单基因遗传病可以通过核酸杂交技术进行早期诊断。镰刀型细胞贫血症是一种在地中海地区发病率较高的单基因遗传病。已知红细胞正常个体的基因型为BB、Bb,镰刀型细胞贫血症患者的基因型为bb。有一对夫妇被检测出均为该致病基因的携带者,为了能生下健康的孩子,每次妊娠早期都进行产前诊断。下图为其产前核酸分子杂交诊断和结果示意图。
(1)从图中可见,该基因突变是由于 引起的。巧合的是,这个位点的突变使得原来正常基因的限制酶切割位点丢失。正常基因该区域上有3个酶切位点,突变基因上只有2个酶切位点,经限制酶切割后,凝胶电泳分离酶切片段,与探针杂交后可显示出不同的带谱,正常基因显示 条,突变基因显示 条。
(2)DNA或RNA分子探针要用 等标记。利用核酸分子杂交原理,根据图中突变基因的核苷酸序列(…ACGTGTT…),写出作为探针的核糖核苷酸序列 。
(3)根据凝胶电泳带谱分析可以确定胎儿是否会患有镰刀型细胞贫血症。这对夫妇4次妊娠的胎儿Ⅱl~II4中基因型BB的个体是 ,Bb的个体是 ,bb的个体是 。
现有甲、乙两个烟草品种(2n=48),其基因型分别为aaBB和AAbb,这两对基因位于非同源染色体上,且在光照强度大于800勒克斯时,都不能生长,这是由于它们中的一对隐性纯合基因(aa或bb)作用的结果。取甲乙两品种的花粉分别培养成植株,将它们的叶肉细胞制成原生质体,并将两者相混,使之融合,诱导产生细胞团。然后,放到大于800勒克斯光照下培养,结果有的细胞团不能分化,有的能分化发育成植株。请回答下列问题:
(1)甲、乙两烟草品种花粉的基因型分别为__________ _和________ ____。
(2)将叶肉细胞制成原生质体,使用_ 去除细胞壁。
(3)在细胞融合技术中,常用的促融剂是___________。
(4)细胞融合后诱导产生的细胞团叫_______________。
(5)在大于800勒克斯光照下培养,有________种细胞团不能分化;能分化的细胞团是由__________的原生质体融合来的(这里只考虑2个原生质体的相互融合)。由核细胞团分化发育成的植株,其染色体数是___________,基因型是___________。该植株自交后代中,在大于800勒克斯光照下,出现不能生长的植株的概率是_________。
下图表示从苏云金芽孢杆菌获取抗虫基因(简称Bt基因)培育转基因抗虫棉的图【解析】
请回答:
(1)从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用的工具是 ,它主要是从 中分离纯化出来的。
(2)将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是 。
(3)写出b过程完整表达式:____________ _________。
(4)我国在“863”计划资助下开展Bt抗虫棉育种等研究,这将对________________和农业可持续发展产生巨大影响。
(5)基因工程是否成功可以在不同水平层次上进行检测。在性状水平上鉴定的方法是 ;在DNA水平上鉴定的方法是 ;在蛋白质水平进行检测的方法是从转基因植株提取蛋白质,进行 ,判断是否产生杂交带。
基因敲除是应用DNA重组原理发展起来的一门新兴技术。通常意义上的基因敲除主要是应用DNA重组原理,用设计好的DNA片段替代动物细胞内的基因片段,从而达到基因敲除的目的。在后基因组时代,研究的重点是利用转基因动物或基因敲除的动物研究基因的功能,运用基因重组进行基因敲除依然是构建基因敲除动物模型中最普遍的使用方法,其基本原理如下图所示。请回答下列问题:
(1)在把目的基因导入受体细胞前,应选择一个合适的 与之结合,在这一过程中所需要的工具酶是限制性内切酶和 。
(2)如果要获得一只含目的基因的小鼠,则一般是通过病毒感染或显微注射技术将目的基因导入受体细胞,选择的受体细胞应该是 。
(3)在此类基因操作中,通常可以用水母的发光蛋白作为标记物。水母发光蛋白有发光环,能在一定条件下发出荧光,现已将这种蛋白质的基因作为生物转基因的标记,在转基因技术中,这种蛋白质的作用是( )
A.促使目的基因导入受体细胞中 B.促使目的基因在寄主细胞中复制
C.使目的基因的转移容易被检测出来 D.使目的基因容易表达成功
(4)按上述操作获得的转基因小鼠是杂合子,如果想获得一个目的基因纯合的个体,以研究该种动物体内靶基因的功能,应该如何进行下一步实验?
农业科技工作者在烟草中找到了一抗病基因,现拟采用基因工程技术将该基因转入棉花,培育抗病棉花品系。请回答下列问题:
(1)要使运载体与该抗病基因连接,首先应使用__________进行切割。假如运载体被切割后,得到的分子末端序列为,则能与该运载体连接的抗病基因分子末端是( )
(2)切割完成后,采用 酶将运载体与该抗病基因连接,连接后得到的DNA分子称为 。
(3)再将连接得到的DNA分子导入农杆菌,然后用该农杆菌去 棉花细胞,利用植物细胞具有的 性进行组织培养,从培养出的植株中 出抗病的棉花。
(4)该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是( )
A.淀粉 B.脂类 C.蛋白质 D.核酸 E.抗生素
(5)如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测,应该用 作为探针。
(6)科学家发现转基因植株的抗病基因的传递符合孟德尔遗传规律:
①将该转基因植株与_______杂交,其后代中抗病类型与不抗病类型的数量比为1∶1。
②若该转基因植株自交,则其后代中抗病类型与不抗病类型的数量比为______ __。
③若将该转基因植株的花药作离体培养,则获得的再生植株群体中抗病类植株占___ _%
若某种原核细胞的某一基因编码区原有303个碱基对,现经过突变,有300个碱基对,它控制合成的蛋白质分子与原来基因所控制的蛋白质分子相比较,差异可能是( )
A.只相差一个氨基酸,其他顺序不变 B.长度相差一个氨基酸,其他顺序也有改变
C.长度不变,但顺序改变 D.A、B都有可能