2020届江苏省高三适应性检测生物试卷

一、单选题

1. 难度：简单

科学家最近发现了一种在低光照环境中能吸收光能并释放氧气的蓝细菌——温泉拟甲色球藻。下列相关叙述正确的是（    ）

A.温泉拟甲色球藻细胞膜的主要成分是蛋白质和磷酸

B.温泉拟甲色球藻含有核糖体，核糖体中不含有P

C.温泉拟甲色球藻的拟核区能形成DNA—蛋白质复合物

D.温泉拟甲色球藻吸收光能并释放氧气的化学反应是在类囊体薄膜上进行的

2. 难度：中等

将紫色洋葱鳞片叶外表皮细胞浸润到0.3g/mL的蔗糖溶液中，一段时间后进行显微观察，视野如图。下列相关叙述错误的是

A. 结构②由纤维素和果胶组成，伸缩性比原生质层小

B. 将视野中的细胞浸润在清水中，①处紫色会变浅

C. 由于细胞壁对物质透过的选择性，③处充满清水

D. 洋葱根尖分生区细胞不宜作为该实验的实验材料

3. 难度：中等

下列实验中涉及“分离”的叙述，正确的是（    ）

A.T₂噬菌体侵染细菌实验中，离心的目的是使噬菌体的DNA与蛋白质分离

B.利用密度梯度离心法分离轻、中、重三种DNA分子，证明DNA半保留复制

C.观察植物细胞质壁分离实验中，滴加蔗糖溶液的目的是使细胞质与细胞壁分离

D.观察植物根尖细胞有丝分裂实验中，可以观察到姐妹染色单体彼此分离的过程

4. 难度：困难

如图甲表示水稻叶肉细胞在光照强度分别为a、b、c、d时，单位时间内CO₂释放量或O₂产生量的变化，图乙表示用水稻叶片实验时光合作用速率与光照强度的关系，下列有关叙述正确的是（    ）

A.图甲中，光照强度为b时，细胞的光合作用速率等于呼吸作用速率

B.图甲中，光照强度为d时，单位时间内细胞从周围吸收2个单位的CO₂

C.图乙中，光照强度从0到X的范围内，叶片固定的CO₂量为S_△Oef+S_△fgX

D.图乙中，限制g点以后叶片光合作用速率的主要环境因素为光照强度

5. 难度：困难

以测定植物在黑暗中CO₂的释放量和光照下CO₂的吸收量为指标，研究温度对绿色植物光合作用与呼吸作用的影响，结果记录如表所示。下列有关分析中正确的是（   ）

组别	一	二	三	四	五
温度（℃）	15	20	25	30	35
黑暗中CO2的释放量（mg／h）	1.0	1.5	1.8	3.0	3.2
光照下CO2的吸收量（mg／h）	2.5	3.3	3.8	3.4	3.2

A.该植物在25℃条件下，光合作用制造的有机物最多

B.在35℃条件下，该植物实际光合作用速率与呼吸作用速率相等

C.在15℃条件下，该植物的净光合作用速率为1.5mg／h

D.光照相同时间，35℃时光合作用制造的有机物总量与30℃时相等

6. 难度：中等

果蝇的某对相对性状由等位基因G、g控制，且对于这对性状的表现型而言，G对g完全显性。受精卵中不存在G、g中的某个特定基因时会致死。用一对表现型不同的果蝇进行交配，得到的子一代果蝇中雌：雄＝2:1，且雌蝇有两种表现型。据此可推测：雌蝇中

A.这对等位基因位于常染色体上，G基因纯合时致死

B.这对等位基因位于常染色体上，g基因纯合时致死

C.这对等位基因位于X染色体上，g基因纯合时致死

D.这对等位基因位于X染色体上，G基因纯合时致死

7. 难度：中等

某种植物细胞减数分裂过程中几个特定时期的显微照片如下。下列叙述正确的是

A. 图甲中，细胞的同源染色体之间发生了基因重组

B. 图乙中，移向细胞两极的染色体组成相同

C. 图丙中，染色体的复制正在进行，着丝点尚未分裂

D. 图丁中，细胞的同源染色体分离，染色体数目减半

8. 难度：中等

环境雌激素（EEs）影响动物和人类的性腺发育。斑马鱼在EEs的诱导下，会表达出卵黄蛋白原（vtg）。已知绿色荧光蛋白（GFP）基因能使斑马鱼发光，欲获得能检测水中是否含有EEs的转基因斑马鱼，下列操作合理的是（　　）

A.将vtg基因的启动子与GFP基因重组

B.将EEs基因的启动子与GFP基因重组

C.将GFP基因的启动子与GFP基因重组

D.将GFP基因的启动子与vtg基因重组

9. 难度：中等

对下列示意图所表示的生物学意义的描述，准确的是（　　）

A. 甲图中生物自交后产生基因型为Aadd个体的概率为1/6

B. 若只研究细胞中每对同源染色体上的一对基因，则乙图细胞分裂完成后，可能同时产生2种、3种或4种不同基因型的配子

C. 丙图所示家系中男性患者明显多于女性患者，该病最有可能是伴X隐性遗传病

D. 丁图表示某果蝇染色体组成，该果蝇只能产生AX^W、aX^W两种基因型的配子

10. 难度：中等

牡丹的花色多种多样，白色的是不含花青素，深红色的含花青素最多，花青素含量的多少决定着花颜色的深浅。花青素含量由两对独立遗传的基因(A和a，B和b)所控制；显性基因A和B可以使花青素含量增加，两者增加的量相等，并且可以累加。深红色牡丹同白色牡丹杂交，就能得到中等红色的个体，若这些个体自交，其子代将出现花色的种类和比例分别是

A.3种；9：6：1 B.4种；9：3：3：1

C.5种；1：4：6：4：1 D.6种；1：4：3：3：4：1

11. 难度：中等

如图，图Ⅰ表示某动物细胞(2N=4)处于不同分裂时期的图像；图Ⅱ中①〜④表示该动物有性生殖时细胞分裂的不同时期，其中a、b、c分别表示某时期一个细胞中三种物质或结构的相对数量。下列说法中错误的是

A.图Ⅰ中甲、丁细胞染色体数目不同而核DNA数目相同

B.该动物性腺中存在图Ⅰ所示的所有细胞分裂方式

C.图Ⅱ中处于③时期的细胞为次级卵母细胞或极体

D.图Ⅱ中②对应的时期包含了图Ⅰ中的丙

12. 难度：中等

结合下图分析，叙述正确的有几项：

①用Ⅰ、Ⅱ进行模拟实验，桶中小球数量可以不同，但每个桶中不同的小球必须相等 

②利用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ进行有关模拟实验，每次要保证随机抓取，读取组合后必须放回 

③利用Ⅰ、Ⅱ模拟的过程发生在③，利用Ⅲ、Ⅳ模拟的过程发生在②

④利用Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ进行有关模拟实验，要统计全班的结果并计算平均值，是为了减少统计的误差

A.1 B.2 C.3 D.4

13. 难度：中等

γ-氨基丁酸和某种局部麻醉药在神经兴奋传递过程中的作用机理如图1所示。此种局麻药单独使用时不能通过细胞膜，如与辣椒素同时注射才会发生如图2所示效果。下列分析不正确的是（    ）

A.局麻药作用于突触后膜的Na⁺通道，阻碍Na⁺内流，抑制突触后膜产生兴奋

B.γ-氨基丁酸与突触后膜的受体结合，促进Cl^-内流，使突触后膜电位差增加

C.γ-氨基丁酸通过胞吐的方式通过突触前膜

D.局麻药和γ-氨基丁酸的作用效果一致，均属于抑制性神经递质

14. 难度：中等

某科技小组在调查一块方圆为2hm²的草场中灰苍鼠的数量时，第一次捕获了50只灰苍鼠，将捕获的灰苍鼠做好标记后在原地放生。5天后，在同一地点第二次捕获了52只灰苍鼠，其中有标记的个体13只。由于灰苍鼠被捕一次后更难捕捉，因此推测该草场中灰苍鼠的种群密度最可能

A.小于50只/ hm² B.小于100只/ hm²

C.小于200只/ hm² D.大于200只/ hm²

15. 难度：中等

下面是与促胰液素发现过程有关的四个实验，有关分析错误的是（    ）

①稀盐酸→小肠肠腔→胰腺分泌胰液

②稀盐酸→静脉血液→胰腺不分泌胰液

③稀盐酸→小肠肠腔（去除神经）→胰腺分泌胰液

④小肠黏膜＋稀盐酸＋沙子→研磨制成提取液→注入静脉血液→胰腺分泌胰液

A.①与②、②与④对比说明胰液分泌不是稀盐酸直接作用的结果

B.①与③对比说明胰液分泌不受神经的调节

C.①②③④对比说明胰液分泌受小肠黏膜产生的物质（由血液运输）调节

D.要证明胰液分泌受不受神经的调节应该再设计实验继续探究

16. 难度：中等

下图表示某些细菌合成精氨酸的途径，从图中可以得出的结论是（ ）

A.若产生中间产物Ⅰ依赖型突变细菌，则可能是酶1基因发生突变

B.这三种酶基因有可能位于一对同源染色体上

C.这些细菌的精氨酸的合成是由3对等位基因共同控制的

D.若酶1基因不表达，则酶2基因和酶3基因也不表达

17. 难度：中等

某生态系统中存在如图所示的食物网，如将丙的食物比例由甲︰乙＝1︰2调整为1︰1，能量传递效率按10％计算，该生态系统能承载丙的数量是原来的（    ）

A.1．375倍

B.1．875倍

C.1．273倍

D.0．575倍

18. 难度：困难

基因x 表达出的蛋白质X，是合成亮氨酸的必要蛋白质，利用单倍体酵母菌来研究基因x各种突变的效应，以下是基因x 编码链上开始和结束部分的序列。

说明：起始密码：AUG　    终止密码：UAA、UAG、UGA

下列叙述正确的选项是（　　）

A.基因x 在位置13的C → T突变，会转录出较短的mRNA

B.在位置16的A → T 突变，细胞在缺少亮氨酸的培养基无法生长

C.在位置31的T → A突变，只会让细胞制造出1种不同的蛋白质X^*，缺少最前面的10个氨基酸

D.在基因位置33和34之间插入额外的1个G//C碱基对，仍然能制造出有功能的蛋白X

二、多选题

19. 难度：中等

2019年诺贝尔生理学或医学奖颁发给了发现细胞适应氧气供应变化分子机制的科学家。当细胞缺氧时，缺氧诱导因子（HIF-1α）与芳香烃受体核转位蛋白（ARNT）结合，调节基因的表达生成促红细胞生成素（EPO，一种促进红细胞生成的蛋白质激素）；当氧气充足时，HIF-1α羟基化后被蛋白酶降解，调节过程如图所示。下列相关叙述正确的是（    ）

A.HIF-1α被蛋白酶降解后可以生成多种氨基酸分子

B.HIF-1α与ARNT结合到DNA上，催化EPO基因转录

C.细胞合成EPO时，tRNA与mRNA发生碱基互补配对

D.进入高海拔地区，机体会增加红细胞数量来适应环境变化

三、选择题

20. 难度：简单

下表有关科学家的研究成果、研究方法与事实不符的是（    ）

选项	科学家	研究成果	研究方法
A	施旺、施莱登	细胞学说	解剖和观察法
B	萨顿	基因位于染色体上	假说—演绎法
C	沃森和克里克	DNA双螺旋结构	物理模型法
D	鲁宾和卡门	光合作用释放的氧气来自水	同位素标记法

A.A B.B C.C D.D

四、多选题

21. 难度：中等

如图所示是两种细胞间信息交流模式图，下列有关叙述正确的是（    ）

A.细胞间信息交流离不开细胞膜上的糖蛋白

B.信息分子在发挥作用后会立即失去功能，提高了调节的准确性

C.信息分子通过胞吐形式迅速排出，体现了细胞膜的功能特性

D.与A图模式相比，B图所示方式作用更快、范围更广

22. 难度：中等

某生物兴趣小组用河水、池泥、黑藻、植食性小鱼、广口瓶、凡士林等材料制作了3个生态瓶（如图）。下列说法正确的是（    ）

A.营养结构的完整和合理是维持生态瓶稳态的重要条件之一

B.甲瓶中的小鱼很快死亡是因为瓶内分解者数量过少

C.乙瓶中的生物存活的时间相对较长，稳定性较高

D.丙瓶不应放在黑暗中，应放在太阳散射光下，保证能量的输入

23. 难度：困难

人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞的分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。如图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，下列相关叙述错误的是

A.①过程的促融剂常用聚乙二醇（PEG），也可用灭活的病毒诱导

B.③过程以抗HCG单克隆抗体为抗原，利用抗原-抗体杂交的原理进行检测

C.给小鼠多次注射HCG的目的是获得较多的记忆细胞

D.③过程需要添加抗生素等物质，目的是防止病毒污染

24. 难度：中等

如图表示“噬菌体侵染大肠杆菌”实验的过程，图中亲代噬菌体已用³²P标记，A、C中的方框代表大肠杆菌，分别来自于锥形瓶和试管。下列有关叙述正确的是（    ）

A.图中锥形瓶内的培养液要加入含³²P的培养基来培养噬菌体

B.图中A少量噬菌体未侵入细菌会导致沉淀物中的放射性强度偏低

C.若亲代噬菌体的DNA中含有腺嘌呤50个，3次复制需要胸腺嘧啶350个

D.C中子代噬菌体蛋白质外壳的合成，需要噬菌体的DNA和细菌的氨基酸参与

25. 难度：中等

如图是某细胞中一对同源染色体形态示意图（a…f、a⁺…f⁺代表基因）。下列有关叙述正确的是（    ）

A.该对染色体构成一个四分体，含4个DNA分子

B.该细胞中染色体发生了结构变异

C.该细胞中染色体的变化导致缺失部分基因

D.该细胞可能产生基因组成为adc⁺bef的配子

五、综合题

26. 难度：中等

马铃薯叶片光合作用合成的有机物以蔗糖的形式通过韧皮部的筛管运输到地下的匍匐枝，用于分解供能或储存。研究人员对蔗糖的运输、利用和储存进行了研究。

（1）叶肉细胞中的________与CO₂结合形成C₃，据图2判断丙糖磷酸是否为碳（暗）反应的第一个产物C₃，作出判断的依据是___________________。

（2）叶肉细胞合成的蔗糖通过筛管运输至根、茎等器官。

①蔗糖“装载”进入筛管可能通过_____________（选填“自由扩散”或“协助扩散”或“主动运输”）使筛管中的蔗糖积累到很高的浓度。

②为了验证光合产物以蔗糖形式运输，研究人员将酵母菌蔗糖酶基因转入植物，该基因表达的蔗糖酶定位在叶肉细胞的细胞壁上。结果发现：转基因植物出现严重的短根、短茎现象，其原因是_____________________；该酶还导致叶肉细胞外___________________含量升高，被叶肉细胞吸收后通过________调节机制抑制了光合作用。

27. 难度：中等

现有五个纯种果蝇品系，其中品系1为野生型（长翅、红眼、正常身、灰身），品系2～5都是由野生型品系突变而来，且突变品系各有一个性状为隐性，其他性状均为显性纯合。下表表示各隐性性状及其基因所在的染色体。请回答。

品系	2	3	4	5
性状（控制基因）	残翅(v)	白眼(a)	毛身(h)	黑身(d)
基因所在染色体	第Ⅱ染色体	X染色体	第Ⅲ染色体	第Ⅱ染色体

（1）品系3中的雄果蝇（若只考虑眼色和体色）的基因型是___________，其白眼基因来自亲本的_________（选填“雌”或“雄”）果蝇；若它的一个精原细胞减数分裂时产生了一个基因型为DDDX^a的精子，则另外三个精子的基因型为_________________；这种变异类型属于_______________________。　

（2）若要验证基因自由组合定律，在已经选择品系2作为一方亲本的前提下，品系________均可选作为另一方亲本。

（3）现用品系2和品系4果蝇杂交，其F₁代果蝇随机交配得F₂代，F₂代中的纯合长翅正常身果蝇在F₂代所有长翅正常身果蝇中的比例是_________________。

（4）现用品系3和品系5果蝇杂交，其F₁代的基因型有________种；其F₁代果蝇随机交配得F₂代，理论上F₂代中的纯合黑身白眼雌果蝇所占的比例是_____________________________

28. 难度：中等

科学家研究发现，棉花染色体基数为n=13，二倍体棉种染色体组分成为A、B、C、D、E、F、G7类，野生棉二倍体含有G染色体组。异源四倍体含有13个大染色体的组和13个小染色体的组，其中大染色体为A染色体组，小染色体为D染色体组。异源四倍体属于[AD]复合染色体组棉种。异源四倍棉种由两个非同源二倍体，n=13的棉种相遇，经天然杂交成异源二倍体2n=2x=26，后在自然条件下，杂种染色体组加倍成双二倍体2n=4x=52（即异源四倍体）。三交种异源四倍体是由三类染色体组组成的异源四倍体，拓宽了棉属遗传资源，为选育具有突破性状的棉花新品种提供了新种质。如图：

 （1）野生棉二倍体植株体细胞含有的染色体数目是_________条，亚洲棉AA和比克棉GG进行人工杂交，需要在母本开花前先姜除雄蕊，授粉后需要___________。

（2）异源二倍体AG染色体加倍时，需要在_______________时期用特定的药物处理。用异源四倍体AAGG来培育AAGD，__________（填“可以”或“不可以”）通过诱变育种，使其发生基因突变而获得，原因是__________________________。

（3）一般情况下，三交种异源四倍体AAGD在育性上是不可育的，原因是其在减数分裂过程中，由于___________________________而不能产生配子。

（4）若需要大量繁殖三交种异源四倍体AAGD的植株，可以通过_________________技术。若AAGD偶然也能产生可育的花粉，与野生棉二倍体杂交后出现染色体数目为42的细胞后代，其原因是_________（填下列字母）。

a．减数分裂形成配子过程中，染色体数目发生异常

b．减数分裂形成配子过程中，发生了基因重组

c．减数分裂形成配子过程中，发生了基因突变

d．细胞在有丝分裂过程中发生了基因突变

e．细胞在有丝分裂过程中，出现了部分染色体增加等现象

六、实验题

29. 难度：中等

黄曲霉素（AFT）难溶于水，易溶于脂肪、丙酮等有机溶剂，因而在动物体内难分解，长期摄入AFT会诱发肝癌。请回答下列有关问题。

（1）AFT在人体内难分解易累积可能与它________________有关，因此，食物或动物饲料中的AFT可以通过食物链进入人体，并随着营养级的升高，其浓度__________。

（2）研究发现AFT的细胞毒作用原理主要是干扰mRNA的功能和DNA的合成：

①AFT能与tRNA结合形成AFT-tRNA加成物，后者能抑制tRNA与某些氨基酸 （如赖氨酸、亮氨酸等）结合的活性，进而影响了蛋白质合成的__________阶段。

②有研究表明，AFT与DNA分子中的鸟嘌呤G结合，结合后的G能与碱基T互补配对。有研究发现在1992年某地区发现有5例p53基因中第249位氨基酸的密码子第三个碱基发生改变，由AGG转变为_________，这类基因突变属于________________。

（3）研究人员以小鼠为材料研究AFT对动物血液的毒性试验。主要实验步骤如下：

a．染毒   选择25只健康的小白鼠随机均分为5组，分别以含不同量AFT的食物喂养，每只每天0．10kg，连续染毒15天。    

b．取血    在染毒第20天采集小鼠血液。

c．红细胞、白细胞密度统计    吸取小鼠20μL血液，经适当稀释、充分混匀后，静置15mim利用血细胞计数板，进行观察计数。

组别	一	二	三	四	五
AFT 剂量（mg/kg 体重）	0	14	28	46	140
红细胞数量（万/mm^3）	904	887．2	856．4	696．1	519．1
白细胞数量（万/mm^3）	0．76	1．07	1．24	1．32	1．42

①分析实验数据发现，AFT剂量与小鼠白细胞数量呈__________，而与小鼠红细胞数量呈高度负相关，说明_____________________________________。

②若在利用血细胞计数板进行“红细胞、白细胞密度统计”操作过程中，某同学的操作步骤如下：用吸管吸取混匀的红细胞悬浮液，向计数室中滴2滴悬浮液→加盖玻片→静置后在显微镜下观察、计数。上述实验操作是否规范？___________。如果不规范，则统计的数据比实际值偏大还是偏小？__________________________。

七、综合题

30. 难度：困难

为防治荔枝蝽等植食性害虫，减少农药的使用，有人尝试在荔枝园的株间种植矮小的山绿豆。对比研究荔枝—山绿豆复合种植园和荔枝单一种植园中各类昆虫所占的百分比，结果如图1。图2表示能量流经第二营养级的过程示意图。请回答下列问题：

（1）调查各类昆虫的种群密度能否都用样方法?_____________。

（2）据图1分析，复合种植园中害虫明显减少，原因是_____________的比例增加，通过_____________等种间关系消灭了害虫。

（3）山绿豆耐阴性好，营养丰富，可作为饲料。选它与荔枝搭配种植，促进了群落_____________结构的形成，提高了生物利用环境资源的能力。

（4）复合种植园中，荔枝、山绿豆、杂草等属于生产者，腐生性昆虫属于_____________。与单一种植园相比，复合种植园生物的种类增加，因而其生态系统的_____________结构更为复杂，抵抗力稳定性更高。

（5）图2中，若A表示第二营养所摄入的能量，则B表示_____________，C表示_____________。

31. 难度：中等

人体细胞之间的通讯多数是通过信号分子传递的。有些信号分子作用于细胞表 面的受体，有些则作用于胞内受体。生物学上将细胞外与膜受体结合的信息分子称为第一信使，由其转换而来的细胞内信号则称为第二信使，如图 1 所示。人体胰岛素分泌调节及其发挥的生理作用如图 2 所示。请回答下列问题:

（1）图 1 中，细胞表面的膜受体的化学本质是_______，图 2 中胰岛素是由_______细胞分泌的，属于___________信使。第一信使与膜受体结合体现了细胞膜的_________功能。

（2）第一信使主要包括激素、 _____________等，其中前者弥散到体液中，随血液流经全身，传递各种信息，后者与膜受体结合后，可引起膜电位的变化。在第一信使中还包括一些局部介质，如由 T 细胞分泌的_________________。

（3）人进餐后，食物刺激消化管牵张感受器产生的兴奋传到 A 处时，体液中 Na⁺流动总的趋向是________________，兴奋在 B 处发生的信号变化是________________________。该反射弧中，效应器由传出神经末梢和___________________组成，兴奋在传入神经纤维上的传导是______________（选填“单向的”或“双向的”）。

八、实验题

32. 难度：中等

食品安全国家标准GB 4789．40—2016是奶粉中可能含有的细菌克罗诺杆菌属（阪崎肠杆菌）的检测标准，其流程如下，请回答：

 

（1）①过程中的BPW培养基为_________（填“固体”“液体”或“半固体”）培养基。

（2）②选择培养时，mLST - Vm培养基中添加的万古霉素是一种抗生素，分析可得，克罗诺杆菌属对该抗生素_____________（填“敏感”或“不敏感”）。

（3）由于②的培养产物细菌浓度未知，为避免对其进行稀释的工作，从②转移至③培养时，需采用的接种方法为_____________________。③过程所需的显色培养基在制备时的次序是______________________。

A．调节pH    B．称量药品    C．溶解     D．倒平板     E．灭菌

（4）倒平板时一般将培养基温度降至_______℃左右。培养基常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，其操作顺序应该是_____________。

①加水②排冷气③装置灭菌物品④100kPa下灭菌⑤加盖 ⑥0kPa下排气，打开灭菌锅．

（5）克罗诺杆菌属能产生黄色素，积累到一定量的时候，可使整个菌落呈现黄色，据此，除注释中的成分外，TSA培养基中还应包含________________。

（6）食品安全关系每个人的生命，对一种细菌的鉴定程序也相当严格。在上述检验程序中，步骤________________（填序号）对克罗诺杆菌属具有一定的选择或鉴定作用。

九、综合题

33. 难度：中等

下面是将乙肝病毒控制合成病毒表面主蛋白的基因HBsAg导入巴斯德毕赤酵母菌生产乙肝疫苗的过程及有关资料，请分析回答下列问题。

资料1　巴斯德毕赤酵母菌是一种甲基营养型酵母菌，能将甲醇作为其唯一碳源，此时AOX1基因受到诱导而表达[5'AOX1和3'AOX1(TT)分别是基因AOX1的启动子和终止子]。

资料2　巴斯德毕赤酵母菌体内无天然质粒，所以科学家改造出了图1所示的pPIC9K质粒用作载体，其与目的基因形成的重组质粒经酶切后可以与酵母菌染色体发生同源重组，将目的基因整合于染色体中以实现表达。

(1)如果要将HBsAg基因和pPIC9K质粒重组，应该在HBsAg基因两侧的A和B位置接上______、______限制酶识别序列， 这样设计的优点是避免质粒和目的基因自身环化。

(2)酶切获取HBsAg基因后，需用________将其连接到pPIC9K质粒上，形成重组质粒，并将其导入大肠杆菌以获取_______               _。

(3)步骤3中应选用限制酶________来切割重组质粒获得重组DNA，然后将其导入巴斯德毕赤酵母菌细胞。

(4)为了确认巴斯德毕赤酵母菌转化是否成功，在培养基中应该加入卡拉霉素以便筛选，转化后的细胞中是否含有HBsAg基因，可以用_____     ___方法进行检测。

(5)转化的酵母菌在培养基上培养一段时间后，需要向其中加入____   ____以维持其生活，同时诱导HBsAg基因表达。

(6)与大肠杆菌等细菌相比，用巴斯德毕赤酵母菌细胞作为基因工程的受体细胞，其优点是在蛋白质合成后，细胞可以对其进行___       _____并分泌到细胞外，便于提取。