Question

血红蛋白是人和其他脊椎动物红细胞的主要组成成分，负责血液中O₂和部分CO₂的运输。请根据血红蛋白的提取和分离流程图回答问题。

（1）将实验流程补充完整：A为                       ，B为                     。凝胶色谱法的基本原理是根据               而达到蛋白质分离的有效方法。

（2）洗涤红细胞的目的是去除               ，洗涤次数过少，无法除去             ；离心速度过高和时间过长会使                          一同沉淀。达不到分离的效果。洗涤干净的标志是                         。释放血红蛋白的过程中起作用的是                               。

（3）在洗脱过程中加入物质的量浓度为20 mmol/L的磷酸缓冲液（pH为7．0）的目的是                                                    。如果红色区带                  ，说明色谱柱制作成功。

      

（4）右图为填充的凝胶色谱柱，据图回答以下问题：

①自己制作凝胶色谱柱时，在色谱柱底部d位置相当于多孔板的结构由                  替代。

②装填凝胶色谱柱时，色谱柱内不能有气泡存在，原因是              。

③洗脱用的液体应尽量与浸泡凝胶所用的液体          （填“相同”或“不同”），洗脱时，对洗脱液的流速要求是                            。

Answer

（1）血红蛋白的释放  样品的加入和洗脱  相对分子质量的大小 （2）杂蛋白（血浆蛋白） 血浆蛋白  白细胞和淋巴细胞  离心后的上清液中没有黄色  蒸馏水和甲苯 （3）准确模拟生物体内的生理环境，保持体外的pH和体内的一致  均匀一致的移动 （4）①尼龙网和尼龙纱 ②气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低分离效果  ③相同 保持稳定

【解析】略