Question

依据基因工程技术和细胞工程有关原理回答下列问题：

（1）基因工程操作的基本步骤是：

①　　　　            ____ __；      ② 　　　　　　　       ____；

③　　　　　　　          ____；     ④　　　　　　　　         __。

（2）获取目的基因途径有　　　　　　　　　　　　、　　　　　　　　　　　　。

（3）下图是将人类的生长激素基因导入细菌B细胞内制造“工程菌”的示意图，所用的载体为质粒A。已知细菌B细胞内不含质粒A，也不含质粒A上的基因，质粒导入细菌B后，其上的基因能得到表达。简述重组质粒的主要过程包括：

①                                    ；

②                                    ；

③                                    。

④导入细菌B细胞的目的基因成功表达的标志是什么？                          ______。

Answer

（1）获取目的基因    构建基因表达载体   将目的基因导入受体细胞   目的基因的检测与鉴定    （2）直接分离    人工合成    （3）①用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个有粘性末端的切口   ②用同种限制酶切割目的基因，产生相同的粘性末端   ③将切下的目的基因片段插入到质粒的切口处，再加入适量的DNA连接酶，使质粒与目的基因结合成重组质粒   ④受体细胞合成人的生长激素

【解析】（1）基因工程的操作步骤有：获取目的基因、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。

（2）获取目的基因的途径有直接分离、人工合成。

（3）构建重组质粒的步骤有：①用一定的限制酶切割质粒，使其出现一个有粘性末端的切口②用同种限制酶切割目的基因，产生相同的粘性末端③将切下的目的基因片段插入到质粒的切口处，再加入适量的DNA连接酶，使质粒与目的基因结合成重组质粒④受体细胞合成人的生长激素。