| 1. 难度：中等 | |
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ch1L基因是蓝细菌拟核DNA上控制叶绿素合成的基因．为研究该基因对叶绿素合成的控制，需要构建该种生物缺失ch1L基因的变异株细胞．技术路线如图所示，对此描述错误的是
A.ch1L基因的基本组成单位是脱氧核苷酸 B.①②过程中使用的限制性核酸内切酶的作用是将DNA分子的磷酸二酯键打开 C.①②过程都要使用DNA聚合酶 D.若操作成功，可用含红霉素的培养基筛选出该变异株
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| 2. 难度：中等 | |
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关于现代生物技术相关知识的叙述，其中正确的是（ ） A. 动物细胞培养与植物组织培养均需使用胰蛋白酶处理 B. 将二倍体玉米花粉和二倍体水稻花粉进行细胞杂交获得的植株为二倍体，但不可育 C. 限制酶切割DNA分子,从DNA分子中部获取目的基因时,同时有两个磷酸二酯键被水解 D. 将目的基因整合到受体细胞的叶绿体基因组中能防止基因污染是因为叶绿体基因组不会进入到生殖细胞中
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| 3. 难度：简单 | |
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限制性核酸内切酶能识别特定的DNA序列并进行剪切,不同的限制性核酸内切酶可以对不同的核酸序列进行剪切。现用3种不同的限制性核酸内切酶对一个6.2 kb (千碱基对)大小的线状DNA进行剪切后,用凝胶电泳分离各核酸片段,实验结果见下表。 请问:3种不同的限制性核酸内切酶在此DNA片段上的切点位置是图中的（ ）
A. B. C. D.
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| 4. 难度：简单 | |
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下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是（ ） A.通过假阴道法、电刺激法等方法对精子进行获能处理 B.胚胎移植可充分发挥雌性优良个体的无性繁殖潜力 C.卵裂期细胞随分裂次数增加细胞的相对表面积而不断增大 D.培育试管婴儿涉及体内受精、早期胚胎培养和胚胎移植等
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| 5. 难度：中等 | |
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下列所示的黏性末端是由几种限制性内切酶作用产生的
A.1种 B.2种 C.3种 D.4种
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| 6. 难度：中等 | |
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利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。下列叙述错误的是（ ）
A.第四轮循环产物中PCR方法扩增出的目的基因片段只有8个 B.设计引物时需要避免引物之间形成碱基互补配对而造成引物自连 C.退火温度过高可能导致PCR反应得不到任何扩增产物 D.第四轮循环产物中同时含有引物A和引物B的DNA片段所占的比率为15/16
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| 7. 难度：中等 | |
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下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述,正确的是 ( ) A. 向菜花组织中加入蒸馏水并搅拌可释放核DNA B. 鉴定DNA时,应将丝状物直接加入到二苯胺试剂中进行沸水浴 C. 利用鸡血细胞提取DNA时,初步析出DNA的试剂是物质的量浓度为0.14 mol·L-1的NaCl溶液 D. 向鸡血细胞中加入冷却的体积分数为95%的酒精,可以获得无杂质的DNA
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| 8. 难度：中等 | |
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下图为某兴趣小组开展“DNA的粗提取与鉴定”实验过程中的一些操作示意图。下列有关叙述正确的是
A. 正确的操作顺序是C→B→E→D→A B. 步骤A中加入酒精是为了提高DNA的溶解度 C. 步骤C中加入蒸馏水的主要目的是让DNA不溶于水而析出 D. 步骤E中加入蒸馏水的量与DNA析出的量成正相关
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| 9. 难度：简单 | |
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下图为转基因抗冻番茄培育过程的示意图。（其中 ampr 为抗氨苄青霉素基因）下列叙述正确的是（ ）
A.可同时选用限制酶 PstI、Sma I 对含目的基因的 DNA 进行切割 B.过程②中，可直接将过程①得到的产物注入受体细胞 C.过程①可以作目的基因“分子运输车”的是天然质粒 D.过程④中，若利用探针在试管苗细胞内检测到目的基因，则转基因成功
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| 10. 难度：中等 | |
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绿叶海天牛（简称甲）吸食滨海无隔藻（简称乙）后，身体就逐渐变绿，这些“夺来”的叶绿体能够在甲体内长期稳定存在，有科学家推测其原因是在甲的染色体 DNA 上可能存在乙编码叶绿体部分蛋白的核基因。为证实上述推测，以这种变绿的甲为材料进行实验，方法和结果最能支持上述推测的是（ ） A.提取甲的全部DNA，通过 PCR 技术能克隆出乙的编码叶绿体蛋白的核基 因 B.通过核酸分子杂交技术，在甲体内检测到乙的编码叶绿体蛋白的核基因转录出的 RNA C.给甲提供 14CO2，一段时间后检测到其体内的部分有机物出现放射性 D.用乙编码叶绿体蛋白的核基因做探针与甲的染色体DNA 杂交，结果显示出杂交带
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| 11. 难度：中等 | |
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某小鼠生活过程中被多种病原体感染过，科学家以该小鼠为实验材料，利用单克隆抗体技术，获得了抗某种病原体的髙纯度单克隆抗体。下列有关叙述错误的是（ ） A. 被多种病原体感染过的小鼠体内会产生多种浆细胞 B. 经细胞融合后形成的单个杂交瘤细胞可分泌多种特异性抗体 C. 使用人鼠嵌合单克隆抗体进行疾病治疗可减少副作用的发生 D. 单克隆抗体的制备过程中应用了动物细胞培养和细胞融合技术
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| 12. 难度：中等 | |
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将菊花外植体接种到MS培养基中,可以培育出菊花试管苗。下列叙述正确的是 A. 配制MS培养基母液时,大量元素一般浓缩100倍 B. 培养基中添加蔗糖的目的是提供营养,同时调节渗透压 C. 培养基中生长素与细胞分裂素的比值低时,有利于根的形成 D. 长出丛芽和生根的过程中菊花组织细胞的遗传物质要发生改变
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| 13. 难度：简单 | |
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下列细胞，哪一个代表卵子已完成受精（ ） A.
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| 14. 难度：中等 | |
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有关哺乳动物精子和卵细胞发生过程的叙述，正确的是 A. 细胞内的其他物质浓缩为球体，叫做原生质滴，原生质滴中存在中心体 B. 线粒体鞘内包裹着线粒体，可以为精子尾部的运动提供能量 C. 刚排出的卵子还未成熟，其受精作用在子宫内完成 D. 受精卵中的遗传物质一半来自父方，一半来自母方
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| 15. 难度：中等 | |
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受精过程的顺序为 ①第一次卵裂开始 ②释放第二极体 ③顶体反应④穿越透明带 ⑤雌、雄原核的形成 ⑥核膜消失，雌雄原核融合 A.①②③④⑤⑥ B.③②④⑤⑥① C.④⑤②①③⑥ D.③④②⑤⑥①
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| 16. 难度：简单 | |
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下列对哺乳动物体内受精、早期胚胎发育过程和胚胎工程的叙述，正确的是（ ） A.注射到囊胚腔中的胚胎干细胞可以参与个体器官的发育 B.早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清、抗生素和激素等 C.为了获得更多的卵母细胞，需用雌激素对雌性动物进行处理 D.卵子释放顶体酶溶解放射冠和透明带，卵黄膜封闭作用是防止多精入卵的屏障之一
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| 17. 难度：中等 | |
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如图是胚胎发育过程中某阶段示意图，下列有关叙述错误的是（ ）
A.图中②将发育为胎膜和胎盘等结构 B.高等哺乳动物细胞分化开始于此时期的胚胎 C.图中③的下方细胞将来可发育成外胚层 D.胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化
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| 18. 难度：简单 | |
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下列关于泡菜的制作和亚硝酸盐含量的测定实验的叙述，正确的是 A. 将新鲜蔬菜与煮沸冷却的盐水(盐和清水的质量比为4∶1)混匀装瓶 B. 发酵过程中始终要保持密封状态，泡菜坛盖边缘的水槽中要始终装满水 C. 在酸性条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应形成玫瑰红色染料 D. 随着发酵进行，亚硝酸盐含量逐渐增加，用比色法可进行亚硝酸盐含量的测定
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| 19. 难度：简单 | |
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燕窝是中国人的传统保健品，近年来被传为珍稀滋补品的“血燕”更是价格高昂。但武汉曾在某次抽查时发现，主要产自马来西亚的 3 万余盏血燕亚硝酸盐最高超标 350 多倍。以下说法错误的是（） A.“血燕”中的亚硝酸盐在人体内主要以“过客”的形式随尿排出 B.检测“血燕”中亚硝酸盐的含量需将“血燕”制成样品处理液 C.“血燕”中的亚硝酸盐在人体内积累有致癌作用 D.一次误食亚硝酸盐 0.3~0.5g 就会引起中毒，但不会导致死亡
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| 20. 难度：中等 | |
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下图中甲是果醋发酵装置，乙是发酵过程中培养液pH变化曲线图，下列叙述正确的是
A. 发酵初期不通气，溶液中没有气泡产生 B. 中期可以闻到酒香，说明进行了酒精发酵 C. 后期接种醋酸菌，适当通气并保持原有温度 D. 图乙中能正确表示pH变化的曲线是③
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| 21. 难度：中等 | |
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下列关于生物学实验的叙述正确的是（ ） A.对于频繁使用的菌种，可采用甘油管藏法保藏 B.培养基中能够为微生物提供碳源的物质，一定也能作为能源 C.培养霉菌时需将培养基 pH调至酸性，培养细菌是需要将 pH调至中性或者微酸性 D.土壤中各种微生物的数量不同，因此分离不同的微生物要采用不同的稀释度
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| 22. 难度：简单 | |
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关于统计微生物数目，说法错误的是（ ） A.测定饮用水中大肠杆菌的数目还可以通过滤膜法来测定 B.霉菌和放线菌的培养温度一般相同都为 25-28 摄氏度，但培养时间一般不同 C.只有得到了 3 个或 3 个以上菌落数目在 30-300 的平板，才说明系列稀释操作成功 D.每次统计菌落数目，应选取菌落数目稳定时的记录作为结果
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| 23. 难度：简单 | |
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黑茶是以肉食为主的中国边疆游牧民族的主要饮品。在一系列微生物的作用下，黑茶会产生一种对人体非常有益的金黄色颗粒“金花”。研究人员对“金花”中的微生物进行了分离和鉴定，过程如图。下列说法不正确的是
A. 向“金花”样品中加入蒸馏水制成样品悬液 B. 可根据菌落特征对菌种进行初步鉴定 C. 涂布平板上长出的菌落可通过划线进一步纯化 D. 可通过基因组测序对菌种进行准确鉴定
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| 24. 难度：简单 | |
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下列有关“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数实验”的叙述，正确的是（ ） A.分解尿素的细菌能产生脲酶，将尿素分解产生氮气 B.将实验组和对照组平板倒置，25℃恒温培养 24～48 小时 C.统计活菌数的常用方法有稀释涂布平板法和显微镜直接计数法 D.用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂变红
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| 25. 难度：简单 | |||||||||||||||||||
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如表是微生物培养基的成分。下列有关说法错误的是（ ）
A.此培养基可用来培养自养型微生物 B.此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源 C.若除去①，此培养基可培养圆褐固氮菌 D.培养基中若加入蛋白胨，则它可充当碳源、氮源和维生素
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| 26. 难度：中等 | |
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在“DNA的粗提取与鉴定”实验中，将提取获得的含DNA的黏稠物（还含有较多杂质）分别处理如下： 第一，放入2mol/L的氯化钠溶液中，缓缓加入适量蒸馏水，搅拌后过滤，得到滤液A和黏稠物a； 第二，放入2mol/L的氯化钠溶液中，搅拌后过滤，得滤液B和黏稠物b； 第三，放入冷却的95%的酒精溶液中，搅拌后过滤，得滤液C和黏稠物c。 以上过程获得的滤液和黏稠物中，因含DNA少而可以丢弃的是 A.A、B、C B.a、b、C C.A、b、c D.A、b、C
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| 27. 难度：简单 | |
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细菌放在固体培养基上培养，它会繁殖并形成菌落。某实验小组想检验两种抗生素的杀菌作用， 下列实验方案最合适的是（ ） A. C.
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| 28. 难度：中等 | |
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如图为某生物工程操作流程模式图，下列说法正确的是（ ）
A.如果此图表示植物细胞融合的过程，用纤维素酶处理植物体细胞后得到A、B细胞方可进行细胞融合操作，得到的C就是所需的重组细胞 B.如果此图表示动物细胞融合过程，则可以直接使用仙台病毒对A和B进行促融，得到重组细胞C C.若此图为克隆羊多利的培育过程，则用到了细胞核移植、动物细胞培养、胚胎分割和胚胎移植等生物技术 D.若此图为抗虫棉的培育过程，则获得成功导入C（重组DNA）的受体细胞D需经植物组织培养后才能长成我们所需要的植株
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| 29. 难度：简单 | |
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生态系统内，即使某个物种由于某种原因死亡，也会很快有其他物种占据它原来的生态位置，从而避免系统结构或功能失衡。这体现了生态工程的（ ） A.物种多样性原理 B.协调与平衡原理 C.系统整体性原理 D.物质循环再生原理
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| 30. 难度：简单 | |
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如图表示培育转基因克隆羊和胚胎工程的部分操作流程，其中字母代表有关结构或个体，数字代表过程、方法。下列有关说法错误的是（ ）
A.图中过程 1-7 所涉及的生物技术有动物细胞培养、早期胚胎培养、胚胎移植、细胞核移植 B.4 过程需要借助显微注射法完成核移植，并将 d 置于发育培养液中继续培养 C.图中动物细胞培养过程中应将细胞置于 5％CO2的气体环境中，维持培养液的pH相对稳定 D.通常用去核的卵母细胞作为受体细胞的原因除了它体积大、易操作、营养物质丰富外，还因为它含有促进细胞核全能性表达的物质
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| 31. 难度：简单 | |
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在 PCR 扩增实验中，引物是很重要的。下列关于引物特点说法正确的是（ ） A.引物长度一般是 80～100 个碱基对（bp）为宜 B.引物是一小段 DNA 或 RNA C.DNA 聚合酶能从引物的 5′端开始延伸 DNA 链 D.引物能与 DNA 母链的一段碱基序列互补配对
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| 32. 难度：中等 | |
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下图是一种“生物导弹”的作用原理示意图，没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段时间后被机体清除。阿霉素是一种抗肿瘤药，可抑制DNA和RNA的合成，对正常细胞也有一定毒性。下列相关说法正确的是（ ）
A.单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的 B.活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程 C.在治疗中，应先注射非活化的磷酸酶，再注射生物导弹 D.单克隆抗体特异性强，能减轻阿霉素对正常细胞的伤害
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| 33. 难度：简单 | |
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下图为植物组织培养过程示意图，下列叙述错误的是（ ）
A.从理论上讲，①可以是植物体的每一个活细胞 B.②包裹上人工种皮即可获得人工种子 C.①→②的过程通过有丝分裂产生一团具有特定结构和功能的薄壁细胞组成的愈伤组织 D.②→③的再分化过程中，细胞增殖的方式为有丝分裂
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| 34. 难度：简单 | |
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下列说法不正确的有（ ） A.果酒发酵是否产生酒精，可以直接用重铬酸钾来检验 B.检验醋酸简单易行的方法是品尝或用 pH 试纸鉴定 C.果酒发酵和果醋发酵过程中培养液 pH 都会下降 D.榨汁前，榨汁机和发酵瓶都需要用质量分数为 70%的酒精消毒
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| 35. 难度：简单 | |
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在制备 MS 基本培养基的过程中，错误的是（ ） A.在使用提前配制的母液时，可直接用移液管从母液中取 B.配制母液时，无机物中微量元素浓缩 100 倍，激素类、维生素类可按照 1mg/ml 单独配制 C.配制培养基时，琼脂要及早加热溶化 D.MS 基本培养基的 pH 要求不太严格，可控制在 5～7 之间
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| 36. 难度：简单 | |
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利用下列细胞工程技术培养出的新个体中，只具有一个亲本遗传性状的是（ ） A.植物组织培养 B.细胞融合 C.动物胚胎移植 D.克隆技术
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| 37. 难度：中等 | |
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正常细胞中含有抑癌的 P53 基因，能表达抗病毒蛋白，帮助修复轻度变异的基因，也能使重复变异的细胞发生凋亡而避免肿瘤的发生；若它失活而不能表达，则基因突变的细胞易形成肿瘤。基因治疗肿瘤是根本的方法，腺病毒以其嗜好增殖细胞和对人体基本无害而成为良好的基因载体。野生型腺病毒含有抑制 P53 基因活性的 55Kda 基因，以及病毒复制基因 E1，因此需要重新构建有疗效的、安全的腺病毒。图甲、乙中箭头所指为相应限制酶切点。
（1）DNA 解旋酶直接作用于脱氧核苷酸之间的_____键（化学键）；限制酶直接作用于脱氧核苷酸之间的_____键（化学键）。 （2）构建重组腺病毒时，限制酶最好选择____，理由是：既可以去除_____基因以防止病毒复制后损伤健康细胞，同时还能破坏_____基因以防止其_____。 （3）在基因工程操作中，检测目的基因是否发挥功能的第一步是_____，检测方法是____技术，若出现杂交带，则表明成功。 （4）如果需将目的基因利用 PCR 技术扩增 10 次，则需要在缓冲液中至少加入____个引物。A．210B．210+2 C．211D．211-2 （5）PCR 扩增目的基因的前提是_____，以便根据这一序列合成引物。PCR 需提供_____， 引物，dNTP，DNA 模板。反应结束后，可以利用 DNA 的_____特点进行 DNA 含量的测定。
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| 38. 难度：中等 | |
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花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合，以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。
据图回答下列问题： （1）过程①所需的酶是_____。过程②后，在显微镜下观察融合的活细胞中有供体_____的存在，这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。 （2）下图是用该引物对双亲及再生植株 1—4 进行 PCR 扩增的结果。据图判断，再生植株 1—4 中一定是杂种植株的有_____。 （3）培育抗黑腐病杂种植株的技术称为_____，原理为_____。该技术中与 PEG 效果相同的诱导法还有_____（填两项）。 （4）植物组织培养技术基本操作的正确顺序是_____（填序号）。 ①外植体消毒 ②制备 MS 培养基 ③接种 ④培养 ⑤栽培 ⑥移载 A．①→②→③→④→⑤→⑥ B．②→①→③→④→⑤→⑥ C．②→①→③→④→⑥→⑤ D．①→②→③→④→⑥→⑤
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| 39. 难度：中等 | |
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下图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体 1 是良种荷斯坦高产奶牛，供体 2 是黄牛。据图回答下列问题：
（1）应用 1 为获得克隆牛的过程，从活体牛的卵巢中吸取的卵母细胞需要在体外培养到减数第二次分裂中期，并通过_________去除卵母细胞中的细胞核。核移植后，需要用物理或化学方法激活重组细胞，使其_____。 （2）应用 2 为获得试管牛的过程，在体外受精前，需要对采集的优良公牛的精子用_____和_____用化学药物诱导获能。判断卵子是否受精的标志_________。胚胎移植是胚胎工程的最后一道“工序”，胚胎移植的实质是_________。胚胎能够在受体内正常发育的生理基础是_____。 （3）应用 3 中的细胞 C 取自牛胎儿的_____。应用 4 在获得二分胚①和②的同时，需要取样囊胚的滋养层细胞做_____性别鉴定。 （4）胚胎干细胞在体外培养条件下，可维持_____状态，为了保证无菌无毒环境，通常需要在培养液中添加一定量的_____。
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| 40. 难度：简单 | |
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下图是利用山楂制作果酒果醋的流程：
回答下列问题： （1）果醋发酵主要利用醋酸菌的_____呼吸，图中果醋发酵的反应式是_____。 （2）酒精发酵前加入的白砂糖主要是为酵母菌提供_____。如图表示白砂糖的添加量对酒精生成量的影响，白砂糖的添加量为_____左右最为合理。
（3）醋酸发酵前，需要加入纯净水对山楂果酒进行稀释，原因是_____。 （4）将发酵好的山楂果醋在 80 ℃左右的温度下热处理 8～10 min，目的是_____，以及防止杂菌污染。
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