某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题:
(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养,培养液及其它培养条件均相同。一段时间后,观察到甲细胞数量比乙细胞数量___________。
(2)在动物细胞培养时,应在含5%CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是______。
(3)在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长___________。药物试验需要大量细胞,两种细胞频繁传代,甲细胞比乙细胞可以传代的次数更______。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用_____________消化处理。
(4)已知癌细胞X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关,要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响,可将甲细胞分为A.B两组,A组细胞培养液中加入_______,B组细胞培养液中加入无菌生理盐水,经培养后,从A.B两组收集等量细胞,通过分别检测X基因在A.B两组细胞中的__________或_________合成水平的差异,确定Y的药效。
下图表示花药离体培养及单倍体育种的大致过程,据图回答下列问题:
(1)花药离体培养应用的是 技术,其理论基础是 。过程①是把幼小的花药分离出来,在无菌条件下放在人工培养基上进行离体培养,该培养基中加入的物质应该有 。(至少答三种)
(2)过程②是花药在培养基所提供的特定条件下发生多次细胞分裂,形成愈伤组织,此过程叫作 ,细胞分裂的方式是 。
(3)过程③是诱导愈伤组织分化出芽和根,最后长成植株。这一过程叫 。该植株是 植株,其特点是 ,生产上没有推广应用的价值,需经过程⑤ 处理。
(4) 愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根,再由芽发育成叶和茎。这一过程必须给予光照,其原因是___________能利用光能制造有机物,供试管苗生长发育。
要促进花粉细胞分裂生长,培养基中应有_________和______________两类激素。
在培育转基因植物的研究中,卡那霉素抗性基因(kan)常作为标记基因,只有含卡那霉素抗性基因的细胞才能在卡那霉素培养基上生长。下图为获得抗虫棉的技术流程。
请据图回答:
(1)A过程需要的酶有____________________。
(2)B过程及其结果体现了质粒作为运载体必须具备的两个条件是___________。
(3)C过程的培养基除含有必要营养物质、琼脂和激素外,还必须加入_______。
(4)如果利用DNA分子杂交原理对再生植株进行检测,D过程应该用_______作为探针。
(5)科学家发现转基因植株的卡那霉素抗性基因的传递符合孟德尔遗传规律。
①将转基因植株与_______杂交,其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为1:1。
②若该转基因植株自交,则其后代中抗卡那霉素型与卡那霉素敏感型的数量比为___________。
③若将该转基因植株的花药在卡那霉素培养基上作离体培养,则获得的再生植株群体中抗卡那霉素型植株占_____%。
请回答下列与实验室提取芳香油有关的问题:
(1)植物芳香油的提取可采用的方法有压榨法、________和________。
(2)芳香油溶解性的特点是不溶于________,易溶于________,因此可用______作为提取剂来提取芳香油。
(3)橘子果实含有芳香油,通常可用__________作为材料提取芳香油,而且提取时往往选用新鲜的材料,理由是____________________________。
(4)对材料压榨后可得到糊状液体,为除去其中的固体物获得乳浊液可采用的方法是________。
(5)得到的乳浊液加入氯化钠并放置一段时间后,芳香油将分布于液体的_____层,原因是___________。加入氯化钠的作用是_____________。
(6)从乳浊液中分离得到的芳香油中要加入无水硫酸钠,此试剂的作用是______。
近20年来,PCR技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室的一种常规实验手段,其原理是利用DNA半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如图),在短时间内,将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,从而使实验室所需要的遗传物质不再受限于活的生物体。
(1)加热使DNA双链间的__________键完全打开,称为________;而在细胞中是在________酶的作用下进行的。
(2)如果只需要大量克隆模板DNA中间的某个特定区段,应该加入________种特定的引物。当温度降低至55 ℃时,引物与两条“舒展”的模板的特定位置结合,在DNA聚合酶的作用下,只能在引物的________端连接脱氧核苷酸,两条子链的延伸方向都是____________。
(3)PCR技术的必需条件,除了模板、原料、酶之外,至少还有三个条件,即液体环境、适宜的________和________,前者由________自动调控,后者则靠____来维持。
(4)通过PCR技术使DNA分子大量复制,如果将一个用15N标记的DNA分子放入试管中,以14N标记的脱氧核苷酸为原料,连续复制四次之后,则15N标记的DNA分子占全部DNA分子总数的比例是________。
回答下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验的问题。
(1)下列有关“DNA的粗提取和鉴定”实验原理的叙述,正确的是( )
A.DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的降低而减小
B.利用DNA不溶于酒精的性质,可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯净的DNA
C.DNA是大分子有机物,不溶于水而溶于某些有机溶剂
D.在沸水中,DNA遇二苯胺会出现紫色反应
(2)如下图为该实验过程中的一些重要操作示意图。
①正确的操作顺序是______________。
②上图C、E步骤都加入蒸馏水,但其目的不同,分别是________和________。
③图A步骤中所用酒精必须是经过_____才能使用,该步骤的目的是______。
(3)为鉴定A中所得到的丝状物的主要成分为DNA,可滴加________试剂,沸水浴,如果出现________,则该丝状物的主要成分为DNA。