| 1. 难度：简单 | |
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烟草花叶病毒(TMV)是一种在烟草及蔬菜等经济作物中广泛传播的病毒，对农业生产造成很大的危害。研究者利用植物基因工程的方法将烟草花叶病毒外壳蛋白基因(CP基因)导入烟草并在转化的烟草植株中表达，使其获得对烟草花叶病毒的抗性。下图是转化烟草植株的培育流程，请回答：
(1)含有CP基因的cDNA文库是通过将TMV的RNA进行 获得的。在对cDNA进行PCR扩增时，设计的引物自身不能含有 序列。 (2)将CP基因导入土壤农杆菌质粒的 ，其原因是 __________________ _________________________________________________________________ 。 (3)含重组质粒的土壤农杆菌与烟草叶共培养过程中，对烟草叶的处理要求是 ________________________________________。 (4)用含重组质粒的土壤农杆菌感染烟草叶成功后，共培养形成愈伤组织时的培养条件是必须 。 (5)在诱导芽、根的培养基中需添加 才能进行筛选，并要注意在不同的培养阶段需调整 的比例。
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| 2. 难度：简单 | |
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某竹芋科植物果实中含有一种甜蛋白，其甜度为蔗糖的三千倍，是理想的甜味剂。某研究小组试图把甜蛋白基因(目的基因)导入黄瓜中，以改良这种黄瓜的品质。获得转基因黄瓜植株的流程图如下，请回答：
(1)通过步骤①和②可人工合成目的基因，在步骤②中先以mRNA为模板在______ 酶的作用下合成互补DNA，然后通过一系列实验从中筛选出 基因。此外，还可以根据甜蛋白的氨基酸序列推测出 序列，再用 合成。 (2)通过 技术，可以获得大量目的基因。利用该技术的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列，以便根据这一序列合成 。 (3)导入了目的基因的叶片组织细胞经过步骤③ 和④_______ 后形成了完整的植株，说明 。 (4)可以通过 技术检测黄瓜植株中是否含有甜蛋白。
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| 3. 难度：简单 | |
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下图为单克隆抗体制备流程示意图。
(1)单克隆抗体制备技术的基础是 。 (2)细胞融合是随机的过程，在HAT培养基上培养，目的是 。在细胞培养过程中，培养液中需要添加无机盐，但要注意无机盐的 ，以保证生命活动的正常进行。 (3)为选育出能产生高特异性抗体的细胞，要将从HAT培养基上筛选出的细胞稀释到7～10个细胞/mL，每孔滴入0.1 mL细胞稀释液，其目的是 _____________ _________________________________________________________________ 。 (4)若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是 _______________________________________________ _________________________________________________________________ 。
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| 4. 难度：简单 | |
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胚胎移植的基本程序如下图(以牛胚胎移植为例)，请据图回答问题：
(1)对供体母牛、供体公牛的要求是 。 (2)同期发情处理的方法是 ，冲卵中的“卵”是指 。 (3)受精有关过程有：①第一次卵裂开始，②释放第二极体，③顶体反应，④穿越透明带，⑤雌、雄原核的形成，⑥核膜消失，雌、雄原核融合。其正确的顺序为 (填序号)，受精的标志是 。 (4)若供体母牛具有许多优良性状，可利用体细胞克隆技术加速遗传改良进程，请回答下列有关问题： ①目前核移植技术中普遍使用的去核方法是 。 ②用于核移植的体细胞一般选用 代以内的细胞，原因是 。
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| 5. 难度：简单 | |
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从世界上第一位“试管婴儿”诞生，至今全球试管婴儿数量已达到400万。从克隆羊“多利”诞生，至今已成功克隆了多种动物。请分析回答试管婴儿与克隆技术的有关问题： (1)试管婴儿和克隆动物的培育过程中均会用到的生物技术有 、 。 (2)试管婴儿和克隆动物的生殖方式分别属于_____________________________ 和 。 (3)培育试管婴儿时，可通过给母体注射 增加排卵数量，从父亲体内获得的精子需要进行 处理，才能完成受精作用。 (4)克隆动物时，将甲个体的细胞核移入乙个体去核的卵母细胞中，由重组细胞培育成个体丙，则个体丙的基因来源于 __________________________________ _________________________________________________________________ 。 (5)请列举一例克隆技术在医疗方面的应用： 。
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| 6. 难度：中等 | |
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由李建远教授率领的科研团队，在山东烟台毓璜顶医院成功克隆出5枚符合国际公认技术鉴定指标的人类囊胚。请回答下列问题： (1)在卵子去核的过程中，李建远教授采用三维立体偏震光纺锤体成像系统，对核DNA精确定位后，再用微激光主要对卵子的第一屏障打孔，才能精确剔除卵子细胞核。这一屏障是指 ( ) A.卵细胞膜 B.透明带 C.核膜 (2)在培养皮肤纤维细胞和淋巴细胞时，需要用胰蛋白酶等处理，目的是 。培养过程中除了保证无菌、无毒的环境外，为了防止污染通常还要在细胞培养液中添加一定量的 。 (3)通过克隆胚胎进而用其衍生而来的器官取代患者病变的器官，就会避免免疫排斥反应的发生，根本原因是 。 (4)获得目的基因后可采用 技术进行扩增。大部分物种的基因能拼接在一起，是因为 。检测目的基因是否成功导入植物细胞，可采用的生物技术是 。
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| 7. 难度：简单 | |
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自开展“南京莫愁湖物理生态示范实验研究”开始，相继引种了浮水植物、沉水植物共计10余种，在围隔区内已经形成了以沉水植物为优势的水生植物群体。试验区内营养盐的浓度得到有效控制，如试验区内氨氮和总氮仅分别为试验区外的 (1)此项生态工程依据的生态学原理有 、 、 、__________ 和 。 (2)生态工程的调控机制是 ，主要利用的能源是 。 (3)生态工程的主要目的在于 。
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| 8. 难度：简单 | |
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转基因生物作为生物反应器，用于生产人们所需要的药用蛋白，如激素、抗体、疫苗、酶等。如图是通过生物工程培育能产生人胰岛素烟草的过程。请据图回答：
(1)构建表达载体的A过程中，需要用到的工具酶有_________________________ 和 。 (2)D过程常采用的方法是 。若把重组质粒导入动物细胞，常采用的方法是 ____________。 (3)E过程采用的技术主要包括 和 两个阶段。 (4)如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测，F过程应该用____________ 作为探针。
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| 9. 难度：简单 | |
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如图为纯种荷斯坦小奶牛的繁殖过程，请据图回答下列问题。
(1)克隆动物培育过程与图示繁殖过程相比，特有的技术手段是______________ 技术。 (2)受精卵体外培养所需的培养液成分一般比较复杂，除一些无机盐和有机盐类外，还需要添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸以及 等物质。 (3)如果培育转基因荷斯坦奶牛，可采用 技术将药用蛋白基因导入 中，在检测受体细胞中的染色体DNA上是否插入了目的基因时，常采用的方法是 技术，根据是否显示出杂交带进行鉴定。 (4)纯种荷斯坦奶牛的胚胎能在受体黄牛的子宫内存活并正常发育的生理原因是 _________________________________________________________________ _________________________________________________________________ 。
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