| 1. 难度：中等 | |
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下列叙述符合基因工程概念的是（ ） A.B淋巴细胞与肿瘤细胞融合，杂交瘤细胞中含有B淋巴细胞中的抗体基因 B.将人的干扰素基因重组到质粒后导入大肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株 C.用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株 D.自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后其DNA整合到细菌DNA上
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| 2. 难度：简单 | |
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下列有关限制性核酸内切酶的说法，正确的是（ ） A.限制酶主要是从真核生物中分离出来的 B.限制酶的识别序列只能由6个核苷酸组成 C.限制酶能识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开 D.限制酶切割产生的DNA片段末端都为黏性末端
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| 3. 难度：中等 | |
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下图表示从细菌中获取目的基因的两种方法，以下说法中错误的是（ ）
A.甲方法可建立基因组文库 B.乙方法可建立cDNA 文库 C.甲方法要以核苷酸为原料 D.乙方法需要逆转录酶参与
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| 4. 难度：简单 | |
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多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述若干次循环：95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性（引物与DNA模板链结合）→72℃下引物链延伸（形成新的脱氧核苷酸链）。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是 A.变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，也可利用解旋酶实现 B.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成 C.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸 D.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高
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| 5. 难度：中等 | |
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小鼠杂交瘤细胞表达的单克隆抗体用于人体试验时易引起过敏反应，为了克服这个缺陷，可选择性扩增抗体的可变区基因（目的基因）后再重组表达。下列相关叙述不正确的是（ ） A.设计扩增目的基因的引物时必须与表达载体的序列相配对 B.用PCR方法扩增目的基因时不必知道基因的全部序列 C.PCR体系中一定要添加从受体细胞中提取的DNA聚合酶 D.一定要根据目的基因编码产物的特性选择合适的受体细胞
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| 6. 难度：中等 | |
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为了增加菊花花色类型，研究者从其他植物中克隆出花色基因C（图1），拟将其与质粒（图2）重组，再借助农杆菌导入菊花中。
下列操作与实验目的不符的是（ ） A.用限制性核酸内切酶EcoR I和DNA连接酶构建重组质粒 B.用含C基因的农杆菌侵染菊花愈伤组织，将C基因导入细胞 C.在培养基中添加卡那霉素，筛选被转化的菊花细胞 D.用DNA分子杂交方法检测C基因是否整合到菊花染色体上
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| 7. 难度：中等 | |
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用XhoI和SalI两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是（ ）
A.如图中两种酶识别的核苷酸序列不同 B.如图中酶切产物可用于构建重组DNA C.泳道①中是用SalI处理得到的酶切产物 D.图中被酶切的DNA片段是单链DNA
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| 8. 难度：中等 | |
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为达到相应的目的，必须通过分子检测的是 A.携带链霉素抗性基因受体菌的筛选 B.产生抗人白细胞介素-8抗体的杂交瘤细胞的筛选 C.转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定 D.21三体综合征的诊断
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| 9. 难度：中等 | |
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在应用农杆菌侵染植物叶片获得转基因植株的常规实验步骤中，不需要的是（ ） A.用携带目的基因的农杆菌侵染植物细胞 B.用选择培养基筛选导入目的基因的细胞 C.用聚乙二醇诱导转基因细胞的原生质体融合 D.用适当比例的生长素和细胞分裂素诱导愈伤组织生芽
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| 10. 难度：中等 | |
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目的基因导入受体细胞后，是否可以稳定维持和表达其遗传特性，只有通过鉴定与检测才能知道。下列属于目的基因检测和鉴定的是( ) ①检测受体细胞中是否有目的基因 ②检测受体细胞中是否有致病基因 ③检测目的基因是否转录出了mRNA ④检测目的基因是否翻译成蛋白质 A.①②③ B.②③④ C.①③④ D.①②④
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| 11. 难度：简单 | |
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ada（酸脱氨酶基因）通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述正确的是（ ） A.每个大肠杆菌细胞只含一个重组质粒 B.每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C.每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada D.每个人的ada只表达一个腺苷酸脱氨酶分子
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| 12. 难度：中等 | |
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利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如图所示，下列叙述正确的是（ ）
A.过程①需使用逆转录酶 B.过程②需使用解旋酶和PCR获取目的基因 C.过程③使用的感受态细胞可用NaCl溶液制备 D.过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已导入受体细胞
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| 13. 难度：中等 | |
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在用基因工程技术构建抗除草剂的转基因烟草过程中，下列操作错误的是 A. 用限制性核酸内切酶切割烟草花叶病毒的核酸 B. 用DNA连接酶连接经切割的抗除草剂基因和载体 C. 将重组DNA分子导入烟草原生质体 D. 用含除草剂的培养基筛选转基因烟草细胞
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| 14. 难度：中等 | |
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某研究小组为了研制预防甲型H1N1流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图所示，则下列有关叙述错误的是（ ）
A.步骤①所代表的过程是逆转录 B.步骤②需使用限制性核酸内切酶和RNA连接酶 C.步骤③可用CaC12溶液处理大肠杆菌，使其处于感受态 D.检验H蛋白的免疫反应特性，可用S蛋白与甲型H1N1流感康复病人的血清进行抗原-抗体特异性反应
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| 15. 难度：简单 | |
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科学家为提高玉米中赖氨酸的含量，计划将天冬氨酸激酶的第352位的苏氨酸变成异亮氨酸，将二氢吡啶二羧酸合成酶中104位的天冬酰胺变成异亮氨酸，变化后就可以使玉米叶片和种子中的游离赖氨酸含量分别提高5倍和2倍，该生物技术为（ ） A.基因工程 B.蛋白质工程 C.诱变育种 D.细胞工程
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| 16. 难度：中等 | |
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从某海洋动物中获得一基因，其表达产物为一种抗菌体和溶血性均较强的多肽P1。目前在P1的基础上研发抗菌性强但溶血性弱的多肽药物，首先要做的是 A.合成编码目的肽的DNA片段 B.构建含目的肽DNA片段的表达载体 C.依据P1氨基酸序列设计多条模拟肽 D.筛选出具有优良活性的模拟肽作为目的肽
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| 17. 难度：中等 | |
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以下能说明细胞具有全能性的实验是（ ） A.扦插的月季枝条生根后长成的月季植株 B.用矮秆抗病小麦种子培育出的小麦植株 C.给去核蛙卵植入体细胞核后又发育成正常的蝌蚪 D.将转入抗虫基因的棉花细胞培育的棉花植株
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| 18. 难度：中等 | |
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下列有关植物组织培养的叙述，正确的是( ) A.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞 B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株 C.用人工薄膜将胚状体、愈伤组织等分别包装可制成人工种子 D.植物耐盐突变体可通过添加适量NaCl的培养基培养筛选而获得
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| 19. 难度：中等 | |
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下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是（ ） A.表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得 B.表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原（起）点 C.借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来 D.启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用
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| 20. 难度：简单 | |
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下列动物细胞培养过程中属于原代培养的是( ) A.用胰蛋白酶使组织分散成单个细胞的过程 B.从机体取得细胞后立即进行培养的过程 C.出现接触抑制现象后取下的细胞的培养过程 D.哺乳动物细胞在培养基中的悬浮生长过程
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| 21. 难度：中等 | |
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关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，错误的是 A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基不同 B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶 C.烟草叶片离体培养能产生新个体，小鼠杂交瘤细胞可离体培养增殖 D.动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖培养可用于植物脱除病毒
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| 22. 难度：中等 | |
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如图为细胞融合的简略过程(只考虑两个细胞的融合)。若A、B分别是基因型为Hhrr、hhRr的两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上，由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800 lx时，都不能增殖。下列叙述中正确的是( )。
①实验开始时必须用纤维素酶和果胶酶除去不利于原生质体融合的物质 ②实验中除了杂种细胞外，还有5种融合细胞 ③要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，可在大于800 lx光照下培养，收集增殖分化的细胞团 ④要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr或Hhrr的杂种细胞，可在大于800 lx光照下培养，收集增殖分化的细胞团 ⑤从理论上分析考虑，将融合细胞的培养液放在大于800 lx光照下培养，有5种融合细胞不能增殖分化 A.①②③⑤ B.①②③ C.①③④⑤ D.①③⑤
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| 23. 难度：简单 | |
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将携带抗M基因、不带抗N基因的鼠细胞去除细胞核后，与携带抗N基因、不带抗M基因的鼠细胞融合，获得的胞质杂种细胞具有M、N两种抗性。该实验证明了（ ） A.该胞质杂种细胞具有全能性 B.该胞质杂种细胞具有无限增殖能力 C.抗M基因位于细胞质中 D.抗N基因位于细胞核中
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| 24. 难度：中等 | |
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下列有关细胞工程的叙述，正确的是（ ） A.PEG是促细胞融合剂，可直接诱导植物细胞融合 B.用原生质体制备人工种子，要防止细胞破裂 C.骨髓瘤细胞经免疫处理，可直接获得单克隆抗体 D.核移植克隆的动物，其线粒体DNA来自供卵母体
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| 25. 难度：中等 | |
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如图为细胞融合的示意图，下列叙述不正确的是（ ）
A.若a细胞和b细胞是植物细胞，需先去壁再诱导融合 B.a细胞和b细胞之间的融合需要促融处理后才能实现 C.c细胞的形成与a、b细胞膜的流动性都有关 D.c细胞将同时表达a细胞和b细胞中的所有基因
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| 26. 难度：简单 | |
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下列关于体细胞克隆的叙述中，错误的是 A.供体为体细胞的细胞核 B.受体为去核卵母细胞 C.细胞核移植是体细胞克隆的关键步骤 D.克隆出的后代与供体的遗传物质和表现型完全一致
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| 27. 难度：简单 | |
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关于现代生物技术应用的叙述，错误的是（ ） A.蛋白质工程可合成自然界中不存在的蛋白质 B.体细胞杂交技术可用于克隆动物和制备单克隆抗体 C.植物组织培养技术可用于利用茎尖培育脱毒植株 D.动物细胞培养技术就可用于转基因动物的培育
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| 28. 难度：中等 | |
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下图是单克隆抗体制备流程的简明示意图。下列有关叙述，正确的是
A.①是从已免疫的小鼠脾脏中获得的效应T淋巴细胞 B.②中使用胰蛋白酶有利于杂交瘤细胞的形成 C.③同时具有脾脏细胞和鼠骨髓瘤细胞的特性 D.④是经筛选培养获得的能分泌特异性抗体的细胞群
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| 29. 难度：中等 | |
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利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是 A.用纯化的核衣壳蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B.体外培养单个效应B细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体 C.将等量效应B细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞 D.利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者
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| 30. 难度：中等 | |
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生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述，错误的是 A.应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质 B.当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验，但不反对治疗性克隆 C.反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿 D.生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力
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| 31. 难度：中等 | |
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动物细胞融合和植物体细胞杂交技术的比较中，正确的是（ ） A.诱导融合的方法完全相同 B.所用的技术手段基本相同 C.培养基成分相同 D.都能形成杂种细胞
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| 32. 难度：中等 | |
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2015年2月3日，英国议会院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。
据图分析，下列叙述错误的是（ ） A.该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代 B.捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿 C.三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核 D.三亲婴儿的培育还需要早期环胎培养和胚胎移植等技术
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| 33. 难度：中等 | |
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精子内的顶体由来自高尔基体的溶酶体特化而来，精卵识别后，顶体膜与精子细胞膜融合，释放溶酶体酶(顶体酶)使卵子外层形成孔洞，以利于精卵融合形成受精卵，下列叙述正确的是（ ） A.顶体内储存的溶酶体酶是在精子的溶酶体中合成的 B.精子游向卵子所需的能量来自线粒体和细胞质基质 C.顶体膜和精子细胞膜融合体现生物膜的选择透过性 D.受精卵中的遗传物质一半来自父方另一半来自母方
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| 34. 难度：中等 | |
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大部分有性生殖的动物，进行的都是体内受精，受精卵在母体内孕育成一个新个体。下列关于体内受精和早期胚胎发育的叙述，正确的是（ ） A.同种动物的雄性个体和雌性个体进行减数分裂的时期差不多 B.防止多精入卵的第一道屏障是卵细胞膜反应，第二道屏障是透明带反应 C.一般情况下，卵细胞膜内可以有多枚精子，透明带只能有一枚精子 D.早期胚胎细胞的分化最早出现在囊胚期
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| 35. 难度：简单 | |
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下列关于胚胎工程的叙述，错误的是（ ） A.体外受精是指获能的精子和成熟的卵子在相应溶液中受精 B.受精卵发育到原肠胚阶段才能进行胚胎移植 C.早期胚胎培养与动物细胞培养的培养液通常都需加入血清 D.试管婴儿技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术
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| 36. 难度：中等 | |
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印度沙漠猫是一种珍稀猫科动物,通过胚胎工程技术,可以让家猫代孕而繁育,主要步骤如图所示。下列相关叙述正确的是( )
A.步骤甲、乙分别是指精子获能、胚胎分割 B.诱导超数排卵所注射的激素只能作用于特定细胞 C.受精卵发育成早期胚胎所需营养主要来源于培养液 D.步骤甲使用的培养液和早期胚胎培养液成分基本相同
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| 37. 难度：中等 | |
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十年前两个研究小组几乎同时发现，将四个特定基因导入处于分化终端的体细胞（如成纤维细胞等）中，可诱导其形成具有胚胎干细胞样分化潜能的诱导性多能干细胞。这项先进技术的潜在应用前景是 A.改造和优化人类基因组结构 B.突破干细胞定向分化的障碍 C.解决异体组织/器官排斥难题 D.克隆具有优良品质的动物个体
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| 38. 难度：中等 | |
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牛雄性胚胎中存在特异性H-Y 抗原，可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y 单克隆抗体，筛选胚胎进行移植，以利用乳腺生物反应器进行生物制药。下列相关叙述正确的是 A.H-Y 单克隆抗体由骨髓瘤细胞分泌 B.应选用原肠胚做雌雄鉴别 C.鉴别后的雄性胚胎可直接做胚胎移植 D.用H-Y 抗原免疫母牛可获得相应抗体
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| 39. 难度：中等 | |
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下列关于小鼠体外受精及胚胎发育的叙述，错误的是（ ） A.精子在获能液中培养的目的是使精子获能 B.小鼠在特定光控周期条件下饲养，注射相关激素有促进超数排卵的作用 C.分割的胚胎细胞有相同的遗传物质，因此发育成的个体没有形态学差异 D.注射到囊胚腔中的胚胎干细胞可以参与个体器官的发育
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| 40. 难度：中等 | |
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下列关于采用胚胎工程技术实现某良种肉用牛快速繁殖的叙述，正确的是（ ） A.采取激素注射等方法对良种母牛作超数排卵处理 B.体外培养发育到原肠胚期的胚胎即可进行移植 C.使用免疫抑制剂以避免代孕牛对植入胚胎的排斥反应 D.利用胚胎分割技术，同卵多胎较同卵双胎成功率更高
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| 41. 难度：困难 | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
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玉米自交系（遗传稳定的育种材料）B具有高产、抗病等优良性状，但难以直接培育成转基因植株，为使其获得抗除草剂性状，需依次进行步骤Ⅰ、Ⅱ试验。 Ⅰ、获得抗除草剂转基因玉米自交系A，技术路线如图。
（1）为防止酶切产物____________________，构建基因表达载体需用2种限制酶。 （2）下表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。据表可知，细胞脱分化时使用的激素是__________，自交系__________的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体。
（3）农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选转化的愈伤组织，需使用含____________________的选择培养基。 （4）转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化的愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用K分别处理以下愈伤组织，出现蓝色的是____________________和_________________________。 （5）组织培养获得的转基因植株（核DNA中仅插入一个G基因）进行自交，在子代含G基因的植株中，纯合子占__________。继续筛选，最终选育出抗除草剂纯合自交系A。 Ⅱ．通过回交使自交系B获得抗除草剂性状 （6）抗除草剂自交系A（GG）与自交系B杂交产生F1，然后进行多轮回交（下图）。自交系B作为亲本多次回交的目的是使后代积累越来越多______________________。
（7）假设子代生活力一致，上图育种过程H3代中含G基因植株的比例是__________，若回交后每代不进行鉴定筛选，直接回交，H3代中含G基因植株的比例是__________。 （8）下表是鉴定含G基因植株的4种方法。请预测同一后代群体中，4种方法检出的含G基因植株的比例最小的是__________。
（9）利用PCR技术扩增目的基因，其原理与细胞内DNA复制类似（如下图所示）。图中引物为单链DNA片段，它是子链合成延伸的基础。
①第__________轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段。 ②在PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为____________________________。
（10）对Hn继续筛选，最终选育出高产、抗病、抗除草剂等优良性状的玉米自交系。
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| 42. 难度：中等 | |
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回答有关乳腺生物反应器问题。 Ⅰ．人组织纤溶酶原激活物（htPA）是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：
（1）htPA基因与载体用同种__________切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用_______________________技术。 （2）为获取更多的卵（母）细胞，要对供体母羊注射促性腺激素，使其__________。采集的精子需要经过__________，才具备受精能力。 （3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是__________。为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行____________。移植后对受体母羊还需进行____________的检查。利用胚胎分割和胚胎移植技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的____________。 （4）若在转ht-PA基因母羊的羊乳中检测到____________，说明目的基因成功表达。 Ⅱ．科研人员采用转基因体细胞克隆技术获得转基因绵羊，以便通过乳腺生物反应器生产人凝血因子IX医用蛋白，其技术路线如图。
（1）由过程①获得的A为________________________。 （2）在核移植之前，必须先去掉受体卵母细胞的核，目的是___________________。受体应选用____________期卵母细胞。 （3）进行胚胎移植时，代孕母羊对移入子宫的重组胚胎基本上不发生____________，这为重组胚胎在代孕母羊体内的存活提供了可能。 （4）采用胎儿成纤维细胞进行转基因体细胞克隆，理论上可获得无限个转基因绵羊，这是因为______________________________。
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