(5分)已知某种传染病是由一种RNA病毒感染所引起的疾病。该病毒表面的A蛋白是主要的病毒抗原,在病人康复后的血清中有抗A蛋白的特异性抗体。某研究小组为了了解这种蛋白质的结构和功能,需要更多的A蛋白作为研究材料,研究小组开展了下图所示的工作:
(1)步骤③构建重组表达载体A和B时,必须使用________酶和_______酶,后者的作用是将前者切割的A基因和____连接起来。
(2)为了检验步骤⑥所表达的A蛋白是否与病毒A蛋白有相同的免疫反应特性,可用大肠杆菌中表达的A蛋白与感染过该病毒的康复病人的血清进行________反应,从而得出结论。
(3)步骤⑥和⑦的结果相比,原核细胞表达的A蛋白与真核细胞表达的A蛋白的氨基酸序列相同吗?____。
(6分)为从根本上解决水稻中的高植酸问题,可将植酸酶基因导入水稻, 培育低植酸转基因水稻品种。下图是获取植酸酶基因的流程。据图回答:
(1)图中基因组文库____(小于/等于/大于)cDNA文库。
(2)B过程需要的酶是________;A、C过程中____(可以/不可以)使用同一种探针筛选含目的基因的菌株。
(3)目的基因Ⅰ和Ⅱ除从构建的文库中分离外,还可以分别利用图中____和____为模板直接进行PCR扩增,该过程中所用酶的显著特点是________。
(11分)尿素是一种重要的农业肥料,但若不经细菌的分解,就不能更好地被植物利用。生活在土壤中的微生物种类和数量繁多,同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如表所示,实验步骤如图所示。请分析回答问题:
(1)此培养基能否用于植物组织培养?____,理由是____________。
(2)培养基中加入尿素的目的是筛选______,这种培养基属于____培养基。
(3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的____和____,实验需要振荡培养,原因是________________。
(4)下列材料或用具:①培养细菌用的培养基与培养皿,②玻棒、试管、锥形瓶和吸管,③实验操作者的双手。其中需要灭菌的是:____;需要消毒的是:____。(填序号)
(5)在进行分离分解尿素的细菌实验时,A同学从培养基上筛选出大约150个菌落,而其他同学只选择出大约50个菌落。A同学的实验结果产生的原因可能有____(填序号)
①由于土样不同 ②由于培养基污染 ③由于操作失误 ④没有设置对照
(6)实验结束后,使用过的培养基应该进行____处理后,才能倒掉。
(8分)某实验小组欲从土壤中筛选出能分泌淀粉酶的芽孢杆菌,设计实验步骤如下,请给予合理的补充。
(1)采样与培养:将采集的土样混匀后称取lg,置于经过_______法灭菌处理的____(填“固体”或“液体”)培养基中,28℃振荡培养。
(2)接种与选择:为避免培养液中菌体浓度过高,需将培养液进行________处理。之后,将菌液涂布接种于以____为唯一碳源的固体培养基上,30℃条件下培养。为避免污染,需将培养皿呈____状态放置。此外,为排除其他因素的影响,提高实验可信度,本步骤需设计____________作为空白对照。
(3)筛选与纯化:将适量的碘液滴加在平板中的菌落周围,如果菌落周围的现象是________,则说明此种菌能够________________。
动物细胞培养的特点是 ( )
①细胞贴壁 ②有丝分裂 ③分散生长 ④接触抑制 ⑤减数分裂
A.①②④ B.②③⑤ C.①③④ D.③④⑤
在动物细胞培养的过程中,定期使用胰蛋白酶处理的目的( )
A.去掉细胞壁成为原生质体
B.去掉细胞膜暴露出原生质体便于细胞融合
C.促进蛋白质水解为多肽
D.使动物组织分散为单个动物细胞进行培养,解除细胞的接触抑制