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(14分)某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的...

(14分)某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题:

(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养,培养液及其它培养条件均相同。一段时间后,观察到甲细胞数量比乙细胞数量      ,因为甲具有    特点。

(2)动物细胞培养时,常在合成培养基中加入适量血清,其原因是            。细胞培养应在含5% CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是                      

(3)在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长              。药物试验需要大量细胞,两种细胞频繁传代,甲细胞比乙细胞可以传代的次数更           。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用             消化处理。

(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的            。如细胞培养过程中要保存细胞,则通常在      条件下,因为在这种条件下,细胞中         的活性降低,细胞      的速率降低。

(5)已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关,要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响,可将甲细胞分为A、B两组,A组细胞培养液中加入           ,B组细胞培养液中加入无菌生理盐水,经培养后,从A、B两组收集等量细胞,通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的                       合成水平的差异,确定Y的药效。

 

(14分)(1)多  快速增殖 (2)血清可以补充合成培养基中缺乏的物质   维持培养液pH (3)停止 多  胰蛋白酶 (4)抗生素    冷冻(或超低温、液氮)  酶  新陈代谢 (5)Y  mRNA   蛋白质 【解析】肝肿瘤细胞壁正常肝细胞的分裂能力强,细胞周期短,在其他条件相同时,相同时间内产生的子代细胞多,在动物细胞培养的过程中,需要加入适宜血清可以补充培养基中缺乏的物质,而5%CO2的作用可以起到缓冲物质作用,维持培养液pH;正常动物细胞在培养瓶中培养是存在接触抑制现象,当铺满瓶壁时就停止生长,肿瘤细胞则没有接触抑制现象,而且可以更多次的进行传代;培养瓶中加入抗生素可以抑制细菌的活动;(5)中要设计的实验是要实验抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响,所以A、B两组肯定是一组加入Y,一组不加;而肿瘤细胞与一般细胞之间的在合成水平上的差异在于肿瘤细胞会合成较多的蛋白质,同时也会形成较多的mRNA。
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(8分)转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答:

说明: 6ec8aac122bd4f6e

(1)构建含抗病基因的表达载体A时,应选用限制酶                    ,对

                                              进行切割。

    (2)培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,应使基因表达载体A中含有         ,作为标记基因。

(3)香蕉组织细胞具有               ,因此,可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的                        

 

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(12分)请回答下列有关单克隆抗体的问题:

(1)从免疫的小鼠脾脏细胞中获取B淋巴细胞,与骨髓瘤细胞融合,形成_____________细胞,该细胞既具备骨髓瘤细胞的迅速          特点,又具备淋巴细胞的_________    特点,经过经多次筛选,并通过体内培养或体外培养生产得到所单克隆抗体。

(2)单克隆抗体与普通血清抗体相比较,具有_____________的特点。其诱导融合的常用方法                    、                                                在单克隆抗体的制备过程中,运用的技术手段是_____________、        

(3)生产单克隆抗体一般不直接培养浆细胞,主要原因是____________。杂交瘤细胞的体外培养与植物组织培养的培养基相比主要不同                

(4)从目前临床试验来看,单克隆抗体主要用于治疗癌症,例如可以把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素、药物等相结合,制成“生物导弹”,利用单克隆抗体的

                                作用,在原位杀死癌细胞,这样既不损伤正常细胞,又减少了用药剂量。

 

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(11分)下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图,请据图作答。

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(1)构建基因工程表达载体时,用不同类型的限制酶切割DNA后,可能产生粘性末端,也可能产生_____末端。过程②必需的酶是        酶,过程③必需的酶是       酶。

(2)在利用AB获得C的过程中,必须用              切割A和B,使它们产生相同的粘性末端,再加入         ,才可形成C。利用大肠杆菌生产人胰岛素时,构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等,其中启动子的作用是__              ___。

(3)为使过程⑧更易进行,可用       (药剂)处理D。

(4)为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA,可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交,该杂交技术称为___       ___。为了检测胰岛素基因请转录的mRNA是否翻译成_____,常用抗原-抗体杂交技术。

(5)如果要将某目的基因通过农杆菌传话法导入植物细胞,先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_____中,然后通过农杆菌转化作用将目的基因插入植物细胞的______上。

 

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关于哺乳动物胚胎发育顺序排列正确的是 (  )

A.卵裂 、囊胚、桑椹胚 、原肠胚    

B.受精卵、卵裂、囊胚、桑椹胚、原肠胚

C.卵裂、受精卵、囊胚、桑椹胚、原肠胚 

D.受精卵、卵裂 、桑椹胚、囊胚、原肠胚

 

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关于桑椹胚和囊胚的比较,以下说法不正确的是(  )

A. 囊胚期细胞分化是由于遗传物质突变引起的

B.囊胚期的细胞出现了细胞分化,但遗传物质未发生改变

C. 桑椹胚的各细胞结构功能基本相同

D.囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异不是复制水平上的差异,而是转录水平上的差异

 

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