| 1. 难度：中等 | |
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下列有关果酒制作过程的叙述，正确的是（ ） A.葡萄汁装瓶前，发酵瓶要用70%的酒精进行灭菌 B.在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌 C.果汁发酵后发酵液略显酸性不利于酵母菌的生长繁殖 D.应选择新鲜的葡萄，先除去葡萄的枝梗，再进行冲洗
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| 2. 难度：中等 | |
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如图是利用酵母菌和醋酸菌制作果酒和果醋的装置示意图，以下说法正确的是（ ）
A.酵母菌和醋酸菌在细胞结构上的最主要区别是细胞壁的成分不同 B.果酒发酵中期通入氮气，酵母菌将从有氧呼吸转变为无氧呼吸 C.制作果醋时应将开关2关闭 D.长而弯曲的胶管1在发酵过程中只能防止杂菌污染
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| 3. 难度：简单 | |
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硝化细菌、醋酸菌、乳酸菌、酵母菌的代谢类型依次是（ ） ①自养需氧型 ②自养厌氧型 ③异养需氧型 ④异养厌氧型 ⑤异养兼性厌氧型 A.①②④⑤ B.①④④⑤ C.②③②⑤ D.①③④⑤
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| 4. 难度：中等 | |
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某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。下列说法错误的是（ ） A.分离纯化乳酸菌时，首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释，进行梯度稀释的理由是泡菜滤液中菌的浓度高，直接培养很难分离得到单菌落 B.推测在分离纯化所用的培养基中加入碳酸钙的作用有鉴别乳酸菌和中和乳酸 C.分离纯化时应挑选出具有透明圈的菌落作为候选菌 D.乳酸菌在-20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的液氮
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| 5. 难度：中等 | |
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乙醇等“绿色能源”的开发备受世界关注。下图是利用玉米秸秆生产燃料酒精的大致流程。有关叙述错误的是（ ）
A.从反刍动物瘤胃中生存的某些微生物中可以提取到水解玉米秸秆需要的酶 B.玉米秸秆预处理后，应该选用淀粉酶进行水解，使之转化为发酵所需的葡萄糖 C.从生物体提取出的酶首先要检测酶的活性以便更好地将酶用于生产 D.发酵阶段需要的菌种是酵母菌，生产酒精时要控制无氧的必要条件
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| 6. 难度：简单 | |
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下列有关泡菜发酵过程的叙述，错误的是（ ） A.制作泡菜时一般用水密封，目的是保证坛内无氧环境 B.制作泡菜时需要配制盐水比例，其中水与盐的质量比是4：1 C.腌制过程中亚硝酸盐的含量会逐渐增多并达到最高峰，然后下降 D.泡菜制作利用了醋酸菌在无氧条件下产生醋酸的原理
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| 7. 难度：简单 | |
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为了杀死杂菌，对于吸管、接种环、培养基、接种室的正确处理依次是（ ） A.干热灭菌、灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌、紫外线照射 B.干热灭菌、干热灭菌、灼烧灭菌、酒精消毒 C.高压蒸汽灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌、喷洒石炭酸消毒 D.干热灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌、氯气消毒
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| 8. 难度：简单 | |||||||||||
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培养细菌可以使用试管斜面培养基，其流程是：计算→称量→融化→分装→灭菌→搁置斜面。下表是牛肉膏蛋白胨培养基的部分成分列表，以下说法错误的是（ ）
A.若用此培养基观察细菌菌落状况，还需加入凝固剂 B.蛋白胨在此培养基中只能提供氮源 C.培养基配置好后，分装前应进行的工作是调节pH D.培养基凝固前搁置斜面的目的是扩大接种面积
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| 9. 难度：中等 | |
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以下有关生物技术实践的叙述中，不正确的是（ ） A.用稀释涂布平板法测定某土壤浸出液中活菌数目时，测定值可能比实际值小 B.在富含纤维素的环境中寻找纤维素分解菌，符合生物与环境相适应的观点 C.平板划线法可以达到对微生物进行分离和计数的目的 D.在大肠杆菌的分离和培养实验中，划线后盖好培养皿，再将培养皿倒置培养
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| 10. 难度：简单 | |
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华蟾素是我国经典抗肿瘤药物。研究人员为探寻华蟾素注射液抗肝癌细胞的作用机理，需要对肝癌细胞进行培养。下列有关说法错误的是（ ） A.培养肝癌细胞前，可使用解离液（盐酸和酒精）将相关组织分散成单个细胞 B.培养肝癌细胞时，在培养基中加入适量的动物血清以补充合成培养基中缺乏的物质 C.培养时为了防止污染可加入一定量的抗生素 D.定期更换培养液的目的是提供营养物质和防止代谢物积累对细胞自身造成危害
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| 11. 难度：中等 | |
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黑麦草中含有拮抗除草剂草甘膦的基因，该基因编码抗草甘膦酶，从而使草甘膦失去对植物的毒害作用。2015年8月，中国科学院和北京奧瑞金种业有限公司通过转基因技术获得了抗除草剂草甘膦的玉米新品种。下列有关说法错误的是（ ） A.从cDNA文库中选取的拮抗除草剂草甘膦的基因不能直接导入受体细胞 B.体外获得大量拮抗除草剂草甘膦基因要利用PCR技术 C.若需要对转入拮抗除草剂草甘膦基因的玉米进行个体生物学水平的鉴定，需要对玉米做喷洒草甘膦实验 D.若实验现象不理想，为提高抗草甘膦酶活性可利用蛋白质工程直接改造抗草甘膦酶
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| 12. 难度：简单 | |
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下列关于采用胚胎工程技术实现某良种肉用牛快速繁殖的叙述，正确的是（ ） A.体外培养发育到原肠胚期的胚胎即可进行移植 B.采取激素注射等方法对良种母牛作超数排卵处理 C.一次给受体移入多个胚胎，产生的多个后代，其基因型都相同 D.利用胚胎分割技术，同卵多胎较同卵双胎成功率更高
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| 13. 难度：中等 | |
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下列关于植物组织培养中植物激素使用的说法，不正确的是（ ） A.植物组织培养中关键性激素是生长素和细胞分裂素 B.同时使用生长素和细胞分裂素时，两者用量的比例影响植物细胞的发育方向 C.先使用细胞分裂素，后使用生长素，细胞既分裂也分化 D.先使用生长素，后使用细胞分裂素，有利于细胞分裂和分化
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| 14. 难度：中等 | |
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下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是（ ） A.表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得 B.表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原（起）点 C.借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来 D.启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用
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| 15. 难度：简单 | |
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利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基因完成了在受体细胞中表达的是 A.棉花二倍体细胞中检测到细菌的抗虫基因 B.大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及其mRNA C.山羊乳腺细胞中检测到人生长激素DNA序列 D.酵母菌细胞中提取到人干扰素蛋白
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| 16. 难度：中等 | |
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用XhoI和SalI两种限制性核酸内切酶分别处理同一DNA片段，酶切位点及酶切产物分离结果如图。以下叙述不正确的是（ ）
A.如图中两种酶识别的核苷酸序列不同 B.如图中酶切产物可用于构建重组DNA C.泳道①中是用SalI处理得到的酶切产物 D.图中被酶切的DNA片段是单链DNA
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| 17. 难度：简单 | |
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基因治疗是指 A.对有基因缺陷的细胞进行修复，从而使其恢复正常，达到治疗疾病的目的 B.把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中，达到治疗疾病的目的 C.运用人工诱变的方法，使有基因缺陷的细胞发生基因突变恢复正常 D.运用基因工程技术，把有基因缺陷的基因切除，达到治疗疾病的目的
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| 18. 难度：简单 | |
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作物脱毒、改善畜产品的品质、抗除草剂作物、可保存的干扰素、检测有毒物质、依次是下列哪项生物技术的应用（ ） ①基因工程 ②细胞工程 ③蛋白质工程 ④胚胎工程 A.①②②③④ B.②①①③② C.②①②③② D.②①②④③
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| 19. 难度：中等 | |
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生物技术安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述，错误的是 A.应严格选择转基因植物的目的基因，避免产生对人类有害的物质 B.当今社会的普遍观点是禁止克隆人的实验，但不反对治疗性克隆 C.反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿 D.生物武器是用微生物、毒素、干扰素及重组致病菌等来形成杀伤力
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| 20. 难度：简单 | |
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下列关于细胞工程的叙述，错误的是（ ） A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C.利用植物体细胞杂交技术可克服生殖隔离的限制，培育远源杂种 D.某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同
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| 21. 难度：中等 | |
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十年前两个研究小组几乎同时发现，将四个特定基因导入处于分化终端的体细胞（如成纤维细胞等）中，可诱导其形成具有胚胎干细胞样分化潜能的诱导性多能干细胞。这项先进技术的潜在应用前景是 A.改造和优化人类基因组结构 B.突破干细胞定向分化的障碍 C.解决异体组织/器官排斥难题 D.克隆具有优良品质的动物个体
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| 22. 难度：简单 | |
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在动物胚胎发育过程中，早期原肠胚的细胞从一个部位移植到另一部位时，被移植的细胞能适应新的部位并参与那里的器官形成，但如果在原肠胚的末期，把未来发育为蝾螈后肢的部分移植到另一蝾螈胚胎不长后肢的部位，将发育为一条额外的腿，这说明（ ） A.原肠胚末期已出现了组织分化和器官的形成 B.原肠胚末期出现了细胞分化 C.细胞是全能的 D.原肠胚已出现了三个胚层
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| 23. 难度：简单 | |
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“金山银山不如绿水青山”。当前在城市建设中，应更加注重生态环境的建设。如图所示为利用人工建立的湿地公园对生活污水进行净化处理，形成的人工湿地污水净化系统。下列叙述正确的是（ ）
A.生态工程建设的目的只是防止环境污染 B.人工湿地中的芦苇属于挺水植物，绿藻属于浮游植物，黑藻属于沉水植物，这一现象体现了群落具有水平结构 C.在人工湿地中有“1+1>2”的效果，“1+1>2”所体现的是系统整体性原理 D.该人工湿地系统中的总能量来自于植物固定的太阳能的总量
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| 24. 难度：中等 | |
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天津独流老醋历史悠久、独具风味，其生产工艺流程如下图。
（1）酒精发酵阶段，需添加酵母菌。在操作过程中，发酵罐先通气，后密闭。通气的作用是______________。 （2）醋酸发酵阶段，独流老醋采用独特的分层固体发酵法，发酵30天。工艺如下：
①发酵过程中，定期取样测定醋酸杆菌密度变化。与颠倒前相比，B层醋酸杆菌在颠倒后密度变化的特点是_________。 ②乳酸含量高是独流老醋风味独特的重要成因。发酵过程中，发酵缸中_________层醋醅有利于乳酸菌繁殖，积累乳酸。 ③为检测发酵过程中乳酸菌的含量，取不同稀释度的样品各0．1mL涂布到固体培养基上，在适宜条件下培养一段时间，统计得到106、107、108三个稀释度的培养基上的平均菌落数依次为317个、125个、16个，据此估算，每毫升样品中的乳酸菌数约为_________个。上述统计的菌落数往往比活菌的实际数目_________，原因是____________________________________。
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| 25. 难度：简单 | |
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在缤彩纷呈的生物世界，微生物似乎显得过于微小与沉寂，它们在自然界却作用非凡，很多生命现象都与微生物有着千丝万缕的联系。 （1）幽门螺杆菌是急慢性胃炎的主要致病菌，它能分解尿素，在菌体周围形成一层保护性“氨云”，中和胃酸，定植致病。将患者体内采集的样本制成菌液，培养在以尿素为唯一氮源的___________（填“选择”或“鉴别”）培养基上进行“浓缩”。与固体培养基相比，液体培养基更适于“浓缩”培养的原因是___________。若培养基中加入酚红指示剂，则该菌落周围会出现__________环带，这与菌体内____________的作用密切相关。 （2）大肠杆菌数目是否超标可以作为食品卫生和水源污染度的检测指标，大肠杆菌的数目可以通过滤膜法来测定：将一定体积的样品过滤后，将滤膜放在添加__________试剂的培养基上培养，大肠杆菌的菌落呈现___________色，根据该菌落的个数判定饮用水是否污染。 （3）分离纯化大肠杆菌最常用的方法是___________和__________，如图为连续划线法示意图，在图中___________（填图中序号）区域更易获得单菌落，原因是_______________________________。
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| 26. 难度：中等 | |
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乳头瘤病毒（HPV，为DNA病毒）可导致人患宫颈癌，科研人员将HPV某外壳蛋白A基因构建成表达载体，经包装或直接注入体内，表达出相应抗原，诱导机体产生免疫反应。该方法获得的疫苗称为DNA疫苗。请回答下列问题： （1）获取A基因的方法： ①方法一：提取HPV的DNA，利用PCR技术扩增A基因。PCR技术的前提是：____________，以便合成引物。PCR扩增时，退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破坏_________的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关，长度相同但___________的引物需要设定更高的退火温度。如果PCR反应得不到任何扩增产物，则可以采取的改进措施有_____（填序号：①升高退火温度 ②降低退火温度 ③重新设计引物）。 ②方法二：从宿主细胞中提取总RNA，以与__________________互补的一段单链DNA作为引物，加入___________酶获得cDNA，然后经PCR扩增获得大量的A基因。 （2）在基因工程的基本操作程序中，利用PCR技术扩增目的基因后，需要进行_____________，其目的是__________。该过程中常用不同的限制酶切割质粒与目的基因，其具备的优势是___________________。
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| 27. 难度：中等 | |
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噬菌体展示技术是将外源蛋白或多肽的DNA序列插入噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置，使外源基因随噬菌体外壳蛋白基因的表达而表达，同时，外源蛋白或多肽随噬菌体的重新组装而展示到噬菌体表面的生物技术。利用该技术可以获得单克隆抗体（最新技术）。请回答下列问题： （1）传统单克隆抗体的获得需先对小鼠进行_________处理，整个过程中需要进行两次筛选，目的分别是_________、_________。 （2）噬菌体展示技术获得的抗体还可用于定量检测抗原，如双抗体夹心法，具体原理如下图所示：
分析上图可知，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体可与同一抗原表面的_________结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是__________，可通过测定产物量来推测抗原量。 （3）单克隆抗体最广泛的用途是___________。
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| 28. 难度：简单 | |
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图1为某高等动物生活史示意图，图2为图1中某阶段部分过程，请据图回答下列问题。
（1）图1中A表示____________过程；图2是图1中__________（填字母）阶段部分过程，该过程表示____________。 （2）图1中B过程，获能后的精子与______（时期）的卵子在___________相遇时，首先发生___________，释放出有关的酶直接溶解卵丘细胞之间的物质。防止多精入卵的生理反应有___________。 （3）试管动物技术通常是指通过人工操作使卵子和精子在体外条件下成熟和受精，通过培养发育为早期胚胎后，再经胚胎移植产生后代的技术。胚胎移植时，受体应处于适合的生理状况，此时可利用激素对受体进行___________处理；此外，由于___________，这为胚胎在受体内的存活提供了可能。
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