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(11分)下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图,请据图作答。 (1...

(11分)下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图,请据图作答。

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(1)构建基因工程表达载体时,用不同类型的限制酶切割DNA后,可能产生粘性末端,也可能产生_____末端。过程②必需的酶是        酶,过程③必需的酶是       酶。

(2)在利用AB获得C的过程中,必须用              切割A和B,使它们产生相同的粘性末端,再加入         ,才可形成C。利用大肠杆菌生产人胰岛素时,构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等,其中启动子的作用是__              ___。

(3)为使过程⑧更易进行,可用       (药剂)处理D。

(4)为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA,可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交,该杂交技术称为___       ___。为了检测胰岛素基因请转录的mRNA是否翻译成_____,常用抗原-抗体杂交技术。

(5)如果要将某目的基因通过农杆菌传话法导入植物细胞,先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_____中,然后通过农杆菌转化作用将目的基因插入植物细胞的______上。

 

(11分)(1)平末端  逆转录    解旋 (2)同一种限制性内切酶     DNA连接酶 RNA聚合酶识别和结合部位,驱动基因转录 (3)CaCl2      (4)DNA分子杂交技术 蛋白质 (5)T-DNA 染色体DNA 【解析】基因工限制酶切末端有粘性末端和平末端,由mRNA获得DNA的途径是逆转录法,在此过程中需乃至 逆转录酶、、真核生物的的基因由编码区和非编码区组成编码区含有内含子(不编码蛋白质),成熟的信使RNA不含内含子和非编码区所转录的对应的序列。故逆囩成的DNA中无内含子与非编码区;B能与目的基因结合并将目的基因导入大肠杆菌,所以B为运载体,大肠杆菌中的质粒常为运载体,运载体上面的标记基因是为了筛选了导入了目的基因的受体细胞,能将运载体切割的酶是限制性核酸内切酶,将目的基因与运载体相连的是DNA连接酶,将目的基因导入大肠杆菌进,常用 CaCl2 溶液处理大肠杆菌,增加细胞壁的通透性由于基因的选择性表达,胰岛素基因只在胰岛B细胞内表达而不在肝脏内表达,所以在肝脏细胞中不能转录出翻译胰岛素的模板信使RNA。利用DNA杂交技术检测是否导入成功,利用抗原抗体反应检测是否表达,将目的基因导入植物细胞通常用农杆菌转化法,将目的基因与T—DNA结合将目的基因导入到植物细胞核中的染色体上。
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考点分析:
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A.卵裂 、囊胚、桑椹胚 、原肠胚    

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