人体细胞内含有抑制癌症发生的p53基因，生物技术可对此类基因的变化进行检测。
（1）目的基因的获取方法通常包括 、 和 。
（2）上图表示从正常人和患者体内获取的p53基因的部分区域。与正常人相比，患者在该区域的碱基发生了改变，这种变异被称为 。
（3）已知限制酶E的识别序列为CCGG，若用限制酶E分别完全切割正常人和患者的p53基因部分区域(见上图)，那么正常人的会被切成 个片段；而患者的则被切割成长度为 对碱基和 对碱基的两种片段。
（4）如果某人的p53基因部分区域经限制酶E完全切割后，共出现170、220、290和460对碱基的四种片段，那么该人的基因型是 (P+表示正常基因，P-表示异常基因)。
科学家将鱼抗冻蛋白基因转入番茄，使番茄的耐寒能力大大提高，可以在相对寒冷的环境中生长。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、HindⅢ、AluⅠ等四种限制酶切割位点，下图是转基因抗冻番茄培育过程的示意图（ampr为抗氨苄青霉素基因），其中①～②是重组基因的合成过程中的相关步骤，Ⅰ、Ⅱ表示相关结构或细胞。请据图作答：
（1）在构建基因表达载体时，可用一种或者多种限制酶进行切割。为了避免目的基因和载体在酶切后产生的末端发生任意连接，在此实例中，应该选用限制酶 分别对 进行切割，切割后产生的DNA片段分别为 种。
（2）培养基中的氨苄青霉素会抑制番茄愈伤组织细胞的生长，要利用该培养基筛选已导入含鱼的抗冻蛋白基因的番茄细胞，应使基因表达载体Ⅰ中含有 作为标记基因。
（3）研究人员通常采用 法将鱼抗冻蛋白基因导入番茄细胞内。通常采用 技术，在分子水平检测目的基因是否翻译形成了相应的蛋白质。
下列有关愈伤组织的说法，错误的是
A. 愈伤组织是进行异养生活，有氧代谢
B. 愈伤组织细胞再诱导后才进行分化
C. 愈伤组织的获得一般不需要光照
D. 愈伤组织不能产生变异，是一个无性繁殖体系
在下列选项中，需要采用植物组织培养技术的有几项
①利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗，获得多倍体植株 ②获取大量的脱毒苗
③利用基因工程培养抗棉铃虫的植株 ④单倍体育种 ⑤无子西瓜的快速大量繁殖
A. 5项 B. 4项 C. 3项 D. 2项
现有甲、乙两种植株（均为二倍体纯种），其中甲种植株的光合作用能力高于乙种植株，但乙种植株很适宜在盐碱地种植。要利用甲、乙两种植株各自优势，培育出高产、耐盐的植株，有多种生物技术手段可以利用。下列所采用的技术手段中不可行的是
A．利用植物体细胞杂交技术，可获得满足要求的四倍体杂种目的植株
B．将乙种植株耐盐基因导入到甲种植株的受精卵中，可培育出目的植株
C．两种植株杂交后，得到的F1再利用单倍体育种技术可较快获得纯种的目的植株
D．诱导两种植株的花粉融合并培育成幼苗，用秋水仙素处理，可培育出目的植株
为保持某名贵花卉的优良性状，并且快速繁殖，可以利用该植物一部分器官或组织进行离体培养，发育出完整的植株。应采用该植株的
A．花粉 B．幼叶 C．种子 D．胚囊
