（16分）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈l、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
（1）一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后，分别含有 、 个游离的磷酸基团。
（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。
（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Srna Ⅰ切割，原因是 。（4）与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。
（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶。
（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。
（7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。
（16分）红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然EP0来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO）期间要生产流程如右图
（1）图中①所指的是 技术。
（2）图中②所指的物质是 ，③所指的物质是 。
（3）培养重组CHO 细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞严物积累对细胞自身造成危害，应定期更换 。
（4）检测 rhEPO外活性需用抗rhEPO单克隆抗体。分泌单克隆抗体的 细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。
（5）动物体内能产生特异性抗体的细胞称为____ 。在抗体，溶菌酶、淋巴因子和编码抗体的基因这四种物质中不属于免疫活性物质是_____。在吞噬细胞、淋巴细胞和红细胞这三类细胞中不属于免疫细胞的____。
细胞内有氧呼吸第二阶段为丙酮酸的分解，其反应式为：
 |
为探究该反应发生的场所，甲、乙二人分别做了如下实验：
甲：步骤一：用某种物质处理新鲜肝脏，使其分散成为单个细胞。
步骤二：用含C6H12O6的完全营养液培养肝细胞一段时间。
步骤三：离心得到细胞质基质及线粒体基质，分装在标号为1、2的两支试管中。
步骤四：取新配制的澄清石灰水适量，分别滴入两支试管内。
现 象：1、2两支试管均变浑浊。
结 论：丙酮酸的分解既发生在细胞质基质中，又发生在线粒体基质中。
乙：第一步同甲步骤一，第二步同甲步骤三，第三步待续。第四步同甲步骤四
请回答下列问题:
（1）甲方法步骤一中的处理剂为 ___ ____。
（2）实验完成后，老师指出甲同学的实验结果是错误的。请分析其结果出错的原因：
__。
（3）现给你如下试剂：丙酮酸及完全营养液（不含糖），清水，吸管若干，新配制的澄清石灰水。请继续乙的实验，探究丙酮酸水解发生的场所。
步骤三：________________________________________ ________ ____。
预测实验现象及结论：
①现象：_________ _______ __ ______。
结论：______ _________________ _____。
②现象：________________ ___。
结论：______ _________________ _____。
③现象：_________ _______ __ ______。
结论：______ _________________ _____。
（12分）以下分别是探索温度、反应物浓度、pH对
淀粉酶催化作用的实验结果图示。
（1）探索温度对酶活性影响最合理的实验步骤是（ ）
①取3支试管，编号并分别注入2mL淀粉液 ②向各试管注入1mL淀粉酶溶液 ③向各试管滴一滴碘液 ④将3支试管分别放在60℃的热水、沸水和冰块中保持5min ⑤观察实验现象
A．①②④③⑤ B．①③②④⑤ C．①③④②⑤ D．①④②③⑤
（2）图B中，反应物达到某一浓度时，反应速度不再上升，原因是：__________________
__________________________________。若检验本实验的生成物，应选用的试剂是________________。
（3）图C曲线的变化表示酶活性与pH的关系是：__________＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿______________________________________________________________________________________。
（4）下图是测量过氧化氢酶与过氧化氢反应放出
的实验装置。水槽内注有清水，倒置的量筒内也充满了清水。实验步骤如下：
①将4片圆形小滤纸片在肝脏研磨液浸泡后取出，贴在反应小室上侧的内壁，并向小室内加入10mL
3％
溶液（如图A）；②将反应小室旋转180度，呈图B所示状态；③每隔30秒读取并记录量筒中水面的刻度，共进行5分钟．④将圆形小滤纸片的数量改成2片，重复前面步骤。请回答：
a 该实验探究的问题是：____________________与酶促反应速度的关系。
b 实验材料选择中应注意的是 ；
原因是 。
（10分）下图表示处于不同生理状态的三个洋葱鳞片时表皮细胞，请回答：
（1）A细胞处于何种生理状态________。
（2）图中细胞液浓度依次是________＞________＞______。
（3）如图所示，A、B、C三个细胞处于不同浓度的溶液中，则A图与B图细胞所处的外界溶液浓度关系是_____＞_____。
（4）假设将洋葱鳞片叶表皮细胞制成装片，并使之处于高渗溶液中而发生质壁分离，用显微镜观察一个细胞的质壁分离过程，发现该细胞形态变化的顺序将如上图所示的从____→_____→_____。
（5）图中标号①处的物质是________。
（6分）根据右图不完整的呼吸作用示意图，解答下列问题：
（1）图中方格内的物质名称是_______________。
（2）从图中选择有关的字母填在题的括号内：
①有氧呼吸的途径是___________。②其中产能最多的是
___________阶段。③产[H]的阶段是___________。
（3）图中A发生的场所是 ，E表示的物质是 。
