| 1. 难度：中等 | |
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下列关于基因文库的说法中，不正确的是 （ ） A. 某果蝇X染色体上的所有基因组成的文库是部分基因文库 B. cDNA文库中的基因可以在不同物种间进行交流 C. 取出果蝇某细胞中全部mRNA，通过反转录产生的全部DNA片段称为该果蝇的基因组文库 D. 可以根据基因的碱基序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA，以及基因的表达产物蛋白质等特性来获取目的基因
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| 2. 难度：中等 | |
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目的基因与运载体结合所需的条件是（ ） ①同一种限制酶 ②具有标记基因的质粒 ③RNA聚合酶 ④目的基因 ⑤DNA连接酶 ⑥四种脱氧核苷酸 ⑦ATP A.①②③④⑤⑥⑦ B.①②④⑤⑥⑦ C.①②③④⑤⑦ D.①②④⑤⑦
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| 3. 难度：中等 | |
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下列关于基因工程技术的叙述，正确的是（ ） A.目的基因和受体细胞均可来自动物、植物或微生物 B.限制性核酸内切酶、DNA连接酶及载体是基因工程中常用的工具酶 C.若检测培育的抗虫棉花是否成功，可用相应的病菌侵染棉花植株 D.载体上的抗生素基因有利于检测目的基因是否插入到受体细胞的染色体上
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| 4. 难度：困难 | |
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下列如图所示的黏性末端的说法，错误的是（ ）
A. 甲乙黏性末端是由不同的限制酶切割而成的 B. 甲乙黏性末端可形成重组DNA分子 C. DNA连接酶作用位点在a点，催化两个DNA片段之间相连 D. 切割甲的限制酶能识别并切割由甲、乙片段连接形成的重组DNA分子
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| 5. 难度：中等 | |
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我国科学家独创的花粉管通道法，可以使目的基因借助花粉管通道进入受体细胞，是一种十分简便经济的方法，对此认识正确的是（ ） A. 不必构建重组载体就可以直接导入 B. 此方法可用于转基因动物 C. 受体细胞只能是植物的卵细胞 D. 有时可以取代农杆菌转化法
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| 6. 难度：困难 | |
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下图甲、乙、丙分别是目的基因、质粒载体、重组DNA（重组质粒）的三个示意图，限制酶有BglⅡ、EcoRⅠ和Sau3AⅠ。要获得理想的可表达目的基因的重组DNA，最佳的限制酶组合方式是（ ）
A.用EcoRⅠ切割目的基因和质粒载体 B.用BglⅡ和EcoRⅠ切割目的基因和质粒载体 C.用BglⅡ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体 D.用EcoRⅠ和Sau3AⅠ切割目的基因和质粒载体
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| 7. 难度：困难 | |
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盐害是全球水稻减产的重要原因之一，中国水稻研究所等单位的专家通过农杆菌中的质粒将CMO基因、BADH基因、mtld基因、gutD基因和SAMDC基因5个耐盐基因导入水稻，获得了一批耐盐转基因植株。有关耐盐转基因水稻培育的分析正确的是（ ） A. 该转基因水稻与原野生型水稻存在生殖隔离 B. 该基因工程所需的限制性核酸内切酶可能有多种 C. 只要目的基因进入水稻细胞，水稻就会表现出抗盐性状 D. 可通过将水稻种植到有农杆菌的土壤中观察目的基因是否表达
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| 8. 难度：中等 | |
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用XhoI和SalI两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是（ ）
A.如图中两种酶识别的核苷酸序列不同 B.如图中酶切产物可用于构建重组DNA C.泳道①中是用SalI处理得到的酶切产物 D.图中被酶切的DNA片段是单链DNA
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| 9. 难度：中等 | |
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下列叙述正确的是（ ） A.抗原-抗体杂交技术可检测mRNA合成情况 B.花药离体培养时要对外植体进行消毒处理 C.动物细胞核移植以受精卵作为受体细胞 D.可以用灭活的病毒诱导原体质体融合
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| 10. 难度：中等 | |
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关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是 A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同 B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 C.烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖 D.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒
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| 11. 难度：困难 | |
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下列生物工程技术中，一定要来自同一个物种的是（ ） ①核移植中细胞核和细胞质来源 ②动物细胞融合中的两个细胞 ③牛胚胎移植中胚胎的供体与受体 ④植物体细胞杂交中两个体细胞 A. ①②③④ B. ③ C. ①②③ D. ②③
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| 12. 难度：困难 | |
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图1为某种质粒简图，图2表示某外源DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制性核酸内切酶EcoRⅠ、BamHⅠ、HindⅢ的酶切位点。下列有关叙述错误的是( )
A. 在基因工程中若只用一种限制酶完成对质粒和外源DNA的切割，则可选EcoRⅠ B. 如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别用EcoRⅠ酶切后，再用DNA连接酶连接，形成一个含有目的基因的重组DNA，此重组DNA中EcoRⅠ酶切点有1个 C. 为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时可使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理 D. 一个图1所示的质粒分子经EcoRⅠ切割后，含有2个游离的磷酸基团
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| 13. 难度：困难 | |||||
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某线性DNA分子含有5000个碱基对(bp)，先用限制性核酸内切酶a完全切割，再把得到的产物用限制性核酸内切酶b完全切割，得到的DNA片段大小如下表。限制性核酸内切酶a和b的识别序列和切割位点如下图所示。下列有关叙述错误的是
A.a酶与b酶切断的化学键相同 B.该DNA分子中a酶能识别的碱基序列有3个 C.仅用b酶切割该DNA分子至少可得到三种DNA片段 D.限制性核酸内切酶a和b切出的DNA片段不能相互连接
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| 14. 难度：困难 | |
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下列关于病毒的叙述正确的是（ ） ①病毒的衣壳决定其抗原的特异性,在生态系统中作为消费者 ②含RNA的病毒较含DNA的病毒更易发生变异 ③病毒呈现不同形态的直接原因是衣壳粒的排列方式不同 ④灭活的病毒不具有抗原性，可作为细胞工程的诱导剂 ⑤生物学家认为病毒是生物，其主要理由是能够在寄主体内完成遗传物质的自我复制 A. 四项正确 B. 仅一项正确 C. 两项正确 D. 三项正确
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| 15. 难度：困难 | |
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“筛选”是生物工程中常用的技术手段，下列关于筛选的叙述中正确的有几项( ) ①基因工程中用同种限制性核酸内切酶切割运载体和目的基因，酶切产物用DNA连接酶连接，为了保证成功率，需将获得的产物筛选后导入受体细胞 ②单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第一次筛选出的是杂交瘤细胞 ③单克隆抗体制备过程中，在完成细胞融合后，第二次筛选出的是针对目标抗原的抗体检验为阳性的杂交瘤细胞 ④为了快速繁殖无子西瓜，需筛选出特定染色体组数的体细胞才能进行组织培养 A.②③ B.①④ C.③④ D.①②
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| 16. 难度：中等 | |
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关于现代生物技术相关知识的叙述，其中正确的是（ ） A. 动物细胞培养与植物组织培养均需使用胰蛋白酶处理 B. 将二倍体玉米花粉和二倍体水稻花粉进行细胞杂交获得的植株为二倍体，但不可育 C. 限制酶切割DNA分子,从DNA分子中部获取目的基因时,同时有两个磷酸二酯键被水解 D. 将目的基因整合到受体细胞的叶绿体基因组中能防止基因污染是因为叶绿体基因组不会进入到生殖细胞中
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| 17. 难度：中等 | |
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蛋白质工程的基本流程正确的是（ ） ①蛋白质分子结构设计②DNA合成③预期蛋白质功能④根据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列 A. ①②③④ B. ④②①③ C. ③①④② D. ③④①②
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| 18. 难度：困难 | |
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下列关于细胞工程的有关叙述，正确的是( ) A. 利用花药离体培养得到单倍体植株，从紫草的愈伤组织中提取紫草素，利用细胞工程培育“番茄 、马铃薯”杂种植株，都利用了植物组织培养技术 B. 在进行组织培养时，由根尖细胞形成愈伤组织的过程中，不可能会发生细胞脱分化和基因突变，而可能发生细胞分化和基因重组 C. 动物细胞融合与植物体细胞杂交相比，诱导融合的方法、所用的技术手段、所依据的原理均相同，都能形成杂种细胞和杂种个体 D. 动物难以克隆的根本原因是基因组中的基因不完整
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| 19. 难度：困难 | |
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下图是一种“生物导弹”的作用原理示意图，没有与肿瘤细胞结合的“生物导弹”一段时间后被机体清除。阿霉素是一种抗肿瘤药，可抑制DNA和RNA的合成，对正常细胞也有一定毒性。下列说法不正确的是
A.单克隆抗体是由杂交瘤细胞合成和分泌的 B.活化阿霉素能抑制细胞中的DNA复制和转录过程 C.在治疗中，应先注射非活化磷酸阿霉素再注射生物导弹 D.单克隆抗体特异性强，能减轻阿霉素对正常细胞的伤害
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| 20. 难度：困难 | |
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如图，核苷酸合成有两个途径，物质A可以阻断其中的全合成途径。正常细胞内含有补救合成途径所必需的转化酶和激酶。制备单克隆抗体时选用的骨髓瘤细胞缺乏转化酶。现用加入H、A、T三种物质的“HAT培养基”来筛选特定的杂交瘤细胞。关于筛选原理的叙述正确的是 A. 免疫的B细胞及其相互融合细胞因全合成途径被A阻断，在HAT培养基上不能增殖 B. 骨髓瘤细胞及其相互融合细胞因无法进行上述两个途径，而在HAT培养基上不能增殖 C. 杂交瘤细胞因为可进行上述两个途径，能在HAT培养基上大量增殖 D. HAT培养基上筛选出的所有杂交瘤细胞，既能大量增殖又能产生较高纯度的目标抗体
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| 21. 难度：困难 | |
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下图为双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，利用细胞工程技术制备的单克隆抗体能增强该过程的有效性，下列相关叙述正确的是
A.将相关抗原注射到小鼠体内，可从小鼠脾脏中获得所需的单克隆抗体 B.固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于两者结构相同 C.加入酶标抗体的目的是通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量 D.该方法与只使用单克隆抗体相比，能增加识别抗原的种类
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| 22. 难度：困难 | |
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某研究小组为测定某种药物对体外培养细胞的毒性，准备对某种动物的肝肿瘤细胞（甲）和正常肝细胞（乙）进行动物细胞培养。下列叙述正确的是 A.制备肝细胞悬液时，可用胃蛋白酶处理肝组织块 B.培养液需含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清等 C.为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的抗生素 D.甲、乙细胞在持续的传代培养过程中，均会出现停止增殖的现象
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| 23. 难度：困难 | |
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下列关于动物细胞工程的叙述，错误的是（ ） A.PEG诱导动物细胞融合形成的杂种细胞，经动物细胞培养不能得到优良动物个体 B.使用冷冻保存的正常细胞通常为10代以内，以保持细胞正常的二倍体核型 C.在高倍显微镜下观察发生基因突变的细胞比例可推知某化学药品的毒性 D.胰蛋白酶处理动物组织后，用培养液稀释制成细胞悬浮液
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| 24. 难度：困难 | |
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下列有关核移植的叙述中，正确的是 A. 卵母细胞最好选择减数第一次分裂中期的卵母细胞 B. 胚胎核移植难度明显高于体细胞核移植 C. 供体细胞应选择传代10代以内的细胞 D. 通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞动物进行了100%的复制
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| 25. 难度：困难 | |
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下列哪些过程发生在受精过程中 ①精子发生顶体反应释放顶体酶 ②顶体酶的作用使精子穿过放射冠、透明带、卵细胞膜 ③卵子完成减数第一次分裂 ④精子的核变成雄原核、卵子的核成为雌原核 ⑤防止多精入卵的透明带反应 A.①②⑤ B.①④⑤ C.②③④ D.②④⑤
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| 26. 难度：简单 | |
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下图是快速RT-PCR过程示意图，①和②为逆转录酶催化的逆转录过程，③是PCR过程。据图分析下列说法错误的是（ ）
A.逆转录酶具有DNA聚合酶能力 B.③PCR过程只需要引物b C.RT-PCR可检测基因表达水平 D.RT-PCR可检测新冠病毒等RNA病毒
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| 27. 难度：简单 | |
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限制性核酸内切酶能识别特定的DNA序列并进行剪切,不同的限制性核酸内切酶可以对不同的核酸序列进行剪切。现用3种不同的限制性核酸内切酶对一个6.2 kb (千碱基对)大小的线状DNA进行剪切后,用凝胶电泳分离各核酸片段,实验结果见下表。 请问:3种不同的限制性核酸内切酶在此DNA片段上的切点位置是图中的（ ）
A. B. C. D.
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| 28. 难度：中等 | |
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某农业研究所将苏云金芽孢杆菌的抗虫基因（Bt）导入棉花，筛选出Bt基因成功整合到染色体上的抗虫植株（假定Bt基因都能正常表达）。某些抗虫植株体细胞含两个Bt基因，这两个基因在染色体上的整合情况有右图所示的三种类型（黑点表示Bt基因的整合位点）；让这些含两个Bt基因抗虫的植株自交，后代含抗虫基因的个体的比例大小顺序是 （ ）
A.甲、丙、乙 B.甲、乙、丙 C.丙、乙、甲 D.乙、甲、丙
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| 29. 难度：中等 | |
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目前，欧洲、亚洲许多国家都发现了禽流感疫情，并引起了人体感染，造成多人死亡。科学工作者经研究，发现了数种快速检验禽流感病原体的方法，以正确诊断禽流感，下列与禽流感病原体研究、诊断有关的说法中错误的是： A. 镜检法：在光学显微镜下直接观察病人的痰液或血液，以发现病原体 B. PCR：体外基因复制技术，可在几十分钟内把病原体的基因扩展到数百万倍 C. 抗原抗体法：用特殊制备的病原体蛋白质与病人血清中的相关抗体特异性结合，发现病原体 D. DNA探针技术：用放射性同位素、荧光因子等标记的DNA 分子做探针，利用DNA分子杂交原理来检测病原体
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| 30. 难度：困难 | |
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用DNA连接酶把被限制酶Ⅰ（识别序列和切点是－↓GATC－）切割过的运载体和被限制酶Ⅱ（识别序列和切点是－G↓GATCC－）切割过的目的基因连接起来后，该重组DNA分子能够再被限制酶Ⅱ切割开的概率是 A.1/2 B.7/16 C.1/16 D.1/4
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| 31. 难度：困难 | |
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图1是某生态系统中组成食物链的三个种群（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）一年内能量流动统计的部分数据（图中数值单位是100万kJ）。图2是能量流经卷叶螟的示意图，其中A～C代表能量，数值表示能量值，单位为J/（hm2•a）。回答有关问题：
（1）图1中三个种群组成的食物链是_______________________________________________________________。不同营养级之间能量以_____________________________________________形式流动，第一营养级到第二营养级的能量传递率约为____________________________________（保留1位小数）。 （2）图2中A表示的含义是______________________________________________________，B的数值为____________ J/（hm2•a），图中C的能量来源是_______________________________________________________________同化的能量。已知图2卷叶螟以水稻为食，则水稻同化的能量至少为_____________________________________________ J/（hm2•a）。 （3）生态系统能量流动的特点是_______________________________________________________________。
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| 32. 难度：困难 | |
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下图为三种质粒和一个含目的基因的 DNA 片段，其中 Ap 为氨苄青霉素抗性基因，Tc 为四环素抗性基因，lacZ 为蓝色显色基因，EcoRⅠ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8Kb）等为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离。已知1 kb＝1000个碱基对的长度。请回答下列问题：
（1）片段 D 为目的基因中的某一片段，则限制酶和 DNA 连接酶的作用部位依次是_______________ 、______________（填图中数字标号）） （2）图中能作为目的基因运载体最理想的质粒是__________（填A/B/C））据图分析，其他两种质粒一般不能作为运载体的理由分别是______________、_________。 （3）如果将目的基因和质粒 A 构建重组质粒,然后再用 EcoRⅠ酶切这个重组质粒，进行电泳观察，可出现长度分别为 1.1 kb 和_________________kb 的两个片段，或者长度分别为___________kb 、_________kb的两个片段。
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| 33. 难度：中等 | |
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癌症是人类健康杀手之一，临床实验表明，红豆杉树皮产生的紫杉醇对癌症有一定的疗效。下面是以红豆杉为材料利用植物组织培养和细胞培养技术生产紫杉醇的流程图。
请据图回答下列问题： （1）图中②为愈伤组织，通过B过程可最终产生新的植株，通过C过程可产生大量细胞，则图中A、B、C分别表示的过程为脱分化、___________、___________。其中B过程的实质是___________。 （2）对⑤的培养一般要采用液体培养基，并要不断通入无菌空气且进行搅拌，其目的是___________且___________。 （3）对⑤的培养可获得代谢产物一一紫杉醇，但培养后期紫杉醇产量下降，其原因包括___________等。 （4）若①是红豆杉（基因型为DdTt）的花药，可选用___________（填编号）制成人工种子，该“种子”萌发的幼苗用___________处理，可快速获得纯种植株，纯种植株的基因型为___________。
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| 34. 难度：中等 | |
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核酸检测作为确诊新型冠状病毒肺炎的金标准，写入了国家卫健委颁布的诊疗指南里，但依然出现了少数“假阴性”病例，此时采用免疫检测则可以很大程度上避免核酸检测的“假阴性”。请回答下列问题： （1）开发核酸检测试剂盒，需要先分离毒株、获得完整基因组序列信息、设计特异性引物和探针的__________，再据此用__________方法直接人工合成特异性引物和探针。 （2）我国研发的新型冠状病毒核酸快速检测试剂盒的检测原理是：若送检样本中存在病毒，则以病毒RNA为模板，在___________酶的作用下合成cDNA，再加入互补的荧光探针、__________种引物、四种脱氧核苷酸和_________酶后，cDNA开始扩增，子链延伸至探针处，会水解探针释放出荧光基团产生荧光，荧光监测系统接收到荧光信号从而确诊。 （3）我国新型冠状病毒化学发光检测试剂盒采用的是免疫检测，其中的单克隆抗体是由经病毒抗原蛋白免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合制备的__________细胞产生的；该试剂盒能快速确诊病例，这是因为单克隆抗体具有___________________________等优点。
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| 35. 难度：困难 | |
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截止2020年5月，新冠病毒（2019-nCoV）已在全球210多个国家和地区蔓延传播，引发了全球性的“防疫大战”。在防疫战中，尽早确诊并及时隔离是防止新冠病毒过度传播的有效手段。在现有的检测新冠病毒的方法中，最常用的是“荧光PCR法”。其基本原理是：将新冠病毒RNA逆转录为DNA，通过采用多重荧光RT一PCR技术，以2019—nCOV的两个独立基因ORF1ab基因和N基因的保守区为靶位点设计特异性的引物和一定量的荧光标记的DNA探针，单管双检同时测定新型冠状病毒两个独立基因，消除由于病毒变异带来的漏检风险。 请回答下列问题： （1）“荧光PCR法”所用的试剂盒中通常都应该含有：___________、___________、引物、四种脱氧核苷酸、缓冲体系。 （2）如果要成功将上述两个独立基因分别扩增出来，则在试剂盒中的引物应该有___________种，下图为“基因ORFlab”对应的cDNA片段结构示意图，则与之对应的引物结合的部位应该是图中的___________（用图中数学作答）。
（3）在检测过程中，随着PCR的进行，反应产物不断累积，“杂交双链”荧光信号的强度也等比例增加。可通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而得到一条荧光扩增曲线图（如图）。
①“平台期”出现的最可能原因是：______________________。 ②理论上，在检测过程中，有荧光标记的“杂交双链”出现，则说明检测结果呈___________（填“阴”或“阳”）性，但为了保证检测结果的准确性，一般会设定“双链荧光强度”的阈值（如图虚线），即达到或超过阈值时才确诊。现有甲、乙两个待检样本，在检测过程中都出现了上述形态的曲线，但甲的a点比乙的a点明显左移。请给这种结果做出科学合理的解释（试剂盒合格且正常，操作过程规范且准确）：______________________。 （4）某些“阴谋论者”认为新冠病毒是“生物武器”，但这显然是不攻自破的，因为任何热爱和平的国家、组织和个人都不可能去研究这类“人类公敌”。早在1998年，中美两国元首在关于《禁止生物武器公约》议定书的联合声明中，重申：______________________。
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