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下面是以小鼠为对象进行的研究工作,请分析回答问题。 (1)进行小鼠胚胎工程操作时...

下面是以小鼠为对象进行的研究工作,请分析回答问题。

(1)进行小鼠胚胎工程操作时,首先在光控周期下(光照14h,黑暗10h)饲养成年雌鼠,并注射促性腺激素。然后从雌鼠输卵管中取出卵子,在一定条件下培养成熟;并从雄鼠附睾中取出精子,在一定条件下培养一段时间,目的是________。再在37℃,5%CO2条件下,精卵共同作用4h,冲洗后继续培养。定时在显微镜下观察胚胎的变化,第5天左右看到胚胎发生收缩,细胞间隙扩大,接着胚胎内部出现裂隙,这是胚胎____期开始的标志。

(2)如果体外受精后,在精核与卵核融合之前,用微型吸管除雄核,再用细胞松弛素B处理(作用类似于用秋水仙素处理植物细胞),处理后的受精卵可发育成小鼠。该种方法在动物新品种选育中的显著优点是______________________。

(3)如果将外源基因导入小鼠受精卵,则外源基因可能随机插入到小鼠受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因小鼠,有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因________________________________________________。

(4)如果将小鼠甲的体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中,由重组细胞发育成小鼠丙,小鼠丙的基因来源于________________________,该项操作中将小鼠甲体细胞核移入小鼠乙的去核卵细胞中而不直接用小鼠甲的体细胞进行培育的原因是________________________________________________________。

 

(1)使精子获能;囊胚; (2)容易获得纯合子并缩短育种时间; (3)外源基因的插入使受精卵内生命活动必需的某些基因不能正常表达; (4)小鼠甲(体细胞)的核基因和小鼠乙(卵细胞)的细胞质基因;体细胞的核在体细胞中不能表达全能性,卵细胞可以给它提供表达全能性的环境。 【解析】
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考点分析:
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胚胎干细胞在基础生物学研究和临床应用方面具有重要价值。下图是胚胎干细胞获取方法图解。

说明: 6ec8aac122bd4f6e

(1)早期发育的胚胎分为_____________________几个主要阶段。(2)C、D细胞分别为__________和__________,它们的形态特性是______________________________。

(3)胚胎干细胞有何应用前景?(说出两例)。______________________________________________________________________________。

(4)我国政府禁止生殖性克隆,但不反对治疗性克隆的研究,请你谈谈为什么要反对克隆人? ____________________________________________________________________________________________________________。

 

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(1)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解,请根据图回答下列问题:

说明: 6ec8aac122bd4f6e

①请用箭头把代表各图解的字母按单克隆制备过程的顺序连接起来。

 

 

②在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞,是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有____________、____________的特性。

③由图中可看出,单克隆抗体制备过程运用了____________和____________的动物细胞工程技术手段。

(2)金茶花是中国特有的观赏品种,但易得枯萎病,降低观赏价值。科学家在某种植物中找到了抗枯萎病的基因,用转基因方法培育出了抗枯萎病的新品种。请据图回答:

说明: 6ec8aac122bd4f6e

①获得b并将b连接到a上形成c,常用到的酶有____________。

②通过植物组织培养技术可快速、大量培养该抗病新品种,请简述此技术的基本流程。________________________

 

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2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光,这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况,帮助推断蛋白质的功能。我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪在东北农业大学的种猪场自然分娩产出,这标志着我国在转基因克隆猪技术领域已达到世界领先水平。下图为我国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程示意图,请据图回答:

说明: 6ec8aac122bd4f6e

(1)图中通过过程①、②形成重组质粒,需要限制性内切酶切取目的基因、切割质粒。若限制性内切酶Ⅰ的识别序列和切点是一G↓GATCC一,限制性内切酶Ⅱ的识别序列和切点是—↓GATC一。在质粒上有酶I的一个切点,在目的基因的两侧各有1个酶Ⅱ的切点。

①请画出质粒被限制酶I切割后所形成的黏性末端。

 

 

②在DNA连接酶的作用下,上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来? _____。理由是_____________________________________。

(2)GFP基因与目的基因一起构建到载体上不影响目的基因的表达,也不影响由目的基因控制合成的蛋白质的结构与功能,且对细胞无毒性作用,因此GFP基因可以运用作为基因表达载体上的______。

(3)过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时,采用最多也最有效的方法是____________。然后还要通过____________技术来检测绿色荧光蛋白基因是否已重组到猪胎儿成纤维细胞的染色体DNA上。

(4)为了获得更多的猪卵母细胞,可通过对母猪注射____________的方法,做超数排卵处理,并将所采集到的卵母细胞在体外培养到____________期即可通过显微操作将其细胞核去除。

(5)早期胚胎的培养液成分较复杂,除一些无机盐和有机盐类外,还需添加维生素、激素、__________________等物质。

(6)绿色荧光蛋白转基因克隆猪的培育过程属于______生殖。目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白,黄色荧光蛋白等,采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是:______(用数字表示)。

①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列

②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计

③蓝色荧光蛋白基因的修饰(合成)

④表达出蓝色荧光蛋白

 

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(多选)基因工程中,构建基因表达载体时(   )

A.需要加入启动子、终止子、标记基因、目的基因等元件

B.目的基因只能从目的生物中获取

C.启动子将启动表达载体的复制

D.剪切中形成的末端都可由T4 DNA连接酶连接

 

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(多选)下列关于体内受精和早期胚胎发育的叙述,错误的是:(   )

A.哺乳动物的卵泡是在出生前形成的

B.在自然条件下,受精是在子宫内完成的

C.内细胞团是在原肠胚期形成的

D.桑椹胚前的每一个细胞都具有发育成完整胚胎的潜能

 

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