| 1. 难度：中等 | |
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下列关于限制酶的叙述，正确的是（ ） A.只有原核细胞中才有限制酶 B.限制酶能识别特定的核苷酸序列 C.限制酶识别的序列都由6个核苷酸组成 D.限制酶切割DNA分子产生的都是黏性末端
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| 2. 难度：简单 | |
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下列关于DNA连接酶的叙述，不正确的是（ ） A.制备重组DNA需要DNA连接酶 B.DNA连接酶按来源可分为E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶 C.T4DNA连接酶可连接双链DNA片段间的磷酸和核糖 D.E·coliDNA连接酶只能连接具有黏性末端的双链DNA片段
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| 3. 难度：简单 | |
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如图表示某质粒上的氨苄青霉素抗性基因（Ampr）和四环素抗性基因（Tetr），P点为目的基因插入位点，则成功导入目的基因的重组质粒（ ）
A.既能在含氨苄青霉素培养基上生存，也能在含四环素培养基上生存 B.能在含氨苄青霉素培养基上生存，不能在含四环素培养基上生存 C.不能在含氨苄青霉素培养基上生存，能在含四环素培养基上生存 D.既不能在含氨苄青霉素培养基上生存，也不能在含四环素培养基上生存
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| 4. 难度：中等 | |
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下列有关基因工程的叙述，不正确的是（ ） A.重组DNA分子的构建在体内进行 B.基因工程能使生物产生定向变异 C.目的基因主要是编码蛋白质的结构基因 D.基因工程能打破物种间的界限
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| 5. 难度：中等 | |
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下列关于PCR技术的叙述，错误的是（ ） A.理论上，1个DNA分子第n次循环需要引物2n个 B.PCR技术的基本原理是DNA双链复制 C.每次循环可分为变性、复性和延伸三步 D.该过程中DNA双链的解旋需要酶的催化
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| 6. 难度：中等 | |
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下图表示三种限制酶BamHⅠ、BglⅡ和MboⅠ的识别序列和切割位点，下列叙述不正确的是（ ）
A.三种限制酶作用的化学键相同 B.三种限制酶切割DNA分子后能形成相同的黏性末端 C.能被BamHⅠ或BglⅡ切割的位点也能被MboⅠ切割 D.能被MboⅠ切割的位点一定能被BamHⅠ或BglⅡ切割
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| 7. 难度：简单 | |
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下图是基因工程中基因表达载体的模式图，若结构X是表达载体所必需的，则X最可能是
A.目的基因插入位点 B.启动子 C.标记基因 D.DNA聚合酶识别位点
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| 8. 难度：中等 | |
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将鱼的抗冻蛋白基因导入番茄，有效地提高了番茄的耐寒能力。检测鱼的抗冻蛋白基因在番茄体内是否发挥功能作用的第一步是（ ） A.在试验田中观察番茄的耐寒能力 B.检测番茄的体细胞中是否存在鱼的抗冻蛋白 C.检测鱼的抗冻蛋白基因是否转录出了mRNA D.检测番茄体细胞中是否有鱼的抗冻蛋白基因
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| 9. 难度：中等 | |
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利用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如下图所示，下列叙述错误的是（ ）
A.过程①需要进行碱基互补配对 B.图中质粒的化学本质是DNA C.过程③使用的感受态细胞可通过CaCl2溶液处理获得 D.过程④只需进行DNA分子杂交即可确定是否成功获得了“工程菌”
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| 10. 难度：中等 | |
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观察分析下图，该图表示的过程是
A.构建基因组文库 B.构建cDNA文库 C.构建基因表达载体 D.构建转基因工程菌
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| 11. 难度：中等 | |
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下图为蛋白质工程的流程图，下列说法正确的是（ ）
A.利用蛋白质工程制造出的蛋白质都是自然界本来就有的 B.蛋白质工程是一项完全摆脱基因工程技术的全新的生物工程技术 C.过程a、b分别是转录、翻译 D.蛋白质工程不可能构建出一种新的基因
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| 12. 难度：中等 | |
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下列关于动物细胞培养和植物组织培养的叙述，不正确的是（ ） A.二者所用培养基基本相同 B.二者都需要无菌操作条件 C.二者依据的生物学原理不同 D.二者培养的细胞都能进行有丝分裂
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| 13. 难度：中等 | |
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下图表示利用棉花叶肉细胞原生质体的培养进行遗传改良的过程，下列分析不正确的是（ ）
A.过程①的目的是去除细胞壁 B.过程②有可能使原生质体内的染色体数目发生改变 C.过程③进行了细胞增殖 D.过程④用比例不同的生长素和细胞分裂素处理后得到的结果相同
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| 14. 难度：中等 | |
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植物组织培养技术是植物细胞工程的基础技术之一，下列生产实践不需要依赖植物组织培养技术的是（ ） A.利用单倍体育种技术培育出单育1号烟草 B.利用杂交育种技术培育出高产抗病小麦 C.利用转基因技术培育出抗棉铃虫的棉花 D.利用体细胞杂交技术培育出白菜—甘蓝
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| 15. 难度：中等 | |
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下列有关植物体细胞杂交的叙述，正确的是（ ） A.植物体细胞杂交的结果是获得杂种植株 B.植物体细胞杂交属于有性生殖 C.植物体细胞杂交产生的杂种植株的变异类型属于基因重组 D.植物体细胞杂交技术的原理是细胞膜的流动性
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| 16. 难度：简单 | |
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将三色紫罗兰的蓝色素基因（B）转入白玫瑰，培育出花瓣呈现自然蓝色的新品种蓝玫瑰，快速繁殖新品种蓝玫瑰可采用植物组织培养技术，此时选用的蓝玫瑰外植体最好是（ ） A.叶片 B.花瓣 C.茎尖 D.茎段
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| 17. 难度：中等 | |
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如图表示人工种子的结构，下列说法不正确的是（ ）
A.①表示人工种皮、②表示愈伤组织 B.③可表示人工胚乳或子叶 C.人工种子能保持亲本的优良性状 D.人工种子在适宜条件下能萌发成幼苗
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| 18. 难度：中等 | |
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下列有关动物细胞工程的叙述，不正确的是 A.培养的动物细胞可用于检测有毒物质 B.体细胞核移植技术能用于治疗人类某些疾病 C.克隆动物的产生主要通过核移植实现 D.克隆动物的遗传物质来自供体细胞核
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| 19. 难度：简单 | |
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将三倍体鲫鱼的肾脏细胞核移植到二倍体鲫鱼的去核卵细胞内，培养获得的克隆鱼 A.是二倍体 B.遗传物质来自于二倍体鲫鱼 C.高度不育 D.性状与三倍体鲫鱼完全相同
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| 20. 难度：简单 | |
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下列关于对某种动物的肝肿瘤细胞进行培养的叙述，错误的是（ ） A.制备肝肿瘤细胞悬液时，可用纤维素酶处理肿瘤组织块 B.培养时所需要的营养物质应与体内基本相同 C.进行细胞体外培养时，其适宜温度一般与动物的体温相近 D.细胞培养应在含95%空气加5%CO2的混合气体的恒温培养箱中进行
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| 21. 难度：中等 | |
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制备抗埃博拉病毒单克隆抗体的简要过程如下图所示，该过程的细胞①~细胞④中，不具有无限增殖能力的是（ ） 给小鼠注射vp40蛋白（埃博拉病毒的组成蛋白）→从小鼠脾脏中获取细胞①→诱导细胞①与小鼠的细胞②融合→筛选出细胞③→克隆化培养和抗体检测，获得细胞④ A.细胞① B.细胞② C.细胞③ D.细胞④
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| 22. 难度：中等 | |
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实验小鼠皮肤细胞培养的基本过程如下图所示。下列叙述错误的是（ ）
A.甲过程一般是在幼龄的实验小鼠体内取皮肤组织 B.乙过程需要将获得的皮肤细胞制成细胞悬液 C.丙过程是原代培养，细胞会贴壁生长 D.丁过程是传代培养，细胞都不能保持二倍体核型
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| 23. 难度：中等 | |
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下列关于卵子的发生的叙述，正确的是（ ） A.减数第一次分裂和减数第二次分裂是连续发生的 B.减数第二次分裂是在精子和卵子结合的过程中完成的 C.减数第一次分裂是在雌性动物排卵之后发生的 D.一个卵原细胞通过减数分裂可形成四个卵子
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| 24. 难度：中等 | |
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图是牛囊胚示意图，有关叙述不正确的是
A.透明带能阻止多精入卵 B.囊胚腔是一个充满液体的腔 C.内细胞团将来分化成内胚层 D.滋养层将来发育成胎膜和胎盘
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| 25. 难度：中等 | |
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下列关于哺乳动物受精作用的叙述，正确的是（ ） A.精子在睾丸中完成“获能”后才能参与受精 B.刚排出的卵子是次级卵母细胞 C.排出的卵子需培养成熟后才能参与受精 D.受精过程主要包括精子穿越放射冠和透明带、进入卵细胞膜、囊胚的形成
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| 26. 难度：中等 | |
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下列关于体内受精的顺序排列正确的是 ①第一次卵裂开始 ②释放第二极体 ③顶体反应 ④穿越透明带 ⑤雌、雄原核的形成 ⑥两组核染色体合为一组 A.①②③④⑤⑥ B.③②④⑤⑥① C.③④②⑤⑥① D.④⑤②①③⑥
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| 27. 难度：中等 | |
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下图表示高等动物的个体发育过程，下列说法正确的是（ ）
A.图中过程①和过程②均在子宫中完成 B.受精卵形成囊胚的过程中，要进行有丝分裂和减数分裂 C.原肠胚随分化程度的升高，细胞的全能性不断升高 D.图中性成熟的个体是通过有性生殖获得的
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| 28. 难度：简单 | |
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雄性哺乳动物通过减数分裂形成的精细胞需要经过变形，才能形成精子，这一过程不包括（ ） A.细胞核变为精子头部的主要部分 B.高尔基体发育为精子头部的顶体 C.中心体演变为精子的尾部 D.线粒体浓缩成原生质滴集中在精子尾的基部
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| 29. 难度：中等 | |
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下列有关现代生物技术的叙述，不正确的是（ ） A.用基因枪法可将目的基因导入单子叶植物中 B.克隆动物的成功培育，说明动物细胞具有全能性 C.异体间器官移植面临的难题之一是免疫排斥反应 D.动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础
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| 30. 难度：中等 | |
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下列有关叙述错误的是（ ） A.基因探针与转基因细胞的基因组DNA杂交后，若显示出杂交带，则表明目的基因导入成功 B.植物体细胞杂交过程中，杂种细胞形成细胞壁标志着原生质体融合成功 C.利用体细胞杂交技术培育出了白菜-甘蓝，说明白菜与甘蓝不存在生殖隔离 D.若在卵细胞膜与透明带之间观察到了两个极体，则标志着卵母细胞已受精
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| 31. 难度：中等 | |
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科学家借用慢病毒将正常的血红蛋白基因导入患者的造血干细胞，再将“纠正”基因后的造血干细胞回输至患者体内，使其体内部分造血干细胞能长期合成正常的血红蛋白，达到治疗镰刀型细胞贫血症的目的。请回答下列问题： （1）镰刀型细胞贫血症是血红蛋白基因的某一处序列CCTGAGG突变为CCTGTGG而导致的一种疾病。MstⅡ酶能识别并切割序列CCTGAGG，用MstⅡ酶处理异常的血红蛋白基因可得到3个DNA片段，那么用MstⅡ酶处理正常的血红蛋白基因会得到________个DNA片段，可见该酶________（填“能”或“不能”）用于镰刀型细胞贫血症的基因诊断。 （2）要利用逆转录的方法合成血红蛋白基因，应从早幼红细胞中提取_________，在__________酶的作用下合成cDNA；与细胞中的血红蛋白基因相比，合成的cDNA没有__________、__________和内含子等。 （3）在构建能导入造血干细胞的含血红蛋白基因的表达载体过程中，以____________作为工具酶，以__________作为载体。 （4）题干所述的基因治疗方法属于___________（填“体内”或“体外”）基因治疗。
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| 32. 难度：中等 | |
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将正确的基因导入细胞以替代错误的突变基因是目前基因治疗的一种重要形式；也可借助基因编辑技术直接修复错误的基因进行基因治疗。请回答下列相关问题： （1）将正确的基因导入细胞，其核心是构建____________________。下图为进行这一核心过程的案例，该过程中需选择____________________限制酶进行酶切。
（2）如果仅已知目的基因首尾两端的部分核苷酸序列，通常可根据该基因首尾两端的已知脱氧核苷酸序列设计并合成__________，利用__________技术得到大量目的基因。 （3）为鉴定上图所示3种连接方式形成的载体，选择HpaⅠ酶和BamHⅠ酶对其进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析。若出现7300bp和200bp的两种条带，则所鉴定的是__________载体；若出现__________，则所鉴定的是载体自连载体。 （4）CRISPR/Cas9基因编辑技术可简单、准确地进行基因定点编辑：根据目的基因的部分序列设计向导RNA，向导RNA与目的基因结合后，就会引导Cas9蛋白结合于目的基因的特异性位点并进行切割，从而介导基因添加、基因删除、基因校正等。向导RNA与目的基因的结合遵循__________原则，Cas9是一种__________酶。
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| 33. 难度：中等 | |
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赖氨酸是人体必需氨基酸，具有促进人体发育、增强免疫的功能，并能起到提高中枢神经组织功能的作用。某农科所的科技人员欲通过将玉米种子的某种蛋白酶改造成“M酶”，从而大大提高玉米种子中赖氨酸的含量，以培育出高赖氨酸的玉米新品种。请回答下列问题： （1）科技人员先从“提升玉米种子中赖氨酸的含量”这一功能出发，设计预期的“M酶”的_______________，再推测出相对应的目的基因的_______________序列，最终合成出“M酶”基因。 （2）科技人员获得“M酶”基因后，常利用PCR技术在体外将其大量扩增，此过程需要一种特殊的酶是________________，原料是_______________。 （3）“M酶”基因只有插入__________，才能确保“M酶”基因在玉米细胞中得以稳定遗传。 （4）依据每个生物细胞都具有___________的原理，可将含有“M酶”基因的玉米细胞培育成转“M酶”基因的玉米植株。为了确保育种成功，科技人员需要通过测定玉米种子中_______________的含量，从____________水平加以鉴定。
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| 34. 难度：中等 | |
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马铃薯卷叶病毒是由蚜虫传播的病原体，与马铃薯有性杂交不亲和的野生种对卷叶病毒有很高的抗性。利用植物体细胞杂交技术可提高马铃薯对卷叶病毒的抗性，具体过程如下图所示。请回答下列问题：
（1）马铃薯细胞和野生种细胞融合前，要先除去细胞壁，其原因是_______________，使用纤维素酶和_______________酶去除细胞壁利用了酶的_______________特点。 （2）③过程可用化学试剂_______________处理或用_______________法来诱导原生质体融合。 （3）④过程表示_______________的过程，⑤⑥过程分别是_______________、_______________。
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| 35. 难度：中等 | |
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传统单克隆抗体大多是鼠源性（利用骨髓瘤细胞与小鼠B淋巴细胞融合产生）的，而鼠源性单克隆抗体应用于人体治疗时存在诸多问题，因此，全人源化抗体（将人类抗体基因转移到抗体基因缺失的动物中，使该动物表达人类抗体）成为单克隆抗体研究的重点。请回答下列问题： （1）传统单克隆抗体的制备过程中，获取B淋巴细胞前需要给小鼠______________________。骨髓瘤细胞通常由细胞培养而来，培养过程中细胞生长到一定数量时，该类细胞不会出现__________________________现象。 （2）传统单克隆抗体制备过程中至少有两次筛选，其中第二次是筛选出__________________________、此时获得的杂交瘤细胞若放入小鼠体内进行培养，可从____________________________中提取单克隆抗体。 （3）与一般抗体相比，全人源化单克隆抗体的优点有______________________________（答出两点）等。 （4）制备单克隆抗体的过程中，运用了______________________________和动物细胞培养等技术，而后者需要置于95%空气加5%CO2的混合气体的培养箱中进行培养，其中CO2的作用是_______________。
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