通过人工合成，获得__________， 并用其构建基因文库。 （2）从图1构建的基因文库中获取的目的基因，一般还需进行人工改造后才能用于基因表达载体的构建，改造内容除了在基因两端添加限制酶的识别序列外，还需添加__________，以便其随载体导入到受体细胞后，能正常调控表达过程。 （3）上图2为改造后的目的基因。图3为两种质粒，其中Ampr为氨苄青霉素抗性基因，Tetr为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因，其表达产物可使底物X-Gal呈蓝色。EcoRⅠ（0.7Kb）、NotⅠ（1.2Kb）等为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离（1kb=1000个碱基对）。 ①图3中能作为载体的最理想的质粒是__________（填“X”或“Y”），用选定的质粒与图2的目的基因构建基因表达载体时，应选用的限制酶是__________。为筛选出成功导入目的基因的受体细胞，培养基中应适量添加__________。 ②若用EcoRⅠ完全酶切上述①中获得的重组质粒，并进行电泳观察，可出现四种长度不同的片段，其长度分别为1.7kb、5.3kb、__________。
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| 55. 难度：困难 | |
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乙型脑炎和伪狂犬病是猪的两种常见传染病。下图是利用基因工程技术生产能同时预防这两种病疫苗的流程图，其中PrM为乙型脑炎的特异性抗原基因，PK、gG、gD为伪狂犬病的主要抗原基因，TK为伪狂犬病的毒性基因，pgG为启动子，BamHⅠ和EcoRⅠ为两种限制酶，其识别序列及切割位点分别是G↓GATCC、G↓AATTC。请回答下列问题：
（1）过程①所需的酶有 __________和_________。下列四种引物中适用于过程①的一对引物是________。 P1：5'TTGGATCCATGGAAGGCTCAATCATGTG3’ P2：5'CACAAGCTTAGATGACGTATCCAAGGAG3’ P3：5'TACGGTACCTTAGGGGTTAAGTGGG3’ P4：5’GCGAATTCTAACTGTAAGCCGGAGCG3’ （2）过程②所需的酶有___________。过程③中要用Ca2+处理大肠杆菌，其目的是___________。 （3）重组伪狂犬病毒中不带TK基因的优点是_______________。 （4）将获得的病毒疫苗注射到猪体内，一方面病毒中抗原基因在猪细胞中大量表达，诱导猪获得_______免疫；另一方面______________，使得病毒投苗具有用量小、作用更持久等优点。
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