Question

近20年来，PCR技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室的一种常规实验手段，其原理是利用DNA半保留复制，在试管中进行DNA的人工复制(如图)，在短时间内，将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍，从而使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。

(1)加热使DNA双链间的__________键完全打开，称为________；而在细胞中是在________酶的作用下进行的。

(2)如果只需要大量克隆模板DNA中间的某个特定区段，应该加入________种特定的引物。当温度降低至55 ℃时，引物与两条“舒展”的模板的特定位置结合，在DNA聚合酶的作用下，只能在引物的________端连接脱氧核苷酸，两条子链的延伸方向都是____________。

(3)PCR技术的必需条件，除了模板、原料、酶之外，至少还有三个条件，即液体环境、适宜的________和________，前者由________自动调控，后者则靠____来维持。

(4)通过PCR技术使DNA分子大量复制，如果将一个用¹⁵N标记的DNA分子放入试管中，以¹⁴N标记的脱氧核苷酸为原料，连续复制四次之后，则¹⁵N标记的DNA分子占全部DNA分子总数的比例是________。

Answer

(1)氢 解旋 解旋   (2)两 3′ 从子链的5′端向3′端延伸  (3)温度 酸碱度 PCR仪 缓冲液  (4)1/8

【解析】PCR技术加热是使DNA双链间氢键断开，称为解旋，在细胞内是由解旋酶进行的；将一个用15N标记的DNA分子放入试管中连续复制四次，会得到24=16个DNA分子，含15N的DNA分子有两个（原因半保留复制），则15N标记的DNA分子占全部DNA分子总数的比例是2/16=1/8。