现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质,实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性,并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究,完成下列实验报告并回答有关问题。
【实验原理】有毒物质能诱导细胞产生变异,根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值),可判断该化学物质的毒性。
【实验材料】活的小白鼠胚胎。
【药品用具】胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、培养瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常体细胞有丝分裂各时期高倍显微照片。
【实验步骤】
(1)制备细胞悬浮液:把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎,转入锥形瓶中,加入 处理,使胚胎组织分散成单个细胞,再加入动物细胞培养液,制成细胞悬浮液。
(2)进行细胞培养:
①取A、B、C三个洁净的培养瓶, ,加入等量的细胞悬浮液。
②向A培养瓶中加入化学物质甲,向B培养瓶中加入 ,向C瓶内加入等量的生理盐水,并将培养瓶摇匀。
③在实验中,C培养瓶起什么作用? 。
(3)制作临时装片
①当细胞增殖到大约第8代左右时,同时从恒温箱中取出三个培养瓶,用胰蛋白酶液处理,使培养的细胞 ,再加入动物细胞固定液以便迅速杀死细胞并固定细胞。
②静置一段时间后,分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液,滴在与培养瓶有相同编号的载玻片的中央,用 染色,3~5 min后,盖上盖玻片。
(4)镜检和统计
把临时装片放在显微镜下,先用低倍镜后用高倍镜,寻找处于 期的细胞,并与C组对比以确认发生变异的细胞,同时统计 。
【结果与结论】
经研究人员实验得知:A、B、C三个培养瓶的Q值依次为:QA=1.3%、QB=12.5%、QC=0.1%,由此可知该实验的结论是 。
细胞融合又称体细胞杂交,是指两个或更多个相同或不同细胞融合形成单个细胞的过程。下图为细胞融合的一般过程,请据图回答:
(1)若A、B为植物细胞,在细胞融合之前已用 处理,除去了 ;A、B到C的过程中,常用的物理方法是 (至少写两个)。形成的D细胞还要应用 技术把D培养成植株。
(2) 若A、B是动物细胞,一般取自动物胚胎或幼龄动物的器官或组织,原因是 ,然后用胰蛋白酶处理使其分散开来;从A、B到C的过程中,常用的诱导剂是_ 。
(3)若该过程是制备单克隆抗体,A为小鼠B淋巴细胞,在获得此细胞之前,小鼠已被注射了 ;图中B为 。由D细胞连续分裂产生大量细胞的过程称为 ,这种细胞既能无限繁殖,又能分泌 。
(4)若该过程仍是制备单克隆抗体,在A、B到C的过程中,所形成的C有 种(只考虑两个细胞的相互融合);用来培养的D细胞应该是 ,从中选择出它的方法是
培养。获得D后,常用的培养方法在体外条件下做大规模培养或 。
应用基因工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请根据资料和图解回答下列问题:
材料一:蜘蛛丝(丝蛋白)被称为“生物钢”,有着超强的抗张强度,可制成防弹背心、降落伞绳等。蜘蛛丝还可被制成人造韧带和人造肌腱。科学家研究出集中生产蜘蛛丝的方法——培育转基因蜘蛛羊。
材料二:注射疫苗往往会在儿童和部分成年人身上引起痛苦,将疫苗藏身于水果蔬菜中,人们在食用这些转基因植物的同时也获得免疫力,因而无需免疫接种,这一新概念将引起疫苗研究的一场革命。
(1)过程①⑤所需要的工具酶有 ,构建的乙肝表面抗原蛋白基因表达载体一般由 等部分组成。
(2)过程②是将重组质粒导入山羊受体细胞,受体细胞应选择 ,采用最多的也是最有效的导入方法是 ;
过程⑥是将重组质粒导入莴苣受体细胞,受体细胞可为 ,采用最多的导入方法是 。
(3)通过①~④过程培育的蜘蛛羊可以作为乳腺生物反应器,从 中提取所需要的蜘蛛丝蛋白。还可以形成膀胱生物反应器,从 中提取所需蛛丝蛋白,简化提取过程。
资料三:PCR技术(聚合酶链式反应)是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术,下图表示合成过程,请据图分析回答:
(4)A过程高温使DNA变性解旋,对该过程的原理叙述正确的是:( )
A.该过程用到耐高温的解旋酶破坏氢键;
B.该过程用到限制酶破坏磷酸二酯键;
C.该过程不需要解旋酶的作用;
D.该过程与人体细胞的过程完全相同;
(5)从图中可知,催化C过程的酶是 ,它与正常细胞内的酶区别是 ;PCR反应除提供酶、DNA模板、通过控制温度使DNA复制在体外反复进行外,还需要满足的两个基本条件是 。
(6)如果把模板DNA的两条链用15N标记,游离的脱氧核苷酸不做标记,控制“94℃-55℃-72℃”温度循环3次,则在形成的子代DNA中含有15N标记的DNA占 。如果模板DNA分子共有a个碱基对,其中含有胞嘧啶m个,则该DNA复制10次,需要加入胸腺嘧啶脱氧核苷酸 个。
“没有买卖,就没有杀害!”野生东北虎保护受到社会广泛关注。在我国,东北虎的致危因素主要有是非法猎杀、栖息地的丧失与破坏、猎物的缺少等。
图1 图2
(1)图1所示的食物网中共有 条食物链,其中次级消费者是 。该食物网再加上_____________________ 就可以构成一个完整的生态系统。
(2)东北虎位于食物链的顶端,其领域里必须要有足够多的猎物才能维持其生存和繁衍,因为能量流动具有 特点。
(3)如果环境中的某种有毒物质在生物体内既不能分解,也不能排出体外,则该物质经
的传递后,便可在不同的生物体内积累。因此,通常生物所在的 越高,该有毒物质在其体内的积累量越大。
(4)图2是能量流经东北虎种群的示意图,其中A表示东北虎的摄入量,B表示东北虎的同化量。那么,D、E依次表示东北虎的 , 。
(5)东北地区保存有大面积森林,改善栖息环境,以提高 ,野生东北虎种群恢复仍有希望。
驱蚊草(又名蚊净香草)含有香茅醛,能散发出一种特殊的柠檬型香气,从而达到驱蚊且对人体无害的效果。驱蚊草是把天竺葵和香茅草的叶肉细胞进行诱导融合培育而成的。下列关于驱蚊草培育的叙述中,错误的是( )
A.培育方法属于细胞工程育种,其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍
B.培育手段是植物体细胞杂交,它不同于植物组织培养,无愈伤组织和试管苗形成
C.培育过程要用到纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或离心、振动、电刺激等方法
D.驱蚊草不能通过天竺葵和香茅草有性杂交而获得是因为不同物种间存在生殖隔离
下列对动物核移植技术的描述错误的是( )
A. 哺乳动物核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植,动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植
B. 体细胞核移植的过程中可通过显微操作去核法去除卵母细胞中的核
C. 体细胞核移植过程中通常采用MⅡ期卵母细胞作为受体细胞
D. 通过体细胞核移植方法生产的克隆动物是对体细胞供体动物进行了100%的复制