| 1. 难度：中等 | |
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无菌技术包括以下几个方面的叙述，其中正确的是 A.紫外线照射前，适量喷洒石碳酸等消毒液，可以加强消毒效果 B.高压灭菌加热结束时，打开放气阀使压力表指针回到零后，开启锅盖 C.为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 D.在微生物接种的实验中，用95%酒精对实验者的双手和超净工作台进行消毒
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| 2. 难度：简单 | |
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下列关于微生物分离和培养的叙述，错误的是 A.应根据微生物代谢类型选择合适培养基并控制好培养基的pH B.实验操作时应避免已灭菌处理的材料用具与周围物品接触 C.待培养基冷却至室温后，在酒精灯火焰附近倒平板 D.使用过的培养基应进行高压蒸汽灭菌处理后再丢弃
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| 3. 难度：中等 | |
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从土壤中分离以尿素为氮源的细菌,下列实验操作不正确的是 A.分解尿素的细菌能产生脲酶，将尿素分解产生氮气 B.将不同浓度的土壤稀释液涂布于不同平板上 C.将土壤用无菌水稀释,制备104～106稀释倍数的土壤稀释液 D.用尿素为唯一氮源、加有酚红指示剂的培养基培养尿素分解菌，指示剂变红
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| 4. 难度：简单 | |
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用酵母菌使葡萄汁产生葡萄酒，当酒精含量达到12%～16%时，发酵就停止了。有关解释不正确的是（ ） A.酒精对酵母菌有毒害作用 B.营养物质因消耗而不足 C.产物积累使pH发生改变 D.氧气过少导致其无法呼吸
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| 5. 难度：简单 | |
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下列有关植物组织培养的叙述中，正确的是（ ） A.愈伤组织是一团有特定结构和功能的薄壁细胞 B.二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到正常繁殖的纯种植株 C.植物组织培养过程中要注意保持材料用具等无菌 D.同一株绿色开花植株不同部位的细胞得到的组培苗基因型一定相同
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| 6. 难度：简单 | |
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胚胎移植技术已在畜牧业生产中得到广泛的应用。下列说法，错误的是（ ） A.胚胎移植可充分发挥优良母牛的繁殖潜力，一年内可得到几头甚至几十头良种牛犊 B.应用胚胎移植可使母牛提高生产能力 C.应用胚胎移植可以代替种畜的引进，丰富品种资源 D.胚胎移植可在畜牧业生产中产生新的品种，改良品种资源
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| 7. 难度：中等 | |
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下列部分酶功能的叙述正确的是( ) A.DNA聚合酶与RNA聚合酶催化的底物都是游离的脱氧核苷酸 B.DNA连接酶能将游离的脱氧核苷酸遂一连接起来，形成一个完整的DNA分子 C.基因工程整个过程与RNA聚合酶无关 D.限制性核酸内切酶和DNA水解酶都能断裂磷酸二酯键
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| 8. 难度：中等 | |
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某科学家从细菌中分离出耐高温淀粉酶(Amy)基因a，通过基因工程的方法，将a转到马铃薯植株中，经检测发现Amy在成熟块茎细胞中存在，下列说法不正确的是 A. 基因a要导入马铃薯某细胞中需要限制性核酸内切酶，DNA连接酶和运载体等工具 B. 基因工程中使用的酶都能够识别特定的碱基序列 C. 导入的对象可以是马铃薯的受精卵也可以是马铃薯的体细胞 D. 目的基因进入受体细胞后可随着马铃薯的DNA分子的复制而复制，传给子代细胞
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| 9. 难度：中等 | |
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下列关于转基因生物安全性的叙述，错误的是 ( ) A.种植转基因作物应与传统农业种植区隔离 B.种植转基因作物有可能因基因扩散而影响野生植物的多样性 C.转基因作物被动物食用后，目的基因会转入动物体细胞中 D.转基因植物的目的基因可能转入根际微生物
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| 10. 难度：中等 | |
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下列关于现代生物工程技术应用安全性评价的叙述中，正确的是 A.由于存在生殖隔离，大量种植转基因抗除草剂农作物不存在安全性问题 B.转基因的受体细胞通常限制在遗传上有特定缺陷的生物上 C.中国政府不反对治疗性克隆，可以有限制地进行生殖性克隆研究 D.在任何情况下都不发展、不生产生物武器，但可储存少量的生物武器用于研究
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| 11. 难度：简单 | |||||||||||||||||||
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如表为某培养基的配方，下列有关叙述正确的是（ ）
A.此培养基是天然鉴别培养基 B.能在此培养基上生长的大肠杆菌，拟核上有抗青霉素的基因 C.此培养基可以用于选育转基因大肠杆菌菌种的基因工程的操作过程中 D.此培养基可以用来检测自来水中细菌含量是否符合饮用水标准
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| 12. 难度：简单 | |
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分离土壤中分解尿素菌的实验操作中，对于获得纯化的尿素分解菌的单菌落影响最大的是（ ） A.制备浸出液的土壤取自土壤的表层 B.涂布前涂布器未在酒精灯外焰上灼烧灭菌 C.牛肉膏蛋白胨培养基中添加尿素作为氮源 D.接种操作者的双手未用酒精棉进行消毒
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| 13. 难度：中等 | |
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科研人员利用实验室保存的酵母及市场上出售的面包酵母菌种，设计了相关实验，成功培育出能在－20℃条件下冷冻保存56 d，存活率达到90%以上的耐冻性面包酵母菌菌种。下列有关叙述错误的是（ ） A.酵母菌能利用蛋白胨作为碳源与氮源 B.在配制培养基时可选择添加适宜种类和浓度的抗生素 C.应将不同来源的菌株接种到培养液后置于－20℃条件下冷冻保存56 d D.应采用稀释涂布平板法和平板划线法分别测定冷冻培养前后的活菌数
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| 14. 难度：中等 | |
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如图为分离和纯化分解甲醛细菌的实验过程，其中LB培养基能使菌种成倍扩增，以下说法正确的是
A.需要对活性污泥作灭菌处理 B.②中LB培养基应以甲醛为唯一碳源 C.目的菌种异化作用类型为厌氧型 D.经⑤处理后，应选择瓶中甲醛浓度最低的一组进一步纯化培养
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| 15. 难度：简单 | |
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微生物培养过程中，要十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染。请分析下列操作，其中错误的是（ ） ①煮沸消毒可以杀死微生物细胞和一部分芽孢 ②接种操作要在酒精灯火焰附近进行 ③家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌 ④培养基要进行高压蒸汽灭菌 ⑤加入培养基中的指示剂或染色剂不需要灭菌 A.①② B.②④ C.②⑤ D.③⑤
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| 16. 难度：简单 | |
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下面是果酒和果醋制作的实验流程和某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。下列相关叙述中，错误的是
A.冲洗葡萄时不能次数过多，否则果酒的制作会失败 B.根据图1可知，利用葡萄制作果醋时，必须先进行酒精发酵然后再进行果醋发酵 C.图2中的装置中排气口弯曲可防止被空气中的杂菌污染 D.制作果酒要关闭充气口、打开排气口，制作果醋时充气口和排气口都要打开
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| 17. 难度：中等 | |
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20世纪70年代，以植物细胞克隆为代表的细胞工程诞生。随后，植物花药培养、原生质体培养、以及植物体细胞杂交技术得以确立和发展，标志着植物细胞工程技术进入了高速发展的阶段。下列有关说法正确的是 A.在胡萝卜组织培养过程中，愈伤组织的培养过程只需要灭菌和适温恒温的条件 B.在培养基中加入如牛黄酸、丁酰环腺苷酸等分化诱导因子后，培育一段时间，胡萝卜的愈伤组织就可以诱导出试管苗 C.在进行植物体细胞杂交之前，必须先利用蛋白酶去除细胞壁，获得原生质体 D.进行原生质体融合化学法一般是用聚乙二醇作为诱导剂来诱导细胞融合
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| 18. 难度：中等 | |
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治疗性克隆有望最终解决供体器官的短缺和器官移植出现的排异反应。下图表示治疗性克隆的过程，下列有关叙述错误的是（ ）
A.上述过程利用了动物细胞移植、动物细胞培养等技术 B.上述过程充分说明动物细胞具有全能性 C.胚胎干细胞具有发育的全能性，可从早期胚胎中分离获取 D.①、②过程都发生DNA复制，转录和翻译、
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| 19. 难度：中等 | |
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下列有关单克隆抗体的制备的叙述正确的是 A.小鼠骨髓瘤细胞染色体数为40，其B淋巴细胞的染色体数为40，融合后形成的杂交瘤细胞DNA分子数为80 B.在单克隆抗体的制备过程中，只有一次筛选 C.单克隆抗体的制备需要用到动物细胞培养，动物细胞融合和动物体细胞核移植等技术 D.B淋巴细胞与骨髓瘤细胞经细胞融合后有三种细胞类型（若仅考虑两两融合的情况）
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| 20. 难度：中等 | |
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下图为科学家在实验室中培养“人造牛肉”的简要过程。相关叙述正确的是（ ）
A.用胃蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞 B.生物反应器中应充以95%空气加5%CO2的混合气体，CO2 的作用是刺激细胞的呼吸 C.培养液中的支架提供了更多的细胞吸附面积，有利于细胞贴壁生长 D.“人造牛肉”的培养有利于牛肉的工厂化生产，但环境污染严重
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| 21. 难度：中等 | |
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哈佛大学的干细胞研究人员称他们以人类胚胎干细胞作为起点，第一次生成了满足细胞移植和医药用途所需的、能大量生成胰岛素的β细胞，这些细胞在大多数方面都与功能正常的β细胞相当。下列相关叙述不正确的是（ ） A.人体内干细胞数量相对较少，其保留增殖和分化的能力 B.β细胞内具有控制胰高血糖素合成的直接模板及相关基因 C.胚胎干细胞转化成β细胞时，细胞内的遗传信息不变 D.人类胚胎干细胞在增殖过程中细胞内染色体数可达到92条
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| 22. 难度：中等 | |
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下列有关基因工程的叙述，正确的是 A.用反转录法合成胰岛素基因时只能从胰岛B细胞中提取相关的模板 B.载体上的标记基因能促进目的基因在受体细胞中的表达 C.限制酶和DNA聚合酶是基因工程中常用的两类工具酶 D.目的基因导入受体细胞后，引起受体细胞的变异属于染色体变异
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| 23. 难度：中等 | |
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腺苷酸脱氨酶(ADA)基因缺陷症是一种免疫缺陷病，对患者采用基因治疗的方法是：取出患者的白细胞，进行体外培养时转入正常ADA基因，再将这些白细胞注射入患者体内，使其免疫功能增强，能正常生活。下列有关叙述中，正确的是 A. 正常ADA基因替换了患者的缺陷基因 B. 正常ADA基因通过控制ADA的合成来影响免疫功能 C. 白细胞需在体外培养10代以后再注射入患者体内 D. 腺苷酸脱氨酶(ADA)基因缺陷症属于获得性免疫缺陷病
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| 24. 难度：中等 | |
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关于蛋白质工程的说法，错误的是（） A.蛋白质工程能定向改造蛋白质分子的结构，使之更加符合人类需要 B.蛋白质工程是在分子水平上对蛋白质分子直接进行操作，定向改变分子结构 C.蛋白质工程能产生出自然界中不曾存在过的新型蛋白质分子 D.蛋白质工程与基因工程密不可分，又被称为第二代基因工程
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| 25. 难度：中等 | |
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生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述，错误的是 A.应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质 B.当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验，但不反对治疗性克隆 C.反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿 D.生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力
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| 26. 难度：中等 | ||||||||||||||||||||||||||
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自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请回答有关问题。 （1）为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用__________的培养基进行分离，这种培养 基属于__________培养基（按功能分类）。可在培养基中加入__________指示剂鉴别该类微生物。 （2）若取土样7g，应加入__________mL的无菌水配制成稀释10 倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成101～107不同浓度的土壤溶液。将103～107倍的稀释液分别吸取0.2 mL加入到固体培养基上，用涂布器将菌液铺平，每个稀释度下至少涂布3个平板，这种接种方法称为__________。将接种的培养皿放置在37℃恒温培养箱中培养24～48 h，观察并统计菌落数，结果如下表，其中__________倍的稀释比较合适，由此计算出每克土壤中的菌落数为__________。
（3）这种方法测定的菌落数往往比活菌的实际数目___（低/高），原因是__________。 （4）若研究尿素分解菌的群体生长规律，可采用平板划线法分离土壤中的尿素分解菌。操作时，接种环通过__________灭菌（无菌技术），在第二次及以后划线时，总是从上一次的未端开始划线。这样做的目的是__________。
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| 27. 难度：中等 | |
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如图是传统发酵技术的部分制作装置及操作步骤示意图。请据图回答下列问题：
（1）A和B装置中，适用于果醋制作的是__________，判断的理由是__________。 （2）在葡萄酒的自然发酵过程中，酵母菌主要来源于_____。葡萄汁发酵后是否有酒精产生，可以用__________来检验。在酸性条件下，该物质与酒精反应呈现__________色。 （3）醋酸菌是一种好氧细菌，只有当条件适宜时，才能进行旺盛的生理活动。当__________都充足时，醋酸菌可直接有氧酵解生成醋酸；在某种条件下，醋酸菌可将乙醇变为__________，再进一步转变为醋酸。 （4）进行果酒制作时，A装置中的发酵液不能装满，从微生物代谢的角度分析原因是______________________________，该发酵需要的温度条件是__________℃。 （5）C是制作__________的装置，其中在发酵坛盖沿上加水的目的是__________。
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| 28. 难度：中等 | |
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人肌红蛋白（Myo）是早期诊断急性心肌梗塞的生化标志物之一。 为制备抗Myo的单克隆抗体，科研人员进行研究。 （1）科研人员以Myo作为抗原免疫小鼠，取小鼠的脾脏细胞与__________细胞诱导融合。用__________培养基筛选融合细胞，得到杂交瘤细胞。 （2）将得到的杂交瘤细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再进行抗体阳性检测并多次重复上述操作，多次重复该过程的目的是筛选获得抗Myo 抗体___________________的杂交瘤细胞。 （3）双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如下图：
固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的__________结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是__________。
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| 29. 难度：中等 | |
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中国荷斯坦奶牛是由纯种荷兰牛与本地母牛经多代杂交，长期选育而成，具有体型大、产奶量高的特点。雌性奶牛般在24月龄开始产犊，牛犊出生时体重为40 ～50 kg，母牛随即开始泌乳。和牛是世界公认的高档肉牛品种，体型较小，肉质鲜嫩，营养丰富，牛犊出生时体重为30kg左右。我国科研人员利用胚胎移植技术，按下图一所示流程操作，成功的培育了和牛这一优良品种。请回答有关问题：
（1）过程①中产生的精子需进行________处理后方有受精的能力，过程④中移植的早期胚胎处于________期。图示过程中发生基因重组的是________（填序号）。 （2）为保证和牛的品质，防止近亲繁殖，需要对和牛进行DNA 检测。目前常用“拔牛毛”的方法获取带毛囊的牛毛进行检测，而不是直接剪取牛毛进行检测，原因是_______。DNA检测首先需制备DNA荧光探针，过程如图二所示，在DNA酶I作用下产生切口，随后在DNA聚合酶I作用下，以荧光标记的_______为原料，合成荧光标记的DNA探针。 （3）牛是反刍动物，消化道并不能分泌纤维素酶，但在其瘤胃中生活着大量的微生物，可以帮助牛消化纤维素，这些微生物与牛的关系是_________。
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| 30. 难度：中等 | |
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干扰素是动物或人体细胞产生的一种糖蛋白，具有抗病毒的作用。我国科学家成功地把人的干扰素基因“嫁接”到了烟草的DNA分子上，使烟草获得了抗病毒能力。请回答下列问题： （1）科学家欲从人淋巴细胞的DNA中获取干扰素基因，此时需要用到_________酶进行切割。利用PCR技术扩增干扰素基因时，进行n次循环的扩增，第n次时理论上至少需要______个引物。 （2）获得干扰素基因后，要构建基因表达载体，此时需要________酶把干扰素基因与质粒连接起来。一个基因表达载体的组成，除了目的基因外，还必须要有________以及标记基因等，其中标记基因的作用是___________。 （3）将含有干扰素基因的基因表达载体导入烟草细胞中，常用的方法是__________。将干扰素基因导入烟草细胞后，要检测______________，这是干扰素基因能否在烟草细胞中稳定遗传的关键。 （4）如何检测培育的转干扰素基因烟草是否具有抗病毒能力?______________。
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| 31. 难度：中等 | |
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某生物兴趣小组开展DNA粗提取的相关探究活动。具体步骤如下： 材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10 g。剪碎后分成两组，一组置于20 ℃、另一组置于-20 ℃条件下保存24 h。 DNA粗提取： 步骤一：将上述材料分别放入研钵中，各加入15 mL研磨液（含洗涤剂和食盐），充分研磨。用两层纱布过滤，取滤液备用。 步骤二：先向6只小烧杯中分别注入10 mL滤液，再加入20 mL体积分数为95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。 步骤三：取6支试管，分别加入等量的____（填溶液名称及浓度）溶液溶解上述絮状物。 步骤四：：在上述试管中各加入4 mL____试剂。混合均匀后，置于沸水中加热5 min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表：
分析上述实验过程，回答下列问题： （1）该探究性实验课题名称是_________________________________________。 （2）步骤一中研磨液中洗涤剂的作用是________________，食盐的作用是_______________。 （3）步骤二中“缓缓地”搅拌，这是为了___________________，所加酒精溶液需冷却的原因之一是低温抑制_____________________的活性，可以防止DNA降解。 （4）上述实验中步骤三、步骤四的空缺分别为_______________、_______________。 （5）实验表明，_______________________获取的DNA量最多。
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