| 1. 难度：简单 | |
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限制性核酸内切酶是切割DNA的工具。有关描述不符合事实的是（ ） A.主要从原核生物中分离纯化出来 B.能识别双链DNA分子的特定的核苷酸序列 C.切割产生的DNA片段末端称为黏性末端 D.使特定部位的两个核苷酸间的磷酸二酯键断开
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| 2. 难度：简单 | |
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应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到目的。这里的基因探针是指（ ） A.能够指导合成免疫球蛋白的DNA分子 B.细胞工程生产的单克隆抗体 C.用放射性同位素或荧光分子等标记的蛋白质分子 D.用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子
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| 3. 难度：中等 | |
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对图所示黏性末端的说法错误的是（ ）
A.甲、乙黏性末端是由不同的限制酶切割而成 B.甲、乙黏性末端可形成重组DNA分子 C.切割甲的限制酶能识别由甲、乙片段形成的重组DNA分子 D.DNA连接酶催化磷酸基团和脱氧核糖之间形成化学键
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| 4. 难度：简单 | |
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关于转化及转化方法的叙述，错误的是（ ） A.采用显微注射法可将目的基因导入羊受精卵 B.大肠杆菌处于易于吸收DNA的生理状态称为感受态 C.采用花粉管通道法可将目的基因导入棉花细胞 D.农杆菌转化法是单子叶植物中常用的一种基因转化方法
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| 5. 难度：简单 | |
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农杆菌转化法转移目的基因进入受体细胞，目的基因的最终插入位置是 A.Ti质粒上 B.受体细胞染色体上 C.T-DNA上 D.细胞质中
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| 6. 难度：中等 | |
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用基因工程技术生产羧酸酯酶（CarE）制剂的流程如图所示，下列叙述正确的（ ）
A.过程①需使用Taq酶 B.过程②需使用RNA聚合酶和PCR获取目的基因 C.过程③中使用NaCl溶液使细菌处于感受态 D.过程④可利用DNA分子杂交鉴定目的基因是否已插入受体细胞DNA上
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| 7. 难度：简单 | |
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凝乳酶是奶酪生产中的关键酶。通过蛋白质工程生产高效凝乳酶，不需要的步骤是（ ） A.蛋白质的结构设计 B.蛋白质的结构和功能分析 C.凝乳酶基因的定向改造 D.将定向改造的凝乳酶导入受体细胞
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| 8. 难度：中等 | |
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下列有关克隆绵羊“多利”的说法正确的是 ①“多利”的诞生属无性繁殖 ②“多利”的诞生采用了核移植技术 ③“多利”的诞生采用了胚胎移植技术 ④“多利”的诞生说明动物细胞具有全能性 ⑤动物细胞培养是整个技术的基础 ⑥“多利”的诞生采用了胚胎分割技术 A.①④⑤⑥ B.①②③④ C.①②③⑤ D.①②④⑤
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| 9. 难度：中等 | |
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甘草酸是中药甘草中的主要活性成分。为了快速检测甘草酸，科研人员利用细胞工程技术制备了抗甘草酸的单克隆抗体，其基本操作过程如图。相关叙述正确的是（ ）
A.过程①注射相应抗原后应立即从小鼠脾脏中提取细胞甲 B.过程②诱导细胞融合，利用了细胞膜的选择透过性 C.过程③、④的筛选方法相同，细胞丙、丁遗传物质相同 D.过程⑤细胞丁可在体外进行大规模培养，或者注射到小鼠腹腔内增殖
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| 10. 难度：中等 | |
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下列有关单克隆抗体制备及其应用的叙述，不正确的是（ ） A.制备单克隆抗体运用的技术有动物细胞融合和动物细胞培养 B.利用生物导弹治疗癌症就是利用了单克隆抗体清除癌细胞 C.需要从杂交瘤细胞中筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞 D.单克隆抗体最广泛的用途是用作体外诊断试剂
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| 11. 难度：中等 | |
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关于受精过程的叙述错误的是（ ） A.获能后的精子与卵子相遇后，释放顶体酶穿过透明带进入放射冠 B.透明带反应是防止多精入卵的第一道屏障 C.精子与卵细胞膜相互融合，精子入卵 D.雄原核形成的同时，卵子完成减数第二次分裂
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| 12. 难度：简单 | |
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下列有关叙述错误的是（ ）
A.题图是胚胎发育过程中囊胚期示意图 B.高等哺乳动物胚胎发育历程中最关键的时期是原肠胚期 C.高等哺乳动物发育中的细胞分化开始于此时期，终止于生命结束 D.进行胚胎分割时，应选择原肠胚期的胚胎进行
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| 13. 难度：简单 | |
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关于胚胎分割技术的说法，错误的是 A.被分割的胚胎应该是发育良好的桑椹胚或囊胚 B.可以对胚胎进行任意数目的等分，移植后均可正常发育 C.来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质 D.胚胎分割是进行动物克隆的方法之一
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| 14. 难度：中等 | |
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如图a、b、c表示现代工程技术，①②③表示对应结果，下列说法正确的是
A.若a是细胞核移植，①反应了动物细胞也具有全能性 B.若c是胚胎分割，③中个体的表现型一定相同 C.①②③中作为受体的是珍稀的雌性动物 D.若b是体外受精，则可发挥雌性优良个体的繁殖潜力
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| 15. 难度：中等 | |
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下面是胚胎干细胞分离途径示意图。相关说法正确的是（ ）
A.图中A所示细胞将来能够发育成胎膜和胎盘 B.胚胎干细胞的体积和细胞核都较小 C.胚胎干细胞可以用于治疗人类的某些顽症 D.利用胚胎干细胞培育的人造器官正在大规模应用
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| 16. 难度：中等 | |
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如图为哺乳动物（羊）的生殖过程，下列叙述不正确的是（ ）
A.个体2为克隆动物，c为高度分化的体细胞 B.个体2的遗传性状与提供c细胞的羊不完全相同 C.产生动物个体1与动物个体2的生殖方式是不同的 D.e细胞为完成减数分裂的卵细胞
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| 17. 难度：简单 | |
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软骨发育不全为常染色体显性遗传病，基因型为 HH 的个体早期死亡。 一对夫妻均为该病患者，希望通过胚胎工程技术辅助生育一个健康的孩子。下列做法错误的是 A.首先经超排卵处理后进行体外受精 B.从囊胚中分离细胞，培养后检测基因型 C.根据检测结果筛选基因型为 hh 的胚胎 D.将胚胎培养至原肠胚期后移植到子宫
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| 18. 难度：中等 | |
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科学家培育荧光鼠的设计思路可用如图的图解表示，依据设计程序，下列说法错误的是（ ） A.科学家在过程A中对天然质粒做的修饰改造是添加终止密码子 B.过程G中实施胚胎分割移植时，可以直接将裸半胚植入受体 C.检测荧光基因是否发挥作用的第一步，可采用分子杂交技术 D.判断荧光基因是否表达成功，在个体水平上可检验小鼠身体是否有荧光
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| 19. 难度：中等 | |
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下图是治疗性克隆的过程图解。
根据上述资料，判断下列说法中正确的是（ ） A.在胚胎发育中，可将早期发育的胚胎分为囊胚、桑椹胚、原肠胚三个阶段。 B.重组细胞发育的过程中，细胞开始分化发生在原肠胚时期 C.治疗性克隆所用的技术名称是核移植技术，要想获得基因型完全相同的两个胚胎，可采用胚胎分割技术 D.哺乳动物的胚胎细胞简称ES或EK细胞，它只能由早期胚胎分离出来
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| 20. 难度：中等 | |
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2015年2月3日，英国议会院通过一项历史性法案，允许以医学手段培育“三亲婴儿”。三亲婴儿的培育过程可选用如下技术路线。
据图分析，下列叙述错误的是（ ） A.该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代 B.捐献者携带的红绿色盲基因不能遗传给三亲婴儿 C.三亲婴儿的染色体全部来自母亲提供的细胞核 D.三亲婴儿的培育还需要早期环胎培养和胚胎移植等技术
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| 21. 难度：中等 | |
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屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法而获得诺贝尔奖。寄生于人体细胞内的疟原虫是疟疾的病原体。科学家通过紫外线处理大量青蒿幼苗后，偶然发现一株高产高效植株，进行基因测序发现该植株控制青蒿素合成相关的一种关键酶的基因发生了突变。 （1）如果用高产青蒿关键酶基因的mRNA反转录产生的cDNA片段与载体连接后储存在一个受体菌群中，这个受体菌群叫做青蒿的__________；获得的cDNA与青蒿细胞中该基因碱基序列__________（填“相同”或“不同”）。 （2）将获得的突变基因导入普通青蒿之前，先构建基因表达载体，图1、2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答：
用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒时不能使用SmaⅠ切割，原因是__________。构建重组质粒时在其目的基因前需要添加特定的启动子和终止子，启动子的作用是______________________。终止子的化学本质是一段有特殊结构的___________。 （3）基因表达载体导入组织细胞后，要通过__________技术培育出转基因青蒿幼苗，鉴定该基因工程是否成功还要进行____________实验，但是不能直接在培养基上培养疟原虫观察，其原因是______________。
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| 22. 难度：中等 | |
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科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如下图，请回答相关问题：
（1）过程①获得重组胚胎之前需要通过_____________技术获得重组细胞。接受细胞核的去核卵母细胞应该处于______________时期，需用物理或化学的方法激活受体细胞的目的是_______________。 （2）步骤②中，重组胚胎培养到囊胚期时，可从其______________分离出ES细胞。步骤③中，需要构建含有干扰素基因的______________。构建之前可以利用_____________技术对目的基因进行扩增，该技术的原理是_______________。 （3）将基因导入ES细胞常用的方法是______________。体外诱导ES细胞向不同方向分化是利用了ES细胞的______________。 （4）为检测干扰素基因的表达情况，可采用______________方法，若有杂交带出现，表明目的基因已成功表达。
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| 23. 难度：中等 | |
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人的血清白蛋白（HAS）在临床上需求量很大，通常从血液中提取。但由于HIV等的威胁与日俱增，使人们对血液制品的使用顾虑重重。如果应用现代生物学技术，将人的血清白蛋白基因导入奶牛细胞中，那么利用奶牛乳汁生产的血清白蛋白就会安全、高效地满足人类需求。如图所示为利用奶牛乳汁生产人血清白蛋白的过程，请据图回答下列问题：
（1）以上过程涉及的属于细胞工程技术手段有_______________________。 （2）在基因工程中，获取①的途径主要有____________（答出两项即可）。在①进入③之前要构建基因表达载体，这是基因工程的核心，除目的基因、启动子和终止子外，基因表达载体还必须含有___________。 （3）图中②一般经过__________处理可以得到③。若将③体外培养，需将培养瓶置于含_____________的混合气体的培养箱中培养，CO2的主要作用是_______________。 （4）在动物细胞培养过程中，为了达到无菌、无毒的环境条件，要在细胞培养液中添加一定量的____________，以防培养过程中的污染。此外，应______________，以便清除代谢产物，防止对细胞自身造成危害。 （5）重组细胞④发育到囊胚期时，需要取囊胚的____________细胞做DNA分析，进行性别鉴定，选择雌性胚胎进行移植。囊胚进一步扩大，会导致透明带的破裂，胚胎从其中伸展出来，这一过程叫做_______________。
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| 24. 难度：中等 | |
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下列是用生物学技术制备抗体的两个途径模式简图：
（1）过程①得到的Y细胞称为__________。得到的单克隆抗体最主要的优点是__________⑤过程需要_______酶，⑥过程需要用__________处理受体细胞。 （2）若抗体1与抗体2的氨基酸排列顺序相同，两者的空间结构是否相同?_______为什么?_________________________ （3）如果想用棉花生产该种抗体，则⑥过程的受体细胞通常选用______________，经过筛选后再侵染棉花体细胞实现转化。
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| 25. 难度：简单 | |
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下图是科学家通过不同方法培育优良种牛的过程，其中①-⑥表示操作过程。请回答以下问题：
（1）图中①过程涉及的精子需进行__________处理；防止多精入卵的两道屏障为___________。对图中良种母牛注射促性腺激素的目的是__________。 （2）将外源基因插入牛受精卵中的DNA上后，有的受精卵能发育成转基因牛，而有的会死亡，请分析外源基因插入牛受精卵中的DNA上后导致受精卵死亡的最可能原因：______________________。 （3）图中b、c分别代表囊胚的___________。图中④过程表示__________，由一个囊胚经④过程得到的B、C牛性别相同的概率为__________。
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| 26. 难度：中等 | |
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阅读如下材料： 资料甲：传统哺乳动物的胚胎干细胞是经由核移植构建成重组胚胎过程中获得的。 资料乙：现代在哺乳动物的体细胞中导入4个多能性相关的基因、2种特殊组蛋白的基因，在添加特殊化合物的培养基中培养，能快速获得诱导性多能干细胞（iPS）。但是，这种方法诱导的多能干细胞必须应用逆转录病毒才能进行基因组整合。 资料丙：应用iPS已经成功培养和分化出心肌、神经、胰腺、骨等多种体细胞和不同的组织，多能干细胞的研究在器官再生、修复和疾病治疗方面极具应用价值。 回答下列问题： （1）胚胎干细胞是由早期胚胎或__________中分离得到的一类细胞，在形态上，表现为____________________。 （2）iPS建立的过程需将病毒介导后的细胞种植于________细胞上，并于ES细胞专用培养体系中培养，以维持_________状态；所用逆转录病毒相当于基因工程中的_________工具，且病毒应对生物体_____________。 （3）在体外培养条件下，培养液中加入____________因子，可诱导iPS向不同类型的组织细胞分化，分化的实质是细胞中基因____________的结果。 （4）用上述两种方法获得的自体干细胞诱导分化形成的相应组织、器官进行移植，比传统器官移植的优点是可避免发生_____________反应。
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