去除细胞壁的植物细胞称为原生质体。酶解法制备原生质体的原理是利用酶溶液对细胞壁成分的降解作用。蜗牛酶液从蜗牛（以植物为食）消化腺中提取；果胶酶、纤维素酶从微生物中提取。为了研究不同酶液的酶解效果，某实验小组取无菌烟草幼叶，切成相同大小的小片，等量放入6支试管中，试剂用量和实验结果列于下表。请回答有关问题。
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试管编号 项目 |
I
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Ⅱ
|
Ⅲ
|
Ⅳ
|
V
|
Ⅵ
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蒸馏水（mL） |
2 |
O |
1 |
1 |
1 |
1 |
|
缓冲液（mL） |
0 |
2 |
1 |
0.5 |
0.5 |
0.5 |
|
果胶酶液（mL） |
O |
0 |
O |
0.5 |
O |
0 |
|
蜗牛酶液（mL） |
O |
0 |
O |
O |
0.5 |
0 |
|
纤维素酶液（mL） |
0 |
O |
0 |
O |
0 |
0.5 |
|
实验结果（绿色深浅程度） |
－ |
－ |
－ |
+++ |
++++ |
++ |
（注：“+”越多表示绿色越深，“一”表示颜色无显著变化）
（1）实验过程中，需要轻摇试管，其目的是 ，使原生质体从叶小片中游离出来，以便观察悬浮液绿色的深浅。
（2）从绿色的深浅可推测：蜗牛酶液酶解效果最好，原因是蜗牛酶液含有 等多种酶。该实验中 是空白对照组，其设置意义是 。
（3）用网筛过滤原生质体到离心管内，离心后收集沉淀物，并用 洗涤。
某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌，设计实验步骤如下，请给予合理的补充。
（1）采样与培养：将采集的土样混匀后称取1g，置于经过 法灭菌处理的 （填“固体”或“液体”）培养基中，28℃振荡培养。
（2）接种与选择：为避免培养液中菌体浓度过高，需将培养液进
行 处理。之后，将菌液涂布接种于以 为唯一碳源的固体培养基上，30℃条件下培养。为避免污染，需将培养皿呈 状态放置。此外，为排除其他因素的影响，提高实验可信度，本步骤需设计 作为空白对照。
（3）筛选与纯化：将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围，如果菌落周围的现象是 ，则说明此种菌能够 。从平板中挑取实验效果明显的目的菌株，采
用 法接种于新的培养基平板，可对菌株进行进一步的纯化。
下图甲是制作果醋或果酒的发酵装置，某同学利用下图甲装置在适宜条件下制作果醋，在灭菌后的锥形瓶中装入新鲜的果汁和酵母菌后密封通气口，进行自然发酵，发酵初期将温度控制在18—25℃，可见溶液中有气泡产生；中期可以闻到酒香；后期接种醋酸杆菌，需适当升高温度到30—35℃并通气，酒香逐渐变成醋香。分析回答下列问题：
（1）发酵开始后需密封通气孔的原因是 ，在闻到酒香时，酵母菌呼吸的总反应式为 。
（2）接种醋酸杆菌后需适当升高温度到30—35℃并通气，可以说明醋酸杆菌 。
（3）图乙中能表示整个发酵过程培养液pH变化的曲线是 。
（4）与醋酸杆菌相比较，酵母菌在结构上的主要特点是 ，在酿酒过程中通常要先通入一定的氧气，其目的是使酵母菌 。
（5）在工业生产中可通过重离子束处理酵母菌获得呼吸缺陷型酵母菌菌种来提高酿酒过程中果酒的产量：
①利用重离子束处理酵母菌选育菌种的方法，称为 。经过重离子束处理后的酵母菌接种到含有TTG（一种显色剂）的培养基中，在此培养基中呼吸正常的酵母菌菌落呈红色，呼吸缺陷型的酵母菌菌落呈白色，此培养基从用途上划分属于 培养基。
②呼吸缺陷型酵母菌细胞内的丙酮酸大量转化为酒精，说明其细胞呼吸过程中 阶段被阻断，因此在果酒生产中具有更大的经济价值。
某研究性小组研究的课题是“探究影响细菌生长繁殖的因素”。他们在培养细菌的过程中，发现某种细菌的生长和繁殖受营养成分和温度等条件的影响。
（1）研究小组工在探究温度对某种细菌的影响时，对细菌繁殖一代所需的时间（代时）与温度的关系做了有关的数据统计，见下列表格：
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温度（℃） |
10 |
15 |
20 |
25 |
30 |
35 |
40 |
45 |
47．5 |
50 |
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代时（分） |
860 |
120 |
90 |
40 |
29 |
22 |
17．5 |
20 |
77 |
750 |
依据上表推测，适合该细菌繁殖的最适温度约为_____________。
（2）研究小组Ⅱ发现某种细菌有5种营养缺陷型菌株1、2、3、4、5，它们不能合成生长所必需的物质C，已知A、B、C、D、E都是合成G物质的必需中间产物，但不知这些物质合成的顺序，于是在培养基中分别加入这几种物质并分析了这几种物质对各种营养缺陷型菌株生长的影响，结果如下表所示。+：表示生长 —：表示不生长
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物质 突变体 |
培养基中加入的物质 |
|||||
|
A |
B |
C |
D |
E |
G |
|
|
1 |
— |
— |
— |
+ |
— |
+ |
|
2 |
— |
+ |
— |
+ |
— |
+ |
|
3 |
— |
— |
— |
— |
— |
+ |
|
4 |
— |
+ |
+ |
+ |
— |
+ |
|
5 |
+ |
+ |
+ |
+ |
— |
+ |
根据以上结果，推测这几种物质的合成顺序应是____________。由于A—C所需的量很少，属于微生物所需营养要素中的___________。
（3）假定在细菌培养过程中，出现了某种突变的菌种，为了分离获得不能合成某种维生素的营养缺陷型菌株，设计一个实验以鉴定这种维生素的类型。
第一步：将变异菌株接种到____________培养基上扩大培养；
第二步：配制系列培养基。此时应将_____________设为实验的自变量；
第三步：将扩大培养的变异菌株______________________；
第四步：观察细菌的生长情况。在实验操作过程中自始至终要注意__________操作。
（4）实验结果分析：________________________________________________。
加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。请回答下列问题：
（1）为了探究某加酶洗衣粉中碱性蛋白酶含量与洗涤效果关系，某同学通过实验获得右图所示的结果。由图可知，加酶洗衣粉中碱性蛋白酶的最适含量是 %，本实验的自变量是 。
（2）下表是围绕加酶洗衣粉的一项研究结果：
上述实验结果可以得出的结论有：① ；② 。
（3）在使用加酶洗衣粉过程中，对于特别脏的衣服、较大的洗衣量，写出两项提高洗涤效果的措施：①__________________________；②__________________________。
固定化脂肪酶的方法一般是：将酶液和一定浓度的海藻酸钠溶液混合后，用注射器滴到一定浓度CaCl2溶液中，25℃静置固化2ｈ，过滤洗涤，再加入到戊二醛溶液中25℃交联2ｈ，过滤、洗涤和干燥后就可得到颗粒状固定化脂肪酶。兴趣小组对固定化酶的性质和其最佳固定条件进行了探究。下图显示的是部分研究结果（注：纵坐标为酶活力包括酶活性和酶的数量，a为游离酶，b为固定化脂肪酶），据图分析不正确的是( )
A.本资料中固定化脂肪酶使用的方法有吸附法、包埋法和交联法
B.与游离酶相比固定化酶具有的优点是稳定性更高
C.当海藻酸钠浓度较高时，酶活力较低原因是形成的凝胶孔径较小，影响酶与底物的结合
D.氯化钙的量太少时酶活力较低原因可能是包埋不完全，包埋在内部的部分酶会流失
