(10分)为探究某物质(X)的作用,研究者提出了以下实验思路
(1)实验分组:
甲组:培养液+Y细胞+标记的胸腺嘧啶脱氧核苷)+生理盐水
乙组:培养液+Y细胞+ (生理盐水配制),每组设置若干个重复样品。
(2)分别测定两组的CRD(细胞内的放射性强度),求每组的平均值。
(3)将各样品在适宜条件下培养合适时间后,测定其CRD,求每组平均值并进行统计分析。(与说明,答题时用X、CRD、3H-TdR表示相关名词;Y细胞是能增殖的高等动物体细胞)
请回答:(1)实验目的:__________________________________________
(2)预测实验结果及结论:
_________________________________________________________________
__________________________________________________________________
__________________________________________________________________
(3)实验中采用3H-TdR的原因:__________________________________________________________________。
(11分)有性生殖的生物产生后代需要进行受精作用,植物体细胞杂交要进行原生质体的融合,单克隆抗体的制备需要进行动物细胞融合,可见细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程,据图回答相关问题:
(1)若a、b分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉,且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用,在光照强度大于800 lx时两种烟草都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞,较为简便的筛选方法是_______ ________。
(2)若a、b表示两种植物体细胞,则由d细胞形成杂种植株的原理是____________
这种育种方法的优点是_ 。某同学提出,用上图所示方法不能获得纯种,若用白菜和甘蓝的花粉细胞代替图中的体细胞,再采用上图所示的过程即可获得纯种。该同学的方案中有缺陷,请对该方案加以完善: ____________________________________________________________
(3)若a、b为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞,则d细胞的特点是_____________________。由d细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较,具有__________________________ _ 的特点。生产上一般不能通过直接培养B淋巴细胞的方法生产单克隆抗体的主要原因是_______________。与植物原生质体融合相比,动物细在诱导融合方法方面的主要区别是还常用______________诱导融合。通过对鼠和人控制抗体产生的基因进行拼接,实现了对鼠源杂交瘤抗体的改造,生产出鼠—人嵌合抗体,改造抗体属于________工程的范畴。
(4)下列各图表示单克隆抗体制备过程的各阶段图解,请用箭头把代表各图解的字母按单克隆抗体制备过程的顺序连接起来。顺序是:(2分)
(11分)目前基因工程所用的质粒载体主要是以天然细菌质粒的各种元件为基础重新组建的人工质粒,pBR322质粒是较早构建的质粒载体,其主要结构如图一所示。
(1)构建人工质粒时要有抗性基因,以便于________。观察上图,如果A为质粒,则C表示 。
(2)pBR322分子中有单个EcoRⅠ限制酶作用位点,EcoRⅠ只能识别序列—GAATTC—,并只能在G与A之间切割。若在某目的基因的两侧各有1个EcoRⅠ的切点,请画出目的基因两侧被限制酶EcoRⅠ切割后所形成的黏性末端。
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(3)pBR322分子中另有单个的BamHⅠ限制酶作用位点,现将经BamHⅠ处理后的质粒与用另一种限制酶BglⅡ处理得到的目的基因,通过____________作用恢复________________________键,成功地获得了重组质粒。能形成重组质粒的原因是_______________________________________________________________________
(4) 作为受体大肠杆菌应不含_______________________,以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。将大肠杆菌在含氨苄青霉素的培养基上培养,得到如图二的菌落。再将灭菌绒布按到培养基上,使绒布面沾上菌落,然后将绒布按到含四环素的培养基上培养,得到如图三的结果(空圈表示与图二对照无菌落的位置)。与图三空圈相对应的图二中的菌落表现型是_______,图三结果显示,多数大肠杆菌导入的是______________。
(5)基因工程中使用的限制酶,其特点是_______________________,下图四种质粒含有E1和E2两种限制酶的识别,Apr表示抗青霉素的抗性基因,Tcr表示抗四环素的抗性基因。
将两端用E1切开的Tcr基因与用E1切开的质粒X-1混合连接,连接后获得的质粒类型有___。(可多选)A.X-1 B.X-2 C.X-3 D.X-4
(7分)人体细胞内含有抑制癌症发生的p53基因,生物技术可对此基因的变化进行检测。
(1)检测基因前要通过PCR进行DNA的扩增。PCR反应体系中含有热稳定DNA聚合酶,下面的表达式不能正确反映DNA聚合酶的功能,这是因为_____________________________________________________________________。
(2)下图表示从正常人和患者体内获取的p53基因的部分区域。与正常人相比,患者在该区域的碱基会发生改变,在上图中用方框圈出发生改变的碱基对;这种变异被称为___________________。
(3)已知限制酶E识别序列为CCGG,若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的p53基因部分区域(见上图),那么正常人的会被切成______个片段;而患者的则被切割成长度为______对碱基和______对碱基的两种片段。
(4)如果某人的p53基因部分区域经限制酶E完全切割后,共出现170、220、290和460碱基对的四种片段,那么该人的基因型是________(以P+表示正常基因,P-表示异常基因。
(10分)下图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况,其中供体1是良种荷斯坦高产奶牛,供体2是黄牛,请据图回答下列问题:
(1)应用1中获得的小牛,其遗传物质来源于 ,为一次获得多个细胞B,往往需要向供体2内注入的是促性腺激素,而不是性激素,原因是 。
(2)将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养,其目的是 。
(3)通过应用2获得小牛,涉及到胚胎工程的最后一道“工序”是 。
(4)应用3中的细胞D取自囊胚的 ,细胞C取自牛胎儿的 。
(5)应用4中获得二分胚①和②,移植到受体牛中得到两只小牛,两只小牛的性别是 。
(6)如果体外受精后,在精核与卵核融合之前,用微型吸管除雄核,再用细胞松弛素B处理(作用类似于用秋水仙素处理植物细胞),处理后的受精卵可发育成小鼠。这种方法在动物新品种选育中的显著优点是 。
(7)如果将外源基因导入牛受精卵,则外源基因可能随机插入到牛受精卵DNA中。这种受精卵有的可发育成转基因牛,有的却死亡。请分析因外源基因插入导致受精卵死亡的最可能原因 (2分)
(11分)回答有关“试管婴儿”的问题:
(1) “试管婴儿”在生物学上所依据的原理是
A.有性生殖 B.组织培养 C.克隆技术 D.基因工程
(2)“试管婴儿”的形成用到下列哪些技术?(填序号)__________ 。
①体外培养 ②人工授精 ③胚胎移植 ④核移植
(3)要得到“同卵双胞胎”,采用的技术有_______。
(4)在核移植过程中,供体细胞一般选用传代到________代以内的转基因体细胞,原因是______________________________________________________。
(5)现在大多数人反对设计婴儿性别,其原因是________________________ 。
(6)体细胞核移植生产的多利和试管婴儿的过程中是否遵循孟德尔的遗传规律?为什么?(2分)
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(7)试管婴儿的核遗传物质来自一父二母。这种说法对吗?为什么?(2分)
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