（11分）目前基因工程所用的质粒载体主要是以天然细菌质粒的各种元件为基础重新组建的人工质粒，pBR322质粒是较早构建的质粒载体，其主要结构如图一所示。
(1)构建人工质粒时要有抗性基因，以便于________。观察上图，如果A为质粒，则C表示 。
(2)pBR322分子中有单个EcoRⅠ限制酶作用位点，EcoRⅠ只能识别序列—GAATTC—，并只能在G与A之间切割。若在某目的基因的两侧各有1个EcoRⅠ的切点，请画出目的基因两侧被限制酶EcoRⅠ切割后所形成的黏性末端。
_______________________________________________________________________
(3)pBR322分子中另有单个的BamHⅠ限制酶作用位点，现将经BamHⅠ处理后的质粒与用另一种限制酶BglⅡ处理得到的目的基因，通过____________作用恢复________________________键，成功地获得了重组质粒。能形成重组质粒的原因是_______________________________________________________________________
(4) 作为受体大肠杆菌应不含_______________________，以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养，得到如图二的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上，使绒布面沾上菌落，然后将绒布按到含四环素的培养基上培养，得到如图三的结果(空圈表示与图二对照无菌落的位置)。与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是_______，图三结果显示，多数大肠杆菌导入的是______________。
（5）基因工程中使用的限制酶，其特点是_______________________，下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别，Apr表示抗青霉素的抗性基因，Tcr表示抗四环素的抗性基因。
将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X－1混合连接，连接后获得的质粒类型有＿＿＿。（可多选）A．X－1 B．X－2 C．X－3 D．X－4
(7分)人体细胞内含有抑制癌症发生的p53基因，生物技术可对此基因的变化进行检测。
（1）检测基因前要通过PCR进行DNA的扩增。PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶，下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能，这是因为_____________________________________________________________________。
（2）下图表示从正常人和患者体内获取的p53基因的部分区域。与正常人相比，患者在该区域的碱基会发生改变，在上图中用方框圈出发生改变的碱基对；这种变异被称为___________________。
（3）已知限制酶E识别序列为CCGG，若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的p53基因部分区域(见上图)，那么正常人的会被切成______个片段；而患者的则被切割成长度为______对碱基和______对碱基的两种片段。
（4）如果某人的p53基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和460碱基对的四种片段，那么该人的基因型是________(以P+表示正常基因，P-表示异常基因。
（10分）下图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是黄牛，请据图回答下列问题：
（1）应用1中获得的小牛，其遗传物质来源于 ，为一次获得多个细胞B，往往需要向供体2内注入的是促性腺激素，而不是性激素，原因是 。
（2）将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养，其目的是 。
（3）通过应用2获得小牛，涉及到胚胎工程的最后一道“工序”是 。
（4）应用3中的细胞D取自囊胚的 ，细胞C取自牛胎儿的 。
（5）应用4中获得二分胚①和②，移植到受体牛中得到两只小牛，两只小牛的性别是 。
（6）如果体外受精后，在精核与卵核融合之前，用微型吸管除雄核，再用细胞松弛素B处理（作用类似于用秋水仙素处理植物细胞），处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是 。
（7）如果将外源基因导入牛受精卵，则外源基因可能随机插入到牛受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因牛，有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因 （2分）
（11分）回答有关“试管婴儿”的问题：
(1) “试管婴儿”在生物学上所依据的原理是
A．有性生殖 B．组织培养 C．克隆技术 D．基因工程
(2)“试管婴儿”的形成用到下列哪些技术？（填序号）__________ 。
①体外培养 ②人工授精 ③胚胎移植 ④核移植
(3)要得到“同卵双胞胎”，采用的技术有_______。
(4)在核移植过程中，供体细胞一般选用传代到________代以内的转基因体细胞，原因是______________________________________________________。
(5)现在大多数人反对设计婴儿性别，其原因是________________________ 。
(6)体细胞核移植生产的多利和试管婴儿的过程中是否遵循孟德尔的遗传规律？为什么？（2分）
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(7)试管婴儿的核遗传物质来自一父二母。这种说法对吗？为什么？（2分）
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胚胎干细胞介导法(转基因动物培育的途径之一)的主要操作过程是：将外源基因导入胚胎干细胞，然后将转基因的胚胎干细胞注射于受体动物胚胎后可参与宿主的胚胎构成，形成嵌合体，直至达到种系嵌合。下列是实验过程示意图，有关分析不正确的是
A．①的培养基中需加入动物血液，并保持无菌、温度适宜、营养充足
B．与②相比，③的培养基中应加入有筛选作用的物质
C．产生的嵌合体小鼠通过杂交可以获得纯合体转基因小鼠
D．外源DNA导入的ES细胞产生的变异类型属于基因重组
如图，a、b、c、d表示现代生物技术，①②③④表示其结果，下列说法不正确的是
A.a是核移植技术，①反映了动物体细胞核具有全能性
B.b是体外受精技术，②的设计产生有一定的伦理争议
C.c是胚胎分割技术，③中个体的基因型和表现型一定相同
D.d是转基因技术，获得④中个体常用的受体细胞是受精卵
