（12分）下图是某种类似动物蛋白质工程的示意图，请分析回答：
（1）目前蛋白质工程中难度最大的是图中编号 所示过程。
（2）实现③过程所依据的原理是 。
（3）在体内A过程是 。
（4）⑤过程中对核苷酸序列有严格要求的工具酶是 。重组后的载体导入动物受精卵，常用的方法是 。
（5）某个DNA样品有1000个脱氧核苷酸，已知它的一条单链上碱基A:G:T:C=1:2:3:4，则经过PCR仪五次循环，需要提供胸腺嘧啶脱氧核苷酸的数量至少是 个。
（13分）下图是克隆牛形成及其拓展流程图，请据图回答：
（1）图中“去核细胞”最好选 细胞，因为 ，
(2) 犊牛的性状与牛1基本相同，但不完全相同，原因是①
，② 。
（3）早期胚胎发育到 阶段时细胞开始分化。早期胚胎移入代孕母牛子宫内的时期是 。
（4）图中从“内细胞团到胚胎干细胞”的培养过程中，一般用 处理内细胞团，使之分散成单个细胞。使用培养基进行胚胎干细胞培养时，通常要加入 等天然成分。
（5）如果动物的克隆技术应用于人类自身，你认为对人类将产生什么影响?
正面影响 负面影响
（14分）玉米是雌雄同株异花的单子叶植物，是生产和科研的好材料。现有两个玉米品种，其基因型分别为yyRr和Yyrr。科学家将它们的花粉除去细胞壁后进行原生质体融合，再把这些融合细胞进行组织培养，培育出了玉米新品种。
（1）上述除去花粉的细胞壁常用酶解法，这里的酶是指 。
（2）上述育种方法所采用的技术，其依据的生物学原理是 和 。
（3）在植物组织培养的培养基中除了必要的营养物质外，还必须添加 。培养过程中，融合细胞首先通过细胞分裂形成 ，这个过程叫 。
（4）两个品种的花粉进行原生质体融合后，可产生 种基因型的融合细胞（仅考虑两两融合），这些融合细胞经过组织培养可以得到 种不同于亲本表现型的玉米新品种。
(13分)下图为单克隆抗体制备流程示意图。
（1）单克隆抗体制备技术的基础是 。
（2）利用细胞融合技术制备单克隆抗体有两次筛选，第一次筛选的目的是 ，如图中 （填字母）过程所示；第二次筛选的目的是 ，如图中 过程所示。
（3）在单克隆抗体制备过程中，不会涉及到（如技术、物质、生理过程等）的是
A．基因表达 B．有性生殖 C．细胞坏死 D．抗原——抗体杂交
(4) 若用15N标记的氨基酸培养能产生单克隆抗体的细胞，放射性物质在细胞结构中出现的先后顺序是 。
（12分）质粒是DNA重组技术常用载体而得到广泛使用。请回答：
（1）质粒的化学本质是 。
（2）质粒中的抗性基因在基因工程中被称为
，其作用是
。
（3）若质粒的切割末端为 ，则与之连接的目的基因切割末端应为 ；可使用 把质粒和目的基因连接在一起。
（4）图1中A－D段表示质粒的某基因，阴影区的长度相当于mRNA的长度。B表示
与RNA聚合酶结合位点。请在图上方的方框内用箭头表示出RNA聚合酶在C上的移
动方向。为使目的基因直接表达，目的基因插入的最佳位点是图中的_________处。（填数字序号）
（5）与一般质粒相比，农杆菌中的Ti质粒所具有的特点是 。
下列有关“基因探针”的叙述，不正确的是
A．基因探针的工作原理是碱基互补配对
B．待测的DNA分子首先要解旋变为单链，才可用基因探针测序
C．待测的DNA分子可以直接用基因探针测序
D．基因探针技术可用于检测基因是否翻译成蛋白质
