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(5分)根据实验原理和材料用具,设计实验选择载体质粒,明确质粒的抗菌素基因所抗的...

(5分)根据实验原理和材料用具,设计实验选择载体质粒,明确质粒的抗菌素基因所抗的抗菌素类别。

①实验原理:作为载体的质粒,须有标记基因,这一标记基因是抗菌素抗性基因。故凡有抗菌素抗性的细菌,其质粒才可用作载体。

②材料用具:青霉素、四环素的10万单位溶液、菌种试管、灭菌的含细菌培养基的培养皿、酒精灯、接种环、一次性注射器、蒸馏水、恒温箱。

③方法步骤

    第一步:取三个含细菌培养基的培养皿并标为1、2、3号,在酒精灯旁,用三支注射器,分别注入1mL蒸馏水、青霉素液、四环素液,并使之分布在整个培养基表面。

    第二步:将接种环在酒精灯上灼烧,并在酒精灯火旁取菌种,对三个培养皿分别接种。

    第三步:将接种后的三个培养皿放入37℃恒温箱培养24h。

④预期结果:

①____________________________________;

②____________________________________;

③____________________________________;

④____________________________________;

⑤____________________________________。

 

(每空1分,共5分) 预期结果: ①1号培养皿细菌正常生长; ②2、3号培养皿中,仅2中细菌能存活,说明细菌有青霉素抗性基因,而没有四环素抗性基因。 ③2、3号培养皿中,仅3中细菌能存活,说明细菌有四环素抗性基因,而没有青霉素抗性基因。 ④2、3号培养皿中都有存活,说明该菌质粒上有两种抗菌素的抗性基因。 ⑤2、3号培养皿中都不存活,说明该菌质粒上没有这两种抗菌素的抗性基因。 【解析】
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考点分析:
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(8分)为扩大可耕地面积,增加粮食产量,黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。

说明: 6ec8aac122bd4f6e

(1)获得耐盐基因后,构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的____处,DNA连接酶作用于____处,(填“a”或“b”)

(2)将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有农杆菌转化法和________法。

(3)由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用________技术,该技术的核心是________和________。

(4)为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功,既要用放射性同位素标记的________做探针进行分子杂交检测,又要用________________方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。

 

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(18分)2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝色或紫外光的激发下发出荧光,这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况,帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白(GFP)转基因克隆猪的培育过程示意图,据图回答:

 

 

 

 

 

 

 

(1)图中通过过程①、②形成重组质粒,需要限制酶切取目的基因、切割质粒。限制酶I的识别序列和切点是—G↓GATCC—,限制酶II的识别序列和切点是—↓GATC—。在质粒上有酶I的一个切点,在目的基因的两侧各有一个酶II的切点。

①请画出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。

②请画出目的基因两侧被限制酶Ⅱ切割后所形成的黏性末端。

③在DNA连接酶作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来____,理由是:________________________________。

(2)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用最多也是最有效的方法是________。

(3)从分子水平上,检测绿色荧光蛋白基因是否插入到猪胎儿成纤维染色体的DNA上,检测方法是____________,检测绿色荧光蛋白基因是否表达,检测方法是____________。

(4)如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上,GFP基因可以作为表达载体上的________。获得的转基因猪,可以解决的医学难题是可以避免________________。

 

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(14分)下图是植物体细胞杂交过程示意图,请据图回答:

说明: 6ec8aac122bd4f6e

(1)②过程的发生,必须进行人工诱导。人工诱导原生质体融合的物理方法是:利用________等(至少写出两种)促使原生质体融合;化学方法是:用______等试剂作为诱导剂诱导融合。

(2)在④⑤过程中,细胞分裂的主要方式是________。

(3)从①到⑤形成杂种植株的原理是____________。 

(4)植物体细胞杂交的目的是获得新的________。

(5)利用植物体细胞杂交的方法培育作物新品种的过程中,遗传物质的传递是否遵循孟德尔的遗传规律____原因是________________________________________________________。

 

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与传统育种相比,植物体细胞杂交在培育作物新品种方面的重大突破表现在(    )

A.证明杂种细胞具有全能性       B.克服不同生物远源杂交的障碍

C.缩短育种周期,减少盲目性      D.快速培育无病毒植株,保留杂种优势

 

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在植物组织培养过程中,当培养基中添加的生长素含量高于细胞分裂素时,主要诱导植物组织                                          (    )

A.脱分化和愈伤组织的形成       B.脱分化和根原基的形成

C.再分化和根原基的形成         D.再分化和芽原基的形成

 

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