Question

（12分）降钙素是一种多肽类激素，临床上用于治疗骨质疏松症等。人的降钙素活性很低，半衰期较短。某科学机构为了研发一种活性高、半衰期长的新型降钙素，从预期新型降钙素的功能出发，推测相应的脱氧核苷酸序列，并人工合成了两条 72个碱基的 DNA单链，两条链通过 18个碱基对形成部分双链 DNA片段，再利用 Klenoｗ酶补平，获得双链 DNA，过程如图。在此过程中发现，合成较长的核苷酸单链易产生缺失碱基的现象。分析回答下列问题：

 （1）Klenoｗ酶是一种         酶，合成的双链DNA有       个碱基对。

（2）获得的双链 DNAＥcoRI（识别序列和切割位点-G↓ AATTC-）和 BamHI（识别序列和切割位点-T↓TATCC-）双酶切后插入到大肠杆菌质粒中，筛选含重组质粒的大肠杆菌并进行 DNA测序验证

①大肠杆菌是理想的受体细胞，这是因为它               。

②设计ＥcoRI和 BamHI双酶切的目的是               。

③要进行重组质粒的鉴定和选择，需要大肠杆菌质粒中含有            。

（3）经 DNA测序表明，最初获得的多个重组质粒，均未发现完全正确的基因序列，最可能的原因是                    。

   （4）人工合成的目的基因与人体内的降钙素基因在结构上不同之处在于      。

   （5）如果从人体细胞中直接提取目的基因并导入细菌中，能否获得降钙素，为什么？

Answer

（12分）（1）DNA聚合酶126（2分）

   （2）①繁殖快、单细胞、遗传物质相对较少（2分）

       ②保证目的基因和运载体定向连接（或防止目的基因和运载体在酶切后产生的末端发生任意连接）（2分）

       ③标记基因（1分）

   （3）合成的核苷酸单链仍较长，产生缺失碱基的现象（1分）

   （4）人工合成基因无人降钙素基因中的内含子序列（1分）

   （5）不能（1分），因为直接提取的目的基因中包含内含子与外显子序列，导人细菌中，细胞不能识别内含子区段，而会全部进行编码．台成的多肽则不是降钙素（2分）