| 1. 难度：简单 | |||||
|
某线性DNA分子含有5000个碱基对（bP），先用限制酶a切割，再把得到的产物用限制酶b切割，得到的DNA片段大小如下表。在该DNA分子中，酶与b酶的识别序列分别有（ ）
A.3个和2个 B.2个和2个 C.3个和3个 D.2个和3个
|
|||||
| 2. 难度：简单 | |
|
作为基因的运输工具——运载体，必须具备的条件之一及理由是 A.能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因 B.具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达 C.具有某些标记基因，以使目的基因能够与其结合 D.对宿主细胞无伤害，以便于重组DNA的鉴定和选择
|
|
| 3. 难度：简单 | |
|
下列关于目的基因导入受体细胞的描述不正确的是（ ） A.基因枪法导入植物体细胞的方法比较经济有效 B.显微注射技术是转基因动物中采用最多的方法 C.大肠杆菌细胞最常用的转化方法是：Ca2+处理细胞，使细胞的生理状态发生改变 D.农杆菌转化法是将目的基因导入植物细胞最常用的方法
|
|
| 4. 难度：简单 | |
|
下列关于基因文库的说法中，正确的是 A.cDNA文库中的基因也有启动子 B.一种生物的cDNA文库只有一种 C.基因组文库的基因都可以在物种间进行基因交流 D.cDNA文库中只含有某种生物的部分基因
|
|
| 5. 难度：简单 | |
|
红豆杉是世界上公认濒临灭绝的天然珍稀抗癌植物，它的细胞提取物紫杉醇是重要的抗癌药物之一。红豆杉可通过播种的方法进行繁殖，但其生长速度缓慢，再生能力差，因而植物组织培养技术是实现其大规模培养的途径之一。下列有关叙述正确的是（ ） A.培养红豆杉的愈伤组织可用于紫杉醇的工业化生产 B.红豆杉不同部位的细胞经植物组织培养获得的愈伤组织基因型相同 C.培养基需要用高压蒸汽灭菌，外植体需要用50%乙醇、5%次氯酸钠消毒处理 D.培养过程中采用的MS培养基中的微量元素和有机成分均可先配制成一定倍数的母液，用时稀释，而大量元素不需要配制母液
|
|
| 6. 难度：中等 | |
|
实验人员利用矮牵牛（二倍体，2n=14）的红色花瓣细胞（液泡呈红色）与枸杞（四倍体，4n=48）叶肉细胞，制备了相应的原生质体，并诱导其融合，经筛选、培养获得杂种植株。下列有关叙述错误的是（ ） A.获得该杂种植株时不用考虑两种高等植物间的生殖隔离问题 B.可利用物理或化学方法诱导原生质体融合 C.可利用光学显微镜观察，筛选出杂种原生质体 D.若原生质体均为两两融合，则融合后的细胞中染色体数目均为62条
|
|
| 7. 难度：简单 | |
|
如图为通过矮牵牛原生质体形成再生植株的过程，有关叙述错误的是（ ）
A.过程①用纤维素酶和果胶酶获得原生质体 B.过程②是基因选择性表达的结果 C.过程③需用秋水仙素处理诱导细胞壁再生 D.原生质体无细胞壁但仍保持细胞的全能性
|
|
| 8. 难度：中等 | |
|
治疗性克隆有望解决供体器官短缺和器官移植出现的排异反应，图表示治疗性克隆的部分过程。据图判断，下列说法正确的是
A.过程①表示细胞核移植 B.细胞A常用受精卵 C.过程②表示脱分化过程 D.胚胎干细胞不再增殖
|
|
| 9. 难度：简单 | |
|
下图为肾脏上皮细胞培养过程示意图，下列叙述不正确的是（ ）
A.甲→乙过程需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理 B.丙过程指细胞在添加血清的合成培养基中原代培养 C.丙和丁过程均会出现细胞贴壁和接触抑制现象 D.丁过程是传代培养的细胞，不能保持二倍体核型
|
|
| 10. 难度：简单 | |
|
下列生物工程技术中，不属于细胞工程的是（ ） A.大量生产抗绒毛促性腺激素单克隆抗体 B.利用含有人胰岛素基因的大肠杆菌生产胰岛素 C.通过体细胞克隆技术培育出克隆羊 D.将某人的肝癌细胞在实验室中繁殖成一个细胞系
|
|
| 11. 难度：中等 | |
|
如图是利用胚胎工程技术培育优质奶牛的主要步骤，下列叙述正确的是
A.胚胎移植可以定向改造动物遗传性状，③需移植到发情的母牛子宫内发育 B.A细胞不一定是受精卵 C.①②两个胚胎具有不同遗传物质 D.图中a过程包括卵裂、囊胚和原肠胚等阶段
|
|
| 12. 难度：简单 | |
|
华南虎是国家一级保护动物，可采用试管动物技术进行人工繁殖，该技术包括的环节有 ①转基因 ②核移植 ③体外受精 ④体细胞克隆 ⑤胚胎移植 A.①③ B.①④ C.②⑤ D.③⑤
|
|
| 13. 难度：简单 | |
|
下列关于生物武器的叙述中，不确切的是 （ ） A.生物武器造价昂贵，但却是具有大规模杀伤性的武器 B.生物武器包括致病菌、病毒、生化毒剂等 C.生物武器可以直接或者通过食物、生活必需品等散布 D.生物武器一旦使用，将对军队和平民造成大规模的杀伤后果
|
|
| 14. 难度：简单 | |
|
随着转基因技术的发展，“基因污染”应运而生，关于基因污染的下列说法中不正确的是( ) A.转基因作物可通过花粉扩散到它的近亲作物上，从而污染生物基因库 B.杂草、害虫从它的近亲获得抗性基因，可能破坏生态系统的稳定性 C.基因污染是一种不可以增殖的污染 D.基因污染难以清除
|
|
| 15. 难度：中等 | |
|
为解决农村污水处理问题，科研人员研发了“厌氧-跌水充氧接触氧化-人工湿地”的组合工艺。其原理是：生活污水先进入厌氧沼气池发酵，发酵后的污水用泵提升进入多级跌水池，通过污水的逐级跌落自然充氧，不断降解有机物；经过跌水池的污水再进入水耕蔬菜型人工湿地（见下图所示）。下列相关叙述错误的是（ ）
A.多种微生物的共同降解协同作用是水中污染物得以去除的主要原因 B.污染物的去除效果与水温、跌水高度、水的停留时间均有关系 C.水耕蔬菜的生长，对水中藻类的繁殖和生长起到了促进作用 D.上述工艺应用了物质循环再生原理等生态工程原理
|
|
| 16. 难度：中等 | |
|
研究小组利用稀释涂布平板法来探究某河流中大肠杆菌的数量，每一个浓度涂布四个平板，并且设置空白对照组。下列关于操作步骤的叙述正确的是（ ） A.涂布前，将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，燃尽后还要冷却8~10s B.涂布完成后，在培养皿的皿盖上做标记，以避免混淆，并将培养皿倒置培养 C.计算平板上的菌落数时，四个培养皿上的菌落数无论多少，都要全部平均 D.若空白对照组上有7个菌落，则在实验组数据基础上减去7，以获得最准确数据
|
|
| 17. 难度：中等 | |
|
为了分离某种微生物，实验室配制的培养基成分如下：葡萄糖、氯化钠、K2HPO4、酚红、琼脂、水和尿素溶液。下列叙述错误的是（ ） A.葡萄糖的作用是提供碳源并调节渗透压 B.配制该培养基时，必须使用无菌水 C.培养基能用于分离以尿素为氮源的微生物 D.酚红可用于初步鉴定尿素分解菌
|
|
| 18. 难度：中等 | |
|
下列是设计DNA鉴定实验的1管与2管示意图，其中正确的是（ ） A. C.
|
|
| 19. 难度：简单 | |
|
PCR 仪实质上是一台自动调控温度的仪器，它调控不同温度的目的是（ ） ① 90～95℃，使 DNA 分子变性而失去生物活性 ② 90～95℃，使 DNA 分子变性而解开双螺旋结构 ③ 55～60℃，使 DNA 分子开始复制、延伸 ④ 55～60℃，使 DNA 分子恢复双螺旋结构，恢复活性 ⑤ 70～75℃，使 DNA 分子开始复制、延伸 ⑥ 70～75℃，使 DNA 分子恢复双螺旋结构，恢复活性 A.① ③ ⑤ B.② ③ ⑤ C.② ④ ⑤ D.② ④ ⑥
|
|
| 20. 难度：中等 | |
|
在细胞学说创立过程中，有很多科学家做出了贡献，下面的说法不符合史实的是（ ） A.列文虎克用自制的显微镜观察到不同形态的红细胞、精子和细菌等 B.马尔比基第一次观察到活细胞并为之命名 C.施莱登和施旺共同证明了植物和动物都是由细胞构成的 D.魏尔肖的著名论断是对细胞学说的重要补充
|
|
| 21. 难度：简单 | |
|
盐害是全球水稻减产的重要原因之一，中国水稻研究所等单位的专家通过农杆菌中的质粒将CMO基因、BADH基因、mtld基因、gutD基因和SAMDC基因5个耐盐基因导入水稻，获得了一批耐盐转基因植株。有关耐盐转基因水稻培育的分析错误的是（ ） A.该转基因水稻与原野生型水稻不存在生殖隔离 B.该基因工程所需的限制性核酸内切酶可能有多种 C.只要目的基因进入水稻细胞，水稻就会表现出抗盐性状 D.可通过将水稻种植到有农杆菌的土壤中观察目的基因是否表达
|
|
| 22. 难度：简单 | |
|
为应对“垃圾围城”危机，很多省市对生活垃圾进行分类管理，下列说法正确的是（ ） A.垃圾分类处理减轻了环境污染，提高了城市生态系统的稳定性 B.微生物能分解垃圾，说明生态系统具有一定的自我调节能力 C.垃圾分类处理，实现了垃圾资源化和能量的循环利用 D.此举有利于发展循环经济和实现城市的可持续发展
|
|
| 23. 难度：简单 | |
|
有机磷农药是用于防治植物害虫的含磷有机化合物，广泛应用于农业生产中，有时会造成瓜果蔬菜等食品农药残留超标，不少种类对人、畜的毒性很强。某班同学欲从土壤中分离高效降解有机磷农药的微生物，下列做法正确的是（ ） A.在被有机磷农药污染的土壤中取样，并在添加有机磷农药的培养基上培养以获取相应的微生物 B.在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先培养一段时间，以检测培养基平板灭菌是否合格 C.若要测定培养液中选定菌种的菌体数，既可在显微镜下用血细胞计数板直接计数，也可选用稀释涂布平板法统计 D.制备固体培养基时加入的常用凝固剂是琼脂；若培养基需要调节pH，则应在灭菌之后调节。
|
|
| 24. 难度：困难 | |
|
CAR—T技术是近几年治疗肿瘤的一种新型细胞疗法，它通过收集患者T细胞对其进行遗传修饰，使之携带能指导嵌合抗原受体（CAR）合成的新基因（具体修饰过程如图）。最后，将这些修饰过的CAR—T细胞输回患者体内，从而使CAR指导T细胞靶向高效杀死肿瘤细胞。据图分析，下列说法正确的是（ ）
A.构建CAR-T细胞所使用的目的基因是TCR跨膜区基因和抗体基因 B.①是指目的基因的获取，②是指基因表达载体的构建 C.重组分子导入T细胞后，应当采用DNA分子杂交法来检验指导CAR合成的基因是否转录成功 D.CAR—T技术融合了体外基因治疗的方法
|
|
| 25. 难度：中等 | |
|
下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验原理与方法的叙述，正确的是( ) A.向鸡血细胞液中加入蒸馏水的目的是使其吸水涨破，释放出其中的DNA B.洗涤剂能瓦解细胞膜并增加DNA在氯化钠中的溶解度 C.调节NaCl溶液浓度至0.14mol/L，过滤后取滤液进行后续步骤的操作 D.用体积分数为95%的冷却酒精可以进一步纯化DNA
|
|
| 26. 难度：中等 | |
|
探针是指以放射性同位素、生物素或荧光染料等进行标记的已知核苷酸序列的核酸片段，可用于核酸分子杂交以检测目标核苷酸序列是否存在。如图（1）所是某实验小组制备的两种探针，图（2）是探针与目的基因杂交的示意图。请回答下列有关问题：
（1）核酸探针与目标核苷酸序列间的分子杂交遵循________________。设计核苷酸序列是核酸探针技术关键步骤之一。图（1）所示的两种核酸探针（探针2只标注了部分碱基序列）都不合理，请分别说明理由_________________、_________________________。 （2）cDNA探针是目前应用最为广泛的一种探针。制备cDNA探针时，首先需提取、分离获得____________作为模板，在_______________的催化下合成cDNA探针。利用制备好的β-珠蛋白基因的cDNA探针与β-珠蛋白基因杂交后，出现了如图（2）中甲、乙、丙、丁等所示的“发夹结构”，原因是____________________。 （3）基因工程中利用乳腺生物反应器生产α-抗胰蛋白酶，应将构建好的重组DNA导入___________中，再利用SRY基因（某一条性染色体上的某性别决定基因）探针进行检测，将检测反应呈____________（填阳或阴）性的胚胎进行移植培养。
|
|
| 27. 难度：中等 | |
|
草莓生产上传统的繁殖方式易将所感染的病毒传播给后代, 导致产量降低、品质变差。运用微型繁殖技术可以培育出无病毒幼苗。草莓微型繁殖的基本过程如下图，请回答下列问题。
（1）微型繁殖培育无病毒草莓苗时, 一般选取_____________作为外植体, 其依据是__________________________。 （2）与常规的种子繁殖方法相比，植物微型繁殖技术的特点有___________________（答出2点即可）。 （3）过程①中配制好的培养基中，常常需要添加_____________，有利于外植体启动细胞分裂形成愈伤组织。接种后2～5d,若发现外植体边缘局部污染, 原因可能是______________________________________。 （4）过程②要进行照光培养，其作用是____________________________________。 （5）离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物全部的_____________ （6）通过组织培养技术，可把植物组织细胞培养成胚状体，再通过_____________包装得到人工种子，这种人工种子在适宜条件下可萌发生长。
|
|
| 28. 难度：简单 | |
|
抗体的结构如图所示，它由两条H链和两条L链组成。同一物种C区氨基酸序列恒定，不同抗体结合抗原的V区氨基酸序列有差异。
（1）在生物体内，抗体是由______细胞分泌的，与其合成与分泌直接相关的细胞器有_______。 （2）传统方法获取抗体时，需要将相应的抗原反复注射到动物体内，从动物的血清中分离。显然，这种方法产生的抗体量和纯度等都很低特异性差，单克隆抗体的出现，克服了传统抗体的不足，单克隆抗体是指_____________。 （3）天然的抗体左右两个V区结构完全相同，只能结合相同的抗原。通过一定技术手段可以得到双功能抗体（又叫双特异性抗体），它的两个V区能结合不同的抗原。制备双功能抗体的基本方法如下：将能分泌抗体1的杂交瘤细胞（A细胞）与能分泌抗体2的淋巴细胞（B细胞）进行融合，形成可分泌两种亲代抗体和杂种抗体的杂种—杂交瘤细胞（A—B）。细胞融合时需要用____________、聚乙二醇或电激等诱导，融合后总共应该有___________种细胞（最多考虑两两融合）。 （4）双功能抗体在癌症治疗中可作为“生物导弹”：用其中一个V区识别癌细胞表面______，用另一个V区将T细胞等杀伤细胞定向带到癌细胞所在的位置，这样造成肿瘤局部免疫细胞聚焦的效果。 （5）细胞融合方法得到的双功能抗体，只是将两个不同抗体的V区集中到了一个抗体上，并未改变V区的结构。通过________技术，可以对双功能抗体的V区进行设计改造，使其更适合人类的需要。这种改造，最终还必须通过对DNA分子的改造来完成，因而该技术也称为_________________。
|
|
| 29. 难度：中等 | |
|
波尔山羊被称为世界“肉用山羊之王”，某公司通过胚胎工程技术能快速繁殖大量波尔山羊。回答下列问题： （1）山羊体外受精主要包括卵母细胞的采集和培养、________________和受精等几个主要步骤。用________（填激素名称）处理方法促进其排卵，从________中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。精子获能处理通常采用培养法和_______________。 （2）培养早期胚胎时，所用培养液的成分比较复杂，除了一些_________类外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。 （3）为了使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致，处理方法是______________。 （4）移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是_________________。
|
|
| 30. 难度：中等 | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
亚麻酸（ALA）能够促进卵母细胞体外成熟和囊胚发育。为了给水牛体外胚胎产业化生产中合理使用亚麻酸提供理论依据，科研人员研究了不同浓度的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟、早期胚胎发育的影响。分析回答： ①卵母细胞的收集和体外培养：从屠宰场水牛的卵巢中收集并处理卵母细胞，随机分成5组，分别置于不同浓度亚麻酸的培养液中，在39℃、5%CO2的培养箱中培养22～24h。 ②卵母细胞成熟判断：在显微镜下观察卵母细胞，判断其是否成熟，统计结果如表1。 ③体外受精：在受精溶液中进行体外受精后，用显微镜观察判断是否完成受精。 ④早期胚胎培养：将受精卵移入胚胎培养液中培养44～48h后检查分裂情况，每隔48h更换一次培养液，第5～9天观察囊胚发育情况，统计结果如表2。 表1亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟的影响
表2亚麻酸对水牛早期胚胎发育的影响
（1）步骤①中，细胞培养箱中加5%CO2的作用是_____________。 （2）步骤②中，成熟卵母细胞内染色体的行为特征是_____________。步骤③中，判断是否受精的依据是_____________。 （3）步骤④中，受精卵经_____________（时期）发育成囊胚，培养过程定期更换培养液的目的是_____________。 （4）根据实验数据分析，亚麻酸溶液为200μmol·L-1时，对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育起_____________（促进、抑制）作用。 （5）实验结果表明，_____________μmol·L-1的亚麻酸对水牛卵母细胞体外成熟和囊胚发育都较有利，判断依据是_____________。
|
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
| 31. 难度：中等 | |
|
用下图所示的发酵装置（甲）制作果酒和果醋，在消毒后的锥形瓶中装入新鲜的葡萄汁后封闭通气口，进行自然发酵。发酵初期将温度控制在18～25℃，可见溶液中有大量气泡产生；中期可以闻到酒香；后期接种醋酸杆菌，适当升高温度并通气，酒香逐渐变成醋香。分析并回答下列问题：
（1）发酵开始时封闭通气口的原因是_____________________。与醋酸杆菌相比较，酵母菌在细胞结构上最大的特点是_______________________________。 （2）接种醋酸杆菌，需升高温度到_____℃，并且需要通气，这是因为_____________________。 （3）图乙中能表示整个发酵过程培养液pH变化的曲线是__________________。 （4）研究发现通过重离子束辐射处理啤酒酵母能获得呼吸缺陷型酵母菌菌种，在生产中可用来提高果酒的产量。 ①将经过重离子束辐射处理后的酵母菌接种到含有TTC（一种显色剂）培养基中，在此培养基中呼吸正常的酵母菌菌落呈红色，呼吸缺陷型酵母菌菌落呈白色。此培养基从用途上划分，属于_________________； ②选育出的菌种因为要频繁使用，可采用_________的方法对菌种进行保藏； ③与呼吸正常的酵母菌相比较，呼吸缺陷型酵母菌细胞内的丙酮酸可大量转化为酒精，说明其细胞代谢过程中__________被阻断，因此在啤酒工业生产中具有较高的经济价值。
|
|
| 32. 难度：中等 | |
|
回答与泡菜腌制和亚硝酸盐测定有关的问题。 （1）制作泡菜时，为缩短发酵周期，腌制前可加入____菌。取少量酸奶，用无菌蒸馏水稀释后，再用____________蘸取少量的稀释液，在该菌专用培养基的平板上划线，以获得该菌单菌落。下图所示的划线分离操作，正确的是_____________。
（2）泡菜腌制过程中，有时会长一层白膜，这层白膜是由于_______菌繁殖而产生的。 （3）泡菜在腌制过程中会产生亚硝酸盐，亚硝酸盐对人体有害，为测定泡菜中亚硝酸盐含量，从泡菜中提取亚硝酸盐，与_________发生重氮化反应，再与N-l-萘基乙二胺偶联，形成玫瑰红色产物。然后与________比对，计算样品中亚硝酸盐的含量。 （4）已知乳酸菌中的亚硝酸还原酶能降解亚硝酸盐。在一定的腌制时间内，随着腌制时间的延长，泡菜中亚硝酸盐含量逐渐降低，是由于在厌氧和_________环境下亚硝酸盐被亚硝酸还原酶降解。
|
|
