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转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、Apa...

转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答:

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(1)构建含抗病基因的表达载体A时,应选用限制酶________、_____________,对_____________________、_____________进行切割。

(2)培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,应使基因表达载体A中含有________________,作为标记基因。

(3)香蕉组织细胞具有___________,因此,可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的__________、__________。

 

(1)PstⅠ、EcoRⅠ 含抗病基因的DNA、质粒 (2)抗卡那霉素基因    (3)全能性 脱分化、再分化 【解析】本题主要考查了基因工程及植物组织培养的相关内容。 (1)在构建表达载体时,要用相同的限制酶切割外源基因与运载体,以获得相同的末端,从而将两者相连。在选择限制酶时,两者都有此切割位点,且不能将目的基因破坏,故只能选择PstⅠ、EcoRⅠ位点。 (2)培养液中的卡那霉素抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,故要想培养香蕉愈伤组织,必须细胞中含有抗卡那霉素基因。所以能在此培养基上生长的细胞,都是具有抗卡那霉素基因,即具有表达载体A,具有目的基因,从而作出筛选。 (3)植物组织培养原理为植物细胞的全能性。其过程要经历脱分化与再分化
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