Question

2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白（GFP）方面做出突出贡献的科学家。绿色荧光蛋白能在蓝光或紫外光的激发下发出荧光，这样借助GFP发出的荧光就可以跟踪蛋白质在细胞内部的移动情况，帮助推断蛋白质的功能。下图为我国首例绿色荧光蛋白（GFP）转基因克隆猪的培育过程示意图，据图回答：

（1）图中通过过程①、②形成重组质粒。限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—G↓GATCC—，

请写出质粒被限制酶Ⅰ切割后所形成的黏性末端。                               

（2）过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用的方法是                 _。

（3）如果将切取的GFP基因与抑制小猪抗原表达的基因一起构建到载体上，GFP基因可以作为基因表达载体上的标记基因，其作用是                                   。

（4）目前科学家们通过蛋白质工程制造出了蓝色荧光蛋白，黄色荧光蛋白等，采用蛋白质工程技术制造出蓝色荧光蛋白过程的正确顺序是：                  （2分、用数字表示）。

①推测蓝色荧光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸 

②蓝色荧光蛋白的功能分析和结构设计序列

③蓝色荧光蛋白基因的修饰（合成）

④表达出蓝色荧光蛋白。

Answer

38、（每空1分，5分）

（1）

（2）显微注射技术。

（3）鉴定受体细胞中是否含有目的基因  。

（4）②①③④   （2分）

【解析】（1）DNA双链结构，写黏性末端时需注意双链。

（2）将目的基因导入动物细胞常用显微注射法。

（3）标记基因用于检测目的基因是否导入受体细胞。

（4）蛋白质工程的基本途径是：从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→相应基因的修饰改造或人工合成→相应的表达。