(14分)某研究小组进行药物试验时,以动物肝细胞为材料,测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种,甲细胞为肝肿瘤细胞,乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题:
(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养,培养液及其它培养条件均相同。一段时间后,观察到甲细胞数量比乙细胞数量 ,因为甲具有 特点。
(2)动物细胞培养时,常在合成培养基中加入适量血清,其原因是 。细胞培养应在含5% CO2的恒温培养箱中进行,CO2的作用是 。
(3)在两种细胞生长过程中,当乙细胞铺满瓶壁时,其生长 。药物试验需要大量细胞,两种细胞频繁传代,甲细胞比乙细胞可以传代的次数更 。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液,需用 消化处理。
(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染,可向培养液中加入适量的 。如细胞培养过程中要保存细胞,则通常在 条件下,因为在这种条件下,细胞中 的活性降低,细胞 的速率降低。
(5)已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关,要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响,可将甲细胞分为A、B两组,A组细胞培养液中加入 ,B组细胞培养液中加入无菌生理盐水,经培养后,从A、B两组收集等量细胞,通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的 或 合成水平的差异,确定Y的药效。
(8分)转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答:
(1)构建含抗病基因的表达载体A时,应选用限制酶 和 ,对
、 进行切割。
(2)培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长,欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞,应使基因表达载体A中含有 ,作为标记基因。
(3)香蕉组织细胞具有 ,因此,可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的 、 。
(12分)请回答下列有关单克隆抗体的问题:
(1)从免疫的小鼠脾脏细胞中获取B淋巴细胞,与骨髓瘤细胞融合,形成_____________细胞,该细胞既具备骨髓瘤细胞的迅速 特点,又具备淋巴细胞的_________ 特点,经过经多次筛选,并通过体内培养或体外培养生产得到所单克隆抗体。
(2)单克隆抗体与普通血清抗体相比较,具有_____________的特点。其诱导融合的常用方法 、 、 在单克隆抗体的制备过程中,运用的技术手段是_____________、 。
(3)生产单克隆抗体一般不直接培养浆细胞,主要原因是____________。杂交瘤细胞的体外培养与植物组织培养的培养基相比主要不同
(4)从目前临床试验来看,单克隆抗体主要用于治疗癌症,例如可以把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素、药物等相结合,制成“生物导弹”,利用单克隆抗体的
作用,在原位杀死癌细胞,这样既不损伤正常细胞,又减少了用药剂量。
(11分)下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图,请据图作答。
(1)构建基因工程表达载体时,用不同类型的限制酶切割DNA后,可能产生粘性末端,也可能产生_____末端。过程②必需的酶是 酶,过程③必需的酶是 酶。
(2)在利用AB获得C的过程中,必须用 切割A和B,使它们产生相同的粘性末端,再加入 ,才可形成C。利用大肠杆菌生产人胰岛素时,构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等,其中启动子的作用是__ ___。
(3)为使过程⑧更易进行,可用 (药剂)处理D。
(4)为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA,可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交,该杂交技术称为___ ___。为了检测胰岛素基因请转录的mRNA是否翻译成_____,常用抗原-抗体杂交技术。
(5)如果要将某目的基因通过农杆菌传话法导入植物细胞,先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_____中,然后通过农杆菌转化作用将目的基因插入植物细胞的______上。
关于哺乳动物胚胎发育顺序排列正确的是 ( )
A.卵裂 、囊胚、桑椹胚 、原肠胚
B.受精卵、卵裂、囊胚、桑椹胚、原肠胚
C.卵裂、受精卵、囊胚、桑椹胚、原肠胚
D.受精卵、卵裂 、桑椹胚、囊胚、原肠胚
关于桑椹胚和囊胚的比较,以下说法不正确的是( )
A. 囊胚期细胞分化是由于遗传物质突变引起的
B.囊胚期的细胞出现了细胞分化,但遗传物质未发生改变
C. 桑椹胚的各细胞结构功能基本相同
D.囊胚期内细胞团和滋养层细胞差异不是复制水平上的差异,而是转录水平上的差异