（9分）人的血清白蛋白（HAS）在临床上需求量很大，通常从血液中提取。但由于艾滋病病毒等的威胁与日俱增，使人们对血液制品的使用顾虑重重。如果应用现代生物科学技术，将人的血清白蛋白基因导人奶牛细胞中，那么利用牛的乳汁生产血清白蛋白就会安全、高效地满足人类需求。下图是利用奶牛乳汁生产人类血清白蛋白的图解，根据下图回答：
（1）以上过程涉及的现代生物技术中，属于细胞工程的有 。
（2）在基因工程中，我们称①为目的基因，请你举出获取目的基因的主要方法：
（至少答两种）。在①进入③之前要构建基因表达载体，这是基因工程的核心，除目的基因外，基因表达载体还必须含有 ，将①导人③的常用方法是 。
（3）图中②一般经过 处理可以得到③，从③到④的过程中一般利用未受精的卵母细胞去核后作为受体细胞，对卵母细胞的去核处理一般选择在
时期进行。
（4）将⑤送人⑦的最佳时期是 期。
（5）在胚胎发育过程中，囊胚进一步扩大，会导致 破裂，胚胎从中伸展出来，这一过程叫做 。
（9分）克隆羊“多利”的问世，很快在全世界引发了一场大讨论，其中关于“治疗性克隆”的问题也成为人们关注的焦点。下图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程，请据图作答。
（1）过程A表示 ，是目前实现体细胞克隆的关键技术，该技术的主要操作是用患者的体细胞提供细胞核，由 [ ① ] 细胞提供细胞质，进行人工重组得到重组细胞。
（2）经过程B得到的结构中，④ （填名称）是未分化的细胞，因而这些细胞被认为是胚胎干细胞。
（3）“治疗性克隆”的结果说明高度分化的体细胞的核仍然具有 _。相同的胚胎干细胞，“克隆”的结果各种各样，如有的是神经细胞，有的是血细胞，有的是肌肉细胞，可见胚胎干细胞具有 的全能性，究其本质原因是 的结果。
（4）对于“治疗性克隆”仍然存在许多争论，有一男子患有白血病，后经医生利用其出生时保留的脐带血进行治疗后康复，你认为这种做法符合伦理道德吗 为什么?
.
（16分）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，圈l、圈2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
（1）一个图1所示的质粒分子经Sma Ⅰ切割前后，分别含有 、 个游离的磷酸基团。
（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越 。
（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用Srna Ⅰ切割，原因是 。（4）与只使用EcoR I相比较，使用BamH Ⅰ和Hind Ⅲ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止 。
（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入 酶。
（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了 。
（7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在 的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。
（16分）红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然EP0来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO）期间要生产流程如右图
（1）图中①所指的是 技术。
（2）图中②所指的物质是 ，③所指的物质是 。
（3）培养重组CHO 细胞时，为便于清除代谢产物，防止细胞严物积累对细胞自身造成危害，应定期更换 。
（4）检测 rhEPO外活性需用抗rhEPO单克隆抗体。分泌单克隆抗体的 细胞，可由rhEPO免疫过的小鼠B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成。
（5）动物体内能产生特异性抗体的细胞称为____ 。在抗体，溶菌酶、淋巴因子和编码抗体的基因这四种物质中不属于免疫活性物质是_____。在吞噬细胞、淋巴细胞和红细胞这三类细胞中不属于免疫细胞的____。
细胞内有氧呼吸第二阶段为丙酮酸的分解，其反应式为：
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为探究该反应发生的场所，甲、乙二人分别做了如下实验：
甲：步骤一：用某种物质处理新鲜肝脏，使其分散成为单个细胞。
步骤二：用含C6H12O6的完全营养液培养肝细胞一段时间。
步骤三：离心得到细胞质基质及线粒体基质，分装在标号为1、2的两支试管中。
步骤四：取新配制的澄清石灰水适量，分别滴入两支试管内。
现 象：1、2两支试管均变浑浊。
结 论：丙酮酸的分解既发生在细胞质基质中，又发生在线粒体基质中。
乙：第一步同甲步骤一，第二步同甲步骤三，第三步待续。第四步同甲步骤四
请回答下列问题:
（1）甲方法步骤一中的处理剂为 ___ ____。
（2）实验完成后，老师指出甲同学的实验结果是错误的。请分析其结果出错的原因：
__。
（3）现给你如下试剂：丙酮酸及完全营养液（不含糖），清水，吸管若干，新配制的澄清石灰水。请继续乙的实验，探究丙酮酸水解发生的场所。
步骤三：________________________________________ ________ ____。
预测实验现象及结论：
①现象：_________ _______ __ ______。
结论：______ _________________ _____。
②现象：________________ ___。
结论：______ _________________ _____。
③现象：_________ _______ __ ______。
结论：______ _________________ _____。
（12分）以下分别是探索温度、反应物浓度、pH对
淀粉酶催化作用的实验结果图示。
（1）探索温度对酶活性影响最合理的实验步骤是（ ）
①取3支试管，编号并分别注入2mL淀粉液 ②向各试管注入1mL淀粉酶溶液 ③向各试管滴一滴碘液 ④将3支试管分别放在60℃的热水、沸水和冰块中保持5min ⑤观察实验现象
A．①②④③⑤ B．①③②④⑤ C．①③④②⑤ D．①④②③⑤
（2）图B中，反应物达到某一浓度时，反应速度不再上升，原因是：__________________
__________________________________。若检验本实验的生成物，应选用的试剂是________________。
（3）图C曲线的变化表示酶活性与pH的关系是：__________＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿______________________________________________________________________________________。
（4）下图是测量过氧化氢酶与过氧化氢反应放出
的实验装置。水槽内注有清水，倒置的量筒内也充满了清水。实验步骤如下：
①将4片圆形小滤纸片在肝脏研磨液浸泡后取出，贴在反应小室上侧的内壁，并向小室内加入10mL
3％
溶液（如图A）；②将反应小室旋转180度，呈图B所示状态；③每隔30秒读取并记录量筒中水面的刻度，共进行5分钟．④将圆形小滤纸片的数量改成2片，重复前面步骤。请回答：
a 该实验探究的问题是：____________________与酶促反应速度的关系。
b 实验材料选择中应注意的是 ；
原因是 。
