| 1. 难度：中等 | |
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牛奶、吸管、接种环、培养基、空气灭菌的方式依次是（ ） ①灼烧灭菌 ②巴氏消毒 ③干热灭菌 ④紫外线消毒 ⑤高压蒸汽灭菌 A. ②③①⑤④ B. ②⑤③③④ C. ②①③⑤④ D. ⑤①③⑤④
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| 2. 难度：中等 | |
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配制的培养基成分是：纤维素粉、NaNO3、Na2HPO4·7H2O、KH2PO4、MgSO4·7H2O、KCl、酵母膏、水解酪素，该培养基能使下面哪种微生物大量繁殖（ ） A. 酵母菌 B. 自生固氮菌 C. 各种细菌 D. 纤维素分解菌
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| 3. 难度：中等 | |
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在涂布平板操作时错误的是 A.将涂布器在酒精灯火焰上灼烧，直到烧红 B.取少量菌液滴加在培养基表面 C.将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃待酒精燃尽后，冷却8～10s再用 D.涂布时可转动培养皿，使涂布均匀
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| 4. 难度：简单 | |
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下列是关于“检测土壤中细菌总数”实验操作的叙述，其中错误的是 A. 用蒸馏水配制牛肉膏蛋白膝培养基，经高温、高压灭菌后倒平板 B. 取104、105、106倍的土壤稀释液和无菌水各0.1ml，分别涂布于各组平板上 C. 将实验组和对照组平板倒置，370C恒温培养24-48小时 D. 确定对照组无菌后，选择菌落数在300以上的实验组平板进行计数
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| 5. 难度：简单 | |
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某一种细菌的变异菌不需要从环境中摄取现成的亮氨酸就能生长，此菌株对链霉素敏感。要想筛选出该变异菌株，选用的培养基类型是 A. 不加亮氨酸，不加链霉素 B. 不加亮氨酸，加链霉素 C. 加亮氨酸，加链霉素 D. 加亮氨酸，不加链霉素
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| 6. 难度：简单 | |
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原油含有大量致癌的“多环芳烃”，分子结构十分稳定，有些细菌可以利用原油中的多环芳烃为碳源，在培养基中形成分解圈。某小组以如何筛选出能降解原油的菌株并投入除污为课题设计了有关实验。有关说法正确的是（ ） A.用于筛选目的菌株的培养基其主要特点是以原油（多环芳烃）为唯一碳源 B.培养基配制完成之后需进行消毒处理 C.在选择培养基上形成的菌落，不是能分解多环芳烃的目的菌种 D.筛选出目的菌种，可用平板划线法在培养基上进行接种和计数
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| 7. 难度：中等 | |
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培养流感病毒时应选择的培养基是 A．固体培养基 B．牛肉膏蛋白冻培养基 C．活的鸡胚 D．A、B、C都可以
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| 8. 难度：简单 | |
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在做分离分解尿素的细菌实验时，A同学从对应106培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。产生A同学结果的原因可能有（ ） ①土样不同 ②培养基污染 ③操作失误 ④没有设置对照 A. ①②③ B. ②③④ C. ①③④ D. ①②③④
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| 9. 难度：中等 | |
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如图是微生物平板划线示意图。划线的顺序为12345。下列操作方法正确的是( )
A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌 B.划线操作须在火焰上进行 C.在5区域中才可以得到所需菌落 D.在12345区域中划线前后都要对接种环灭菌
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| 10. 难度：中等 | |
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下图表示培养和纯化X细菌的部分操作步骤，下列有关叙述正确的是（ ）
A.步骤①操作时，倒好平板后应立即将其倒置，防止水蒸气落在培养基上造成污染 B.步骤②接种环和试管口应先在火焰上灼烧，接种环冷却后再放入试管中蘸取菌液 C.步骤③沿多个方向划线，使接种物逐渐稀释，培养后可根据出现的单个菌落计数 D.步骤④是将培养皿放在恒温培养箱中培养，一段时间后所得到的都是X细菌的菌落
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| 11. 难度：中等 | |
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植物的落叶在土壤里会逐渐腐烂成为腐殖质。河南某中学的兴趣小组对落叶腐烂的原因及不同土壤中微生物的分解能力进行了实验探究，下列有关叙述正确的是（ ） A.若要验证落叶腐烂是由于土壤微生物的分解作用，则实验的自变量是土壤微生物的种类和数量，因变量是土壤微生物分解作用的有无，并以自然状态的土壤作对照组，以经杀菌处理的土壤作实验组 B.土壤中的各种动物及微生物共同组成群落，各种微生物在生态系统中均属于分解者 C.若用等量的热带雨林土壤代替本地样品土壤进行实验，土壤中未腐烂的落叶的含量将减少 D.土壤微生物对落叶的分解是通过微生物的呼吸作用实现的，与之相关的细胞器是线粒体
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| 12. 难度：简单 | |
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若某一稀释度下，平板上生长的平均菌落数为90，涂布平板时所用的稀释液体积为0．1mL，稀释液的稀释倍数为105，则每克样品中的活菌数约为（ ） A.9×108 B.9×107 C.9×105 D.9×106
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| 13. 难度：中等 | |
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无菌操作是微生物接种技术的关键；传统发酵技术和微生物分离、纯化、应用过程及植物组织培养和动物细胞培养过程中，均要无菌操作。回答下列相关问题： （1）消毒和灭菌是两个不同的概念，灭菌是指彻底杀灭微生物使其永远丧失生长繁殖的能力。消毒仅指杀死一部分对人体有害的病原菌而对被消毒的物体基本无害。下列哪些事物适用于消毒处理__________ 。 ①皮肤 ②饮用水 ③牛奶 ④注射器 ⑤培养皿 ⑥接种环 ⑦培养基 ⑧果汁 ⑨酱油 ⑩手术刀 A．①②③⑧⑨ B．④⑤⑥⑦⑩ C．①②③④⑤⑥⑧ D．以上全部 （2）配制培养基时各种成分在溶化后分装前必须进行调整_____________， 接种前要进行_____________， 在整个微生物的分离和培养中，一定要注意在无菌条件下进行。 （3）在微生物的实验室培养中，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。下图是利用_______法进行大肠杆菌接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。为达到这一目的，操作上应注意：每次划线前要___________；冷却后从上一区划线末端开始划；首尾区_____________。
（4）有位同学在家制作泡菜时，为避免杂菌污染而向泡菜坛中加入了青霉素，结果发酵失败，原因可能是______________________。
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| 14. 难度：中等 | ||||||||||||||
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生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，为从土壤中微生物筛选到能分解尿素的细菌。培养基成分如下表所示，实验步骤如图1所示。回答下列问题
（1）分解尿素的细菌能分泌________酶，能将尿素分解成__________。 （2）培养基中为“目的菌”生长提供氮源和碳源的物质分别来自________和_________。为了满足图示锥形瓶中目的菌对氧气的需求，在培养时应采用的操作方法是_______________________________。
（3）图中将细菌转到固体培养基上时，应采用________法接种以获得单个菌落。初步筛选出来的菌种还需要用生化的方法作进一步的鉴定，鉴定方法是检测初步筛选目的菌种培养基的pH，若pH_______（降低/不变/升高），说明该菌种能够分解尿素。 （4）A同学从培养基上筛选出大约150个菌落，而其他同学只选择出大约50个菌落。有同学认为造成A同学实验结果的原因是培养基被杂菌污染。为了证实该说法，则进一步实验的操作思路是________________。
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| 15. 难度：中等 | |
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某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。 （1）培养基中含有的蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了_______和_______。除此之外，培养基还必须含有的基本成分是________和________。 （2）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于恒温培养箱中培养，培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种__________________作为对照进行实验。 （3）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有________种细菌。一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_________。
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| 16. 难度：中等 | |
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有些细菌可分解原油，从而消除由原油泄漏造成的土壤污染。某同学欲从受原油污染的土壤中筛选出能高效降解原油的菌株。回答问题： （1）在筛选过程中，应将土壤样品稀释液接种于以_______为唯一碳源的固体培养基上。从功能上讲，该培养基属于________培养基。 （2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即_________和______________。接种时所用的接种环通过________灭菌，在第二次及其后的划线操作时，总是从________________开始划线，该分离纯化方法称_____________法。 （3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力________。 （4）通常情况下，在微生物培养过程中，实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________和_________________。无菌技术要求实验操作应在酒精灯________附近进行，以避免周围环境中微生物的污染。
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| 17. 难度：中等 | |
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地球上植物产生的纤维素中有40%～60%被土壤中的某些微生物利用，从土壤中分离并研究这些微生物有利于人们更有效地利用植物秸秆中的纤维素。请回答： （1）分离纤维素分解菌，宜从____________的土壤中取样。纤维素分解菌之所以能够利用纤维素，是因为其细胞内含有________________。 （2）培养基除含有碳源、氮源、水和多种无机盐外，还应含有____________。其中，碳源主要为____________。对配制的培养基采用高压灭菌，目的是_____________________。 （3）纤维素分解菌纯化培养中常用的接种方法________________。在添加刚果红的培养基上，可通过是否产生________________来筛选纤维素分解菌。
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