Question

应用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请根据资料和图解回答下列问题：

材料一：蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊。

材料二：注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦，将疫苗藏身于水果蔬菜中，人们在食用这些转基因植物的同时也获得免疫力，因而无需免疫接种，这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。

（1）过程①⑤所需要的工具酶有                    ，构建的乙肝表面抗原蛋白基因表达载体一般由                                   等部分组成。

（2）过程②是将重组质粒导入山羊受体细胞，受体细胞应选择           ，采用最多的也是最有效的导入方法是            ；

     过程⑥是将重组质粒导入莴苣受体细胞，受体细胞可为                  ，采用最多的导入方法是                  。

（3）通过①～④过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器，从          中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。还可以形成膀胱生物反应器，从          中提取所需蛛丝蛋白，简化提取过程。

资料三：PCR技术（聚合酶链式反应）是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术，下图表示合成过程，请据图分析回答：

（4）A过程高温使DNA变性解旋，对该过程的原理叙述正确的是:(    )

A．该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键；

B．该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键；

C．该过程不需要解旋酶的作用；

D．该过程与人体细胞的过程完全相同；

（5）从图中可知，催化C过程的酶是   　          ，它与正常细胞内的酶区别是  　     ；PCR反应除提供酶、DNA模板、通过控制温度使DNA复制在体外反复进行外，还需要满足的两个基本条件是                         。

（6）如果把模板DNA的两条链用¹⁵N标记，游离的脱氧核苷酸不做标记，控制“94℃-55℃-72℃”温度循环3次，则在形成的子代DNA中含有¹⁵N标记的DNA占      。如果模板DNA分子共有a个碱基对，其中含有胞嘧啶m个，则该DNA复制10次，需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸                   个。

Answer

(1)限制酶和DNA连接酶（1分，答案不全不给分）； 乙肝表面抗原蛋白基因、启动子、终止子、标记基因（写全2分，不全面1分，顺序随意）   

(2)山羊的受精卵细胞；显微注射法；莴苣的体细胞或受精卵细胞（答案不全不给分）；农杆菌转化法； 

（3）乳汁；尿液；（4）C；

（5）Taq酶（热稳定DNA聚合酶）；耐高温；引物和四种游离的脱氧核苷酸（原料）（答案不全不给分）；

（6）25%；

【解析】（1）构建基因表达载体所需的酶有限制酶和DNA连接酶。基因表达载体包括乙肝表面抗原蛋白基因（目的基因）、启动子、终止子、标记基因。

（2）将目的基因导入动物细胞，选择的受体细胞是受精卵细胞，方法是显微注射法；将目的基因导入植物细胞，选择的受体细胞是体细胞或受精卵细胞，选择的方法是农杆菌转化法。

（3）乳腺生物反应器，是从动物的乳汁中获取蛛丝蛋白；膀胱生物反应器，是从动物的尿液中获取蛛丝蛋白。

（4）高温使DNA变性解旋，不需要解旋酶。

（5）PCR技术中催化DNA复制的酶是Taq酶，耐高温，DNA复制的条件有引物、酶、DNA模板、原料（四种游离的脱氧核苷酸）。

（6）DNA复制3次，共形成8个DNA，其中2个DNA，占1/4。该DNA中T有（a-m）个，DNA复制10次，需游离的胸腺嘧啶脱氧核苷酸（210－1）（a-m）个。