(7分)下图表示利用基因工程培育抗虫棉过程,据图回答下列有关问题。
(1)若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—↓GATC—,限制酶Ⅱ识别序列和切点是—G↓GATCC—,那么在①过程中,应用限制酶 切割抗虫基因,用限制酶 切割质粒,否则将不能得到符合要求的重组质粒。
(2)将通过②过程得到的大肠杆菌涂布在含有 的培养基上,若能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒,反之则说明没有导入。
(3)要确定抗虫基因导入后,是否能稳定遗传并表达,需进行检测和检定工作,则在个体水平上的鉴定过程可简述为: 。经筛选分析,该植株细胞中含有一个携带抗虫基因的DNA片段,因此可以把它看作是杂合子。理论上,该转基因植株自交产生的F1代中,仍具有抗虫特性的植株占总数的 。
(4)⑤过程所用的现代生物技术称为 ,根细胞通过⑤过程,能形成棉植株的原因是根细胞具有 。
(6分)为了解基因结构,通常选取一特定长度的线性DNA分子,先用一种限制酶切割,通过电泳技术将单酶水解片段分离,计算相对大小;然后再用另一种酶对单酶水解片段进行降解,分析片断大小。下表是某小组进行的相关实验。
已知一线性DNA序列共有5000bp(bp为碱基对) |
第一步水解 |
产物 (单位bp) |
第二步水解 |
产物 |
A酶切割 |
2100 |
将第一步水解产物分离后,分别用B酶切割 |
1900 200 |
|
1400 |
800 600 |
|||
1000 |
1000 |
|||
500 |
500 |
|||
B酶切割 |
2500 |
将第一步水解产物分离后,分别用A酶切割 |
1900 600 |
|
1300 |
800 500 |
|||
1200 |
1000 200 |
|||
经A酶和B酶同时切割 |
1900 1000 800 600 500 200 |
(1)该实验设计主要体现了 原则。
(2)由实验可知,在这段已知序列上,A酶与B酶的识别序列分别为 个和 个。
(3)根据表中数据,请在答题纸图中标出相应限制性酶的酶切位点并注明相关片断的大小。
(4)已知BamH Ⅰ与BglⅡ的识别序列及切割位点如右图所示,用这两种酶和DNA连接酶对一段含有数个BamH Ⅰ和BglⅡ识别序列的DNA分子进行反复的切割、连接操作,若干循环后“AGATCC//TCTAGG”和“GGATCT//CCTAGA”序列明显增多,该过程中DNA连接酶催化 键的形成。
以下关于血红蛋白提取和分离的过程及原理叙述,不正确的是
A.红细胞洗涤过程中要加入5倍体积的蒸馏水,重复洗涤三次
B.将血红蛋白溶液放在质量分数为O.9%的NaCl溶液透析12小时
C.凝胶装填在色谱柱内要均匀,不能有气泡存在
D.蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较大的移动速度慢
下列有关DNA聚合酶链式反应(PCR)的说法正确的是
A.需要引物 B.始终在高于70℃的条件下进行
C.需要加DNA连接酶 D.需要加热稳定性高的DNA聚合酶
可以利用哺乳动物成熟的红细胞为实验材料进行的实验有
A.分离细胞膜 B.DNA的粗提取
C.分离并纯化血红蛋白 D.进行细胞培养
下列关于造成相关实验失败的原因分析中,正确的是
A.制作腐乳的卤汤时,料酒加的量较多,易造成豆腐腐败变质
B.制作果酒时,先除去葡萄的枝梗再进行冲洗,可能造成葡萄霉烂
C.制作果醋时,通氧不足或温度过低,可能造成发酵失败
D.用加酶洗衣粉洗涤污渍时,浸泡时间不足,会造成洗涤效果差