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人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗H...

人绒毛膜促性腺激素(HCG)是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白,制备抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG单克隆抗体制备流程示意图,请分析回答:

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(1)制备单克隆抗体过程中要用到____________和____________技术。

(2)使用培养基培养骨髓瘤细胞时,通常要加入             等天然成分,除了保证被培养细胞处于无菌、无毒及充足氧气的环境中,还需要保证细胞生活所需的              

(3)制备单克隆抗体过程中,给小鼠注射的HCG相当于____________,使小鼠产生分泌相应__________的淋巴细胞。此过程生产的单克隆抗体可以与____________特异性结合,从而诊断早孕。

(4)在B淋巴细胞内DNA合成有D和S两条途径,其中D途径能被氨基嘌呤所阻断。而骨髓瘤细胞的DNA合成没有S途径。

①利用DNA合成途径不同的特点配制的HAT培养基含有多种成分,其中添加的       成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。

②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是                          

 

(1)动物细胞培养技术      动物细胞融合技术 (2)血浆和血清    营养条件 (3)抗原      抗体        抗原(HCG) (4)氨基嘌呤       既能大量增殖,又能产生所需的特异性抗体 【解析】(1)制备单克隆抗体要用到动物细胞培养和动物细胞融合技术。 (2)动物细胞培养时需加入动物血清或血浆等天然成分,同时在培养液中加入细胞生活所需要营养物质。 (3)HCG属于抗原,刺激小鼠引发体液免疫,产生抗体,单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高,与抗原特异性结合,诊断早孕。 (4)抑制骨髓瘤细胞分裂的方法是添加氨基嘌呤。杂交瘤细胞具有的特点是既能大量增殖,又能产生所需的特异性抗体。
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考点分析:
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大肠杆菌pUC118质粒的某限制酶唯一酶切序列,位于该质粒的lacZ基因中,lacZ基因中如果没有插入外源基因,lacZ基因便可表达出b-半乳糖苷酶,当培养基中含有IPTG和X-gal时,X-gal便会被b-半乳糖苷酶水解成蓝色,大肠杆菌将形成蓝色菌落;如果lacZ基因中插入了外源基因,带有pUC118质粒的大肠杆菌便不能表达b-半乳糖苷酶,培养基中的X-gal不会被水解成蓝色,大肠杆菌将形成白色菌落。pUC118还携带了氨苄青霉素抗性基因。下图是利用lacZ基因的插入失活筛选重组质粒示意图。据图回答下列问题:

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(1)作为受体大肠杆菌应_____________(填“含有”或“不含有”)氨苄青霉素抗性基因,以方便筛选已导入重组质粒的受体大肠杆菌。取用氯化钙溶液处理(增加其细胞壁的通透性)过的受体大肠杆菌,置于试管Ⅱ中,完成基因工程操作的              步骤(具体步骤)。如果受体细胞是植物细胞,则通过            转化作用将目的基因导入受体细胞,因为其Ti质粒中的T—DNA有          特点。

(2)图中的选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外,还应加入____________________等物质,用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌。

(3)将上述处理后的大肠杆菌置于图中选择培养基上培养,以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒,请预测菌落的颜色,并分析结果:

                                                                     

                                                                     

 

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下列有关生物学实验原理和技术操作的叙述中,正确的是

A.研究人类遗传病的遗传方式,一定要调查患者家系的情况

B.在探究影响酶活性的因素时,温度、酸碱度、使用试剂的量等都是自变量

C.西瓜汁中含有丰富的葡萄糖和果糖,可用作还原糖鉴定的代替材料

D.换高倍镜后因视野较暗,应调节粗准焦螺旋

 

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下列有关生物学实验叙述中,正确的是

A.在酸性条件下,酒精可与重铬酸钾溶液反应变成蓝绿色

B.提取和分离叶绿体中的色素,可采用离心、过滤和纸层析法

C.观察植物细胞的质壁分离和复原时,实验材料要始终保持生物活性

D.观察植物细胞有丝分裂过程可采用活体染色法和连续的显微观察法

 

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以下实验方法可达到实验目的的是

A.用苏丹IV鉴定大豆种子细胞,显微镜下可见染成红色的颗粒

B.用溴麝香草酚蓝水溶液检测酵母菌无氧呼吸是否产生了酒精

C.用标志重捕法调查某一区域内土壤动物的丰富度

D.用洋葱鳞片叶内表皮细胞观察DNA和RNA在细胞中的分布

 

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下列对实验的相关叙述,正确的是

A.探索淀粉酶对淀粉和蔗糖的专一性时,可用碘液代替斐林试剂进行鉴定

B.纸层析法分离叶绿体色素的实验结果表明,叶绿素b在层析液中溶解度最低

C.若探究温度对酶活性的影响,可选择过氧化氢溶液作为底物

D.检测试管中的梨汁是否有葡萄糖,可加入适量斐林试剂后,摇匀并观察颜色变化

 

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