（15分）现有甲、乙两个烟草品种（2n＝48），其基因型分别为aaBB和AAbb，这两对
基因位于非同源染色体上，且在光照强度大于800勒克司时，都不能生长，这是由于它们
中的一对隐性纯合基因（aa或bb）作用的结果。
取甲乙两品种的花粉分别培养成植株，将它们的叶肉细胞制成原生质体，并将两者相混，
使之融合，诱导产生细胞团。然后，放到大于800勒克司光照下培养，结果有的细胞团不
能分化，有的能分化发育成植株。请回答下列问题：
（1）甲、乙两烟草品种花粉的基因型分别为 和 。
（2）将叶肉细胞制成原生质体时，使用 破除细胞壁。
（3）在细胞融合技术中，常用的促融剂是 。
（4）细胞融合后诱导产生的细胞团叫 。
（5）在大于800勒克司光照下培养，有 种细胞团不能生长；不能生长的细胞团是
由 的原生质体融合来的（这里只考虑2个原生质体的相互融合）。
由能生长的细胞团分化发育成的植株，其染色体数是 ，基因型是 。
该植株自交后代中，在大于800勒克司光照下，出现能生长的植株的概率是 。
（14分）某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：
（1）将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其它培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量 ，因为甲具有 特点。
（2）动物细胞培养时，常在合成培养基中加入适量血清，其原因是 。细胞培养应在含5% CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是 。
（3）在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长 。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更 。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用 消化处理。
（4）为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的 。如细胞培养过程中要保存细胞，则通常在 条件下，因为在这种条件下，细胞中 的活性降低，细胞 的速率降低。
（5）已知癌基因X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入 ，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的 或 合成水平的差异，确定Y的药效。
（8分）转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。质粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四种限制酶切割位点。请回答：
（1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶 和 ，对
、 进行切割。
（2）培养板中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有 ，作为标记基因。
（3）香蕉组织细胞具有 ，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株。图中①、②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的 、 。
（12分）请回答下列有关单克隆抗体的问题：
（1）从免疫的小鼠脾脏细胞中获取B淋巴细胞，与骨髓瘤细胞融合，形成_____________细胞，该细胞既具备骨髓瘤细胞的迅速 特点，又具备淋巴细胞的_________ 特点，经过经多次筛选，并通过体内培养或体外培养生产得到所单克隆抗体。
（2）单克隆抗体与普通血清抗体相比较，具有_____________的特点。其诱导融合的常用方法 、 、 在单克隆抗体的制备过程中，运用的技术手段是_____________、 。
（3）生产单克隆抗体一般不直接培养浆细胞，主要原因是____________。杂交瘤细胞的体外培养与植物组织培养的培养基相比主要不同
（4）从目前临床试验来看，单克隆抗体主要用于治疗癌症，例如可以把抗癌细胞的单克隆抗体跟放射性同位素、药物等相结合，制成“生物导弹”，利用单克隆抗体的
作用，在原位杀死癌细胞，这样既不损伤正常细胞，又减少了用药剂量。
（11分）下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图，请据图作答。
（1）构建基因工程表达载体时，用不同类型的限制酶切割DNA后，可能产生粘性末端，也可能产生_____末端。过程②必需的酶是 酶，过程③必需的酶是 酶。
（2）在利用AB获得C的过程中，必须用 切割A和B，使它们产生相同的粘性末端，再加入 ，才可形成C。利用大肠杆菌生产人胰岛素时，构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子等，其中启动子的作用是__ ___。
（3）为使过程⑧更易进行，可用 （药剂）处理D。
（4）为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA，可用标记的胰岛素基因片段作探针与mRNA杂交，该杂交技术称为___ ___。为了检测胰岛素基因请转录的mRNA是否翻译成_____，常用抗原-抗体杂交技术。
（5）如果要将某目的基因通过农杆菌传话法导入植物细胞，先要将目的基因插入农杆菌Ti质粒的_____中，然后通过农杆菌转化作用将目的基因插入植物细胞的______上。
关于哺乳动物胚胎发育顺序排列正确的是 （ ）
A.卵裂 、囊胚、桑椹胚 、原肠胚
B.受精卵、卵裂、囊胚、桑椹胚、原肠胚
C.卵裂、受精卵、囊胚、桑椹胚、原肠胚
D.受精卵、卵裂 、桑椹胚、囊胚、原肠胚
