2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光,这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况,帮助推断蛋白质的功能。我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出,这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图,请据图回答:
(1)图中通过过程①、②形成重组质粒,需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。若限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是一G↓GATCC一,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC一。在质粒上有酶I的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。
①请画出质粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端。
②在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来? _____。理由是_____________________________________。
(2)GFP基因与目的基因一起构建到载体上不影响目的基因的表达,也不影响由目的基因控制合成的蛋白质的结构与功能,且对细胞无毒性作用,因此GFP基因可以运用作为基因表达载体上的______。
(3)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用最多也最有效的方法是____________。然后还要通过____________技术来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上。
(4)为了获得更多的猪卵母细胞,可通过对母猪注射____________的方法,做超数排卵处理,并将所采集到的卵母细胞在体外培养到____________期即可通过显微操作将其细胞核去除。
(5)早期胚胎的培养液成分较复杂,除一些无机盐和有机盐类外,还需添加维生素、激素、__________________等物质。
(6)绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程属于______生殖。目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白,黄色荧光蛋白等,采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是:______(用数字表示)。
①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列
②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计
③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)
④表达出蓝色荧光蛋白
(多选)基因工程中,构建基因表达载体时( )
A.需要加入启动子、终止子、标记基因、目的基因等元件
B.目的基因只能从目的生物中获取
C.启动子将启动表达载体的复制
D.剪切中形成的末端都可由T4 DNA连接酶连接
(多选)下列关于体内受精和早期胚胎发育的叙述,错误的是:( )
A.哺乳动物的卵泡是在出生前形成的
B.在自然条件下,受精是在子宫内完成的
C.内细胞团是在原肠胚期形成的
D.桑椹胚前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能
(多选)下列属于基因运载体所必须具有的条件是 ( )
A、具有某些标志基因 B、具有环状的DNA分子
C、能够在宿主细胞内复制 D、具有多种限制性内切酶
(多选)下列关于生物技术的安全性和伦理问题的分析,合理的观点是( )
A 转基因生物进入自然界后不会与野生物种杂交而威胁其他生物的生存
B 运用重组基因技术可以将致病菌或病毒改造成威力巨大的生物武器
C 所有的转基因食品都不会危害人类的健康
D 转基因生物合成的某些新的蛋白质有可能成为某些人的过敏源或者引起中毒
(多选)在人类基因组研究过程中,科学家鉴定出了一大批致病基因和易感基因,它们在医学上有重要的应用价值。一部分人认为没有必要进行基因检测,理由是 ( )
A.人类对基因结构及基因间相互作用尚缺乏足够的认识
B.个人基因资讯的泄露会造成基因歧视
C.通过基因检测可以及早采取预防措施
D.可以通过立法来杜绝基因歧视现象